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Invitrogen Lipofectamine RNAiMAX Transfection Reagentは、siRNA導入のための高度で効率的なソリューションを提供します。他のsiRNA特異的トランスフェクション試薬は、一般的な細胞タイプ、幹細胞、初代細胞から従来トランスフェクションが困難な細胞タイプまで、幅広い細胞株にこのほど簡単で効率的なsiRNA導入を実現しません。
効果的な遺伝子ノックダウンを実現するために、Lipofectamine RNAiMAX Transfection Reagentは他のsiRNAトランスフェクション試薬よりも簡単に優れています。わずか1 nMのsiRNAでターゲット遺伝子の高いノックダウンレベルを実現できます(図1)。Lipofectamine RNAiMAXプロトコルでは、ノックダウンレベルを最大化するための出発点として10 nM siRNAを使用することを推奨しています。
Lipofectamine RNAiMAX Transfection Reagentは、試薬の10倍の濃度範囲で、最大限のノックダウンと優れた細胞生存率を提供します(図2)。これにより、Lipofectamine RNAiMAX試薬は、実験系の細胞毒性を低減しながら、最小のsiRNA濃度に最適化することが容易になります。トランスフェクションによる細胞毒性は、研究対象のターゲット遺伝子の真の表現型を隠蔽する可能性があるため、トランスフェクションに使用される試薬量を最小限に抑えることは、RNAi実験を成功させるための重要な要素です。
図2. Lipofectamine RNAiMAX Transfection ReagentでトランスフェクションしたA549細胞の最適なノックダウンと最小限の細胞毒性。1.0 μL~0.1 μLのLipofectamine RNAiMAX試薬を使用した結果、優れた細胞生存率を維持しながら、p53遺伝子発現レベルを効率的にノックダウンしました。
Lipofectamine RNAiMAX試薬は幅広い種類の細胞をトランスフェクトする能力を備えており、Invitrogen BLOCK-iT Alexa Fluor Red Fluorescent Controlと組み合わせることで、あらゆるノックダウン実験にもっとも用途の広いアプローチを提供します(表1、図3)。Lipofectamine RNAiMAXはトランスフェクション複合体を除去したり、トランスフェクション後に培地を交換または追加する必要のない、シンプルなプロトコルを提供します。作業時間を短縮し、より迅速に結果を得ることができます。
図3. BLOCK-It Alexa Fluor Red Fluorescent Controlを使用してトランスフェクション効率を向上させます。Lipofectamine RNAiMAX Transfection Reagentを使用して、HeLa細胞にBLOCK-It Alexa Fluor Red Fluorescent Control(50 nM)をトランスフェクションしました。A. トランスフェクションから24時間後、ほぼ100%の細胞がコントロールを取り、明視野(画像B)に見られるように正常な形態を維持します。
細胞株/タイプ | 細胞種 |
---|---|
MDA-MB-435 | 乳がん |
HeLa | 子宮頸がん |
HT1080 | ヒト線維肉腫 |
A549 | 肺がん |
HepG2 | 肝がん |
MCF7 | 乳がん |
SK-N-SH | 神経芽細胞腫 |
間葉系幹細胞 | 骨髄 |
HAMSC | ヒト大動脈平滑筋細胞 |
HEKa | ヒト上皮ケラチノサイト |
HRE | ヒト腎上皮細胞 |
NTERA-2 | 胚性がん細胞 |
HUVEC | ヒト臍帯静脈内皮細胞 |
ADSC | 脂肪由来幹細胞 |
HCT116 | 結腸がん |
Lipofectamine RNAiMAX試薬を用いたsiRNAトランスフェクションに必要なステップを動画でご覧ください。
Packaging must protect the product inside—but that doesn’t have to mean sacrificing sustainability. Lipofectamine products are shipped at ambient temperature, diverting 24,000 ft3 of Expanded Polystyrene (EPS) coolers from landfills annually. We reduce the carbon footprint from packaging and shipping these products by 80 tons (CO2 equivalents).
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