細胞増殖解析は、細胞の成長および分化の研究にとって極めて重要であり、薬物開発において、化合物の毒性および腫瘍細胞の増殖阻害を評価するためにしばしば使用されます。増殖の測定は一般的には、DNA含量の平均値または細胞代謝に基づいて行われます。アッセイは、全細胞数または生細胞を明らかにする、あるいは単一細胞におけるDNA合成を測定することが可能です。

当社が提供している幅広い種類のMolecular Probes®細胞解析アッセイおよび蛍光ラベルは、細胞増殖、細胞毒性または薬物の有効性の研究など、複雑な生物学的研究をイメージング、マイクロプレートまたはフローサイトメトリーアッセイプラットフォーム上で実現します。

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フローサイトメトリー用細胞増殖アッセイ

もご参照ください。

新生DNA合成—イメージング/ハイコンテンツスクリーニング

新生DNA合成を測定することにより、単一細胞中または細胞集団における細胞増殖の正確なアッセイ法が実現します。Click-iT® EdU アッセイは、ヌクレオシドアナログであるEdU のDNAへの取り込みに基づいて、新生DNA合成速度を測定します。検出は銅触媒の“click”反応により行われ、通常30分以内に完了します。

Click-iT® EdU イメージングアッセイでは、温和な反応条件を使用し、さらに極めて明るいAlexa Fluor® “click” ラベルにより、幅広い種類の蛍光オプションが供給されるため、これらのDNA合成アッセイ試薬はマルチプレックス適合性が高くなり、内容が豊富で意味の深い結果が得られます。アッセイキットは、培養細胞または組織片の蛍光顕微鏡法による解析、マイクロプレート中のHCSまたは細胞溶解物のマイクロプレートアッセイ用などがあります。

Click-iT® Plus

Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 イメージングキットを使用したHeLa 細胞の多色イメージング.

新生DNA合成—HTS

Click-iT® EdU マイクロプレートアッセイは、簡単で迅速なワークフローを使用し、マイクロプレートベースの蛍光解析用に最適化されています。

本アッセイでは、修飾チミジンアナログEdUが、新生DNAに高効率で取り込まれ、明るく光安定性の高いAmplex® UltraRed 色素により、高選択性のクリック反応において迅速に蛍光標識されます。増殖中の細胞のこの蛍光ラベル化は迅速かつ正確であり、従来のBrdU法または蛍光細胞増殖アッセイと比較すると、洗浄ステップの省略により時間が25%(以上)節約できるという利点を有しています。

シグナルは新生DNA合成に伴って増加します

蛍光または吸光のいずれかによって検出することが可能です。

Click-iT® EdU microplate assay

アフィジコリン処理細胞のClick-iT® EdU マイクロプレートアッセイを使用した増殖検出

代謝インジケーター

Molecular Probes® 代謝インジケーターは、細胞の還元電位を測定し、蛍光または吸光ベースのマイクロプレートリーダーに適合します。シグナルは、ウェル中の生細胞数に比例します。

様々なレポーターが入手可能で、いずれの場合も、活発に呼吸している細胞はインジケーター試薬を高蛍光度または高色素性の産物に還元します。生存不可能な細胞または傷害性の細胞は、増殖も不可能である可能性が高く、還元能が低下しているため生成されるシグナルは低くなります。アッセイを複数のタイムポイントで行うことにより、各タイムポイントでのシグナルを使用して、細胞集団の平均的な増殖速度を評価することができます。

alamarBlue® インジケーターは無毒性であり、アッセイを生細胞において行うことができるため、ダウンストリームの機能解析が可能となります。

 

alamarBlue® Reduction

alamarBlue® インジケーターを使用した成長阻害物質の有効性のモニタリング

DNA 含量

CyQUANT® 細胞増殖アッセイは、細胞のDNA含量に基づいて、細胞集団における細胞数をカウントするための、正確なマイクロプレートベースの蛍光測定法を提供します。細胞のDNA 含量は高度に制御されているため、CyQUANT® アッセイを複数の時点において使用することにより、細胞集団の平均的な増殖速度を算出することが可能となります。CyQUANT® 色素のDNAへの結合は、代謝状態に依存しないため、シグナルウインドウおよび蛍光強度を、幅広い条件および細胞タイプにおいて比較することが可能です。

様々なCyQUANT® アッセイフォーマットにより、異なるワークフローのオプションが提供され、全細胞数の複数日およびエンドポイントアッセイおよび生細胞のアッセイなどが可能となります。

 

CyQUANT® Cell Proliferation Assay Kit

CyQUANT® 細胞増殖アッセイキットを使用したNIH 3T3 線維芽細胞の定量

細胞増殖製品のための選択ガイド

Click-iT® Plus EdU アッセイキットは、増殖細胞中におけるDNA複製解析のための簡単で強力な方法を提供し、全工程はわずか90分間で完了します。新規のピコリルアジドおよび銅保護剤試薬により、Click-iT® Plus キットはGFP、RFP、mCherry、R-PEおよび R-PE タンデムとのマルチプレックス解析を可能とします。キットは、顕微鏡イメージングまたはHCS用に入手可能で、様々な蛍光波長でのマルチプレックス解析が行えます。

蛍光顕微鏡用選択ガイド

 Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 488 イメージングキットClick-iT® Plus EdU Plus Alexa Fluor® 555 イメージングキットClick-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 594 イメージングキットClick-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 イメージングキット
アッセイの原理修飾チミジンアナログEdUが、増殖細胞中の新生DNAに取り込まれます。細胞を、明るく光安定性の高いAlexa Fluor® 色素で、迅速かつ高選択性のクリック反応でラベルします。
リードアウト蛍光シグナルは、EdU インキュベーション中に、DNAが合成されている細胞の核に蓄積します。
蛍光ラベルAlexa Fluor® 488 ピコリルアジドAlexa Fluor® 555 ピコリルアジドAlexa Fluor® 594 ピコリルアジドAlexa Fluor® 647 ピコリルアジド
標準フィルターセットFITCTRITCTexas Red®Cy®5
励起/発光(nm)495/519555/565590/617650/668
シグナル対ノイズ比five starsfive starsfive starsfive stars
光安定性four starsfive starsfive starsfive stars
参考文献
マルチプレックス解析温和なクリックケミストリーのプロトコルは、(BrdU プロトコルとは異なり)細胞内エピトープを破壊せず、抗体によるラベル、蛍光タンパク質およびイメージングまたはHCSのための一般的な細胞または組織染色法に適合します。
サンプルの種類生細胞および組織片のために最適化されています;クリック検出は固定後に行います。
フォーマット1 キット/50–250 カバースリップ1 キット/50–250 カバースリップ1 キット/50–250 カバースリップ1 キット/50–250 カバースリップ
Cat.No.C10637C10638C10639C10640

 

HCS用マイクロプレートベースアッセイ選択ガイド

 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 488 HCS アッセイClick-iT® EdU Alexa Fluor® 555 HCS アッセイClick-iT® EdU Alexa Fluor® 594 HCS アッセイClick-iT® EdU Alexa Fluor® 647 HCS アッセイ
アッセイの原理修飾チミジンアナログEdUが、増殖細胞中の新生DNAに取り込まれます。細胞を、明るく光安定性の高いAlexa Fluor® 色素で、迅速かつ高選択性のクリック反応によりラベルします。
リードアウト蛍光シグナルは、EdU インキュベーション中に、DNAが合成されている細胞の核に蓄積します。
蛍光ラベルAlexa Fluor® 488Alexa Fluor® 555Alexa Fluor® 594Alexa Fluor® 647
標準フィルターセットFITCTRITCTexas Red®Cy®5
励起/発行(nm)495/519555/565590/617650/668
シグナル対ノイズ比- five starsfive starsfive starsfive stars
光安定性four starsfive starsfive starsfive stars
参考文献
マルチプレックス解析温和なクリックケミストリーのプロトコルは、(BrdU プロトコルとは異なり)細胞内エピトープを破壊せず、抗体ラベル、蛍光タンパク質およびイメージングまたはHCSのための一般的な細胞または組織染色法と適合します。試薬は細胞培養の培地に直接添加することが可能です
フォーマット2 プレート10 プレート2 プレート10 プレート2 プレート10 プレート2 プレート10 プレート
カタログ.No.C10350C10351C10352C10353C10354C10355C10356C10357

マイクロプレートアッセイでは、細胞集団の増殖に関する情報(計数または全細胞数)が得られますが、個々の細胞またはサブポピュレーションに関するデータは得られません。

 
アッセイの原理 新生DNAを検出します(活発に分裂している細胞)
リードアウトシグナルは新生DNA合成に伴って増加します;蛍光または吸光のいずれかにより検出することが可能です
蛍光ラベルAmplex® UltraRed
標準フィルターセットローダミン
参考文献引用
マルチプレックス解析不可
生細胞 不可
固定細胞不可
フォーマット1 キット/4 プレート
カタログ.
No.C10214

マイクロプレートアッセイでは、細胞集団の増殖に関する情報(すなわち、計数または全細胞数)が得られますが、個々の細胞またはサブポピュレーションに関するデータは得られません

  alamarBlue® インジケーターXTT (2,3-ビス-(2-メトキシ-4-ニトロ-5-スルフォフェニル)-2H-テトラゾリウム-5-カルボキシアニリド)Vybrant® MTT 細胞増殖アッセイキット(1,000 アッセイ)
アッセイの原理 細胞の還元電位を測定します;シグナルは生細胞数に比例します
リードアウト全細胞または細胞溶解物由来の蛍光または比色分析シグナル細胞溶解物由来の比色分析リードアウト
蛍光ラベルレサズリンXTT/ホルマザンMTT/ホルマザン
蛍光/吸光FL 571/585 nmABSABS
参考文献引用引用引用
マルチプレックス解析
フォーマット25 mL100 mL100 mg1 キット/10プレート
カタログNo.DAL1025DAL1100X6493V13154

マイクロプレートアッセイでは、細胞集団の増殖に関する情報(計数または全細胞数)が得られますが、個々の細胞またはサブポピュレーションに関するデータは得られません。

 
アッセイの原理 DNA含量に基づいて細胞数を検出します;リードアウトは代謝状態に依存しません。
リードアウト複数タイムポイントの試験においては、培養細胞は凍結する必要があり、それぞれ共通のスタンダードと共にアッセイを行います。迅速なリードアウトのための効率的なプロトコル;凍結ステップを排除;開始から終了までが1時間のアッセイ15-分プロトコル;凍結、溶解または温度平衡化の必要はありません;生存率のインジケーター(死細胞はカウントしません)
範囲50~50,000 細胞100~20,000 細胞50~20,000 細胞
蛍光ラベルCyQUANT® GRCyQUANT® NFCyQUANT® Direct
標準フィルターセットFITC
参考文献引用
上部/下部リード両方両方下部リード
マルチプレックス解析
フォーマット1 キット/1,000 アッセイ1 キット/200 アッセイ1 キット/10 プレート
カタログNo.C7026C35006C35011

Click-iT® Plus EdU アッセイキットは、増殖細胞中におけるDNA複製解析のための簡単で強力な方法を提供し、全工程はわずか90分間で完了します。新規のピコリルアジドおよび銅保護剤試薬により、Click-iT® Plus キットはGFP、RFP、mCherry、R-PEおよび R-PE タンデムとのマルチプレックス解析を可能とします。キットは、顕微鏡イメージングまたはHCS用に入手可能で、様々な蛍光波長でのマルチプレックス解析が行えます。

蛍光顕微鏡用選択ガイド

 Click-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 488 イメージングキットClick-iT® Plus EdU Plus Alexa Fluor® 555 イメージングキットClick-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 594 イメージングキットClick-iT® Plus EdU Alexa Fluor® 647 イメージングキット
アッセイの原理修飾チミジンアナログEdUが、増殖細胞中の新生DNAに取り込まれます。細胞を、明るく光安定性の高いAlexa Fluor® 色素で、迅速かつ高選択性のクリック反応でラベルします。
リードアウト蛍光シグナルは、EdU インキュベーション中に、DNAが合成されている細胞の核に蓄積します。
蛍光ラベルAlexa Fluor® 488 ピコリルアジドAlexa Fluor® 555 ピコリルアジドAlexa Fluor® 594 ピコリルアジドAlexa Fluor® 647 ピコリルアジド
標準フィルターセットFITCTRITCTexas Red®Cy®5
励起/発光(nm)495/519555/565590/617650/668
シグナル対ノイズ比five starsfive starsfive starsfive stars
光安定性four starsfive starsfive starsfive stars
参考文献
マルチプレックス解析温和なクリックケミストリーのプロトコルは、(BrdU プロトコルとは異なり)細胞内エピトープを破壊せず、抗体によるラベル、蛍光タンパク質およびイメージングまたはHCSのための一般的な細胞または組織染色法に適合します。
サンプルの種類生細胞および組織片のために最適化されています;クリック検出は固定後に行います。
フォーマット1 キット/50–250 カバースリップ1 キット/50–250 カバースリップ1 キット/50–250 カバースリップ1 キット/50–250 カバースリップ
Cat.No.C10637C10638C10639C10640

 

HCS用マイクロプレートベースアッセイ選択ガイド

 Click-iT® EdU Alexa Fluor® 488 HCS アッセイClick-iT® EdU Alexa Fluor® 555 HCS アッセイClick-iT® EdU Alexa Fluor® 594 HCS アッセイClick-iT® EdU Alexa Fluor® 647 HCS アッセイ
アッセイの原理修飾チミジンアナログEdUが、増殖細胞中の新生DNAに取り込まれます。細胞を、明るく光安定性の高いAlexa Fluor® 色素で、迅速かつ高選択性のクリック反応によりラベルします。
リードアウト蛍光シグナルは、EdU インキュベーション中に、DNAが合成されている細胞の核に蓄積します。
蛍光ラベルAlexa Fluor® 488Alexa Fluor® 555Alexa Fluor® 594Alexa Fluor® 647
標準フィルターセットFITCTRITCTexas Red®Cy®5
励起/発行(nm)495/519555/565590/617650/668
シグナル対ノイズ比- five starsfive starsfive starsfive stars
光安定性four starsfive starsfive starsfive stars
参考文献
マルチプレックス解析温和なクリックケミストリーのプロトコルは、(BrdU プロトコルとは異なり)細胞内エピトープを破壊せず、抗体ラベル、蛍光タンパク質およびイメージングまたはHCSのための一般的な細胞または組織染色法と適合します。試薬は細胞培養の培地に直接添加することが可能です
フォーマット2 プレート10 プレート2 プレート10 プレート2 プレート10 プレート2 プレート10 プレート
カタログ.No.C10350C10351C10352C10353C10354C10355C10356C10357

マイクロプレートアッセイでは、細胞集団の増殖に関する情報(計数または全細胞数)が得られますが、個々の細胞またはサブポピュレーションに関するデータは得られません。

 
アッセイの原理 新生DNAを検出します(活発に分裂している細胞)
リードアウトシグナルは新生DNA合成に伴って増加します;蛍光または吸光のいずれかにより検出することが可能です
蛍光ラベルAmplex® UltraRed
標準フィルターセットローダミン
参考文献引用
マルチプレックス解析不可
生細胞 不可
固定細胞不可
フォーマット1 キット/4 プレート
カタログ.
No.C10214

マイクロプレートアッセイでは、細胞集団の増殖に関する情報(すなわち、計数または全細胞数)が得られますが、個々の細胞またはサブポピュレーションに関するデータは得られません

  alamarBlue® インジケーターXTT (2,3-ビス-(2-メトキシ-4-ニトロ-5-スルフォフェニル)-2H-テトラゾリウム-5-カルボキシアニリド)Vybrant® MTT 細胞増殖アッセイキット(1,000 アッセイ)
アッセイの原理 細胞の還元電位を測定します;シグナルは生細胞数に比例します
リードアウト全細胞または細胞溶解物由来の蛍光または比色分析シグナル細胞溶解物由来の比色分析リードアウト
蛍光ラベルレサズリンXTT/ホルマザンMTT/ホルマザン
蛍光/吸光FL 571/585 nmABSABS
参考文献引用引用引用
マルチプレックス解析
フォーマット25 mL100 mL100 mg1 キット/10プレート
カタログNo.DAL1025DAL1100X6493V13154

マイクロプレートアッセイでは、細胞集団の増殖に関する情報(計数または全細胞数)が得られますが、個々の細胞またはサブポピュレーションに関するデータは得られません。

 
アッセイの原理 DNA含量に基づいて細胞数を検出します;リードアウトは代謝状態に依存しません。
リードアウト複数タイムポイントの試験においては、培養細胞は凍結する必要があり、それぞれ共通のスタンダードと共にアッセイを行います。迅速なリードアウトのための効率的なプロトコル;凍結ステップを排除;開始から終了までが1時間のアッセイ15-分プロトコル;凍結、溶解または温度平衡化の必要はありません;生存率のインジケーター(死細胞はカウントしません)
範囲50~50,000 細胞100~20,000 細胞50~20,000 細胞
蛍光ラベルCyQUANT® GRCyQUANT® NFCyQUANT® Direct
標準フィルターセットFITC
参考文献引用
上部/下部リード両方両方下部リード
マルチプレックス解析
フォーマット1 キット/1,000 アッセイ1 キット/200 アッセイ1 キット/10 プレート
カタログNo.C7026C35006C35011