FFPEからのRNA抽出

お客様に最適なFFPEサンプル用RNA Extraction Kitはどちらですか？

	簡単で信頼性が高く迅速		操作が簡単で最高のRNA収量を実現し強固なサンプルに対応		ハイスループット用。簡単な操作で最高のRNA収量を実現しながらタフなサンプルに対応。
	PureLink™ FFPE RNA Isolation Kit		FFPE用RecoverAll™ Total Nucleic Acid Isolation Kit		MagMAX™ FFPE Total Nucleic Acid Isolation Kit
推奨:			ベストセラー		新
切片10ミクロンあたりから期待されるRNA収量	1μg		3.5 µg		3 µg
調製時間	30 分		2時間		3時間 （96プレップ）
最終の抽出製品	トータルRNA		トータルRNA、microRNA、ゲノムDNA		トータルRNA、microRNA、ゲノムDNA
脱パラフィン用に有機溶媒（キシレン）が必要
ハイスループット対応可能
使用可能なFFPEサンプルの範囲	3～8 × 10 ミクロンの切片		最高4 × 20 ミクロンの切片		2 × 10 ミクロンの切片
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FFPEサンプルから単離されるRNAの品質および収量は多くの要因に影響されます。 ここには、その中のいくつかの主要因への対処に役立つアドバイスを示しています。

1. 組織入手および組織検体調製‐可能ならば、組織は外科的切除から1時間以内に固定することが望まれます。 固定化プロセスの完了までにRNAが著しく劣化する可能性があります。 最適な固定化時間は12～24時間で、中性緩衝ホルマリンまたはパラホルムアルデヒドを使用します。 固定化した組織は包埋プロセスの前に完全に乾燥させておく必要があります。
2. ブロックでの保存－可能であれば、試料を切断面のないブロックの状態で保存することにより、大気中の酸素、水分およびその他の環境因子である光や寄生物（カビ、昆虫等）等への曝露による試料の継続的な損傷を抑えることができます。
3. RNA単離に使用する組織の種類、サイズおよび量 －組織の厚さとしては10～20 μmを推奨します。使用する切片の数は組織の種類（組織の種類は細胞密度に影響を与えます）および表面積（推奨サイズ：50～300 mm2）により決定します。 スタートサンプルの量が多すぎるとフィルターが詰まり、収量が低下します。
4. 組織包埋に使用した余分な量のパラフィン－可能であれば、精製を開始する前に余分なパラフィンを除去しておくことが望まれます。 キシレンベースの精製法においては、通常室温で2回のキシレン処理により完全な脱パラフィンが可能です。 必要に応じて、37～55℃での処理を最高30分間まで行うことも可能です。 キシレンによる脱パラフィン後、100%エタノールによる洗浄を2回実施した後に100%エタノールを完全に除去し、ペレットを完全に乾燥させることは極めて重要です。 磁気ビーズ法では新開発のケミストリーを使用することにより、20μmまでのパラフィン切片に対処しています。

MagMAX™ FFPE Nucleic Acid（NA）単離キットは、FFPEサンプルから迅速で効率が高く自動化が可能なトータルRNAおよびDNAの単離のためにデザインされたキットで、MagMAX™磁気ビーズを使用しています。 MagMAX™ FFPE NAキットは、より迅速なワークフローと低毒性試薬の使用しているので、精製過程で品質が劣化することはありません。 これらのキットでは、最高の性能を有するRecoverAll™フィルターベースシステムに匹敵する核酸収量および純度を得ることができます。 The MagMAX™ FFPE NAキットは類似製品より優れた性能を示し、本キットを使用して得られるRNAおよびDNA収量は、より長い時間をかけ、危険度が高くしかもより低いスループットのプロトコールを使用することにより得られる収量と同等です。

RecoverAll™ Total Nucleic Acid Isolation Kitを使用する操作に必要な手作業時間は約45分間で、RNAの単離は1日以内で容易に完了させることが可能です。 FFPEサンプルはキシレンおよびエタノールを使用した一連の洗浄により脱パラフィンされます。 次いで、脱パラフィンされたサンプルのプロテアーゼ消化が行われますが、RNAおよびDNAそれぞれの回収に見合ったインキュベーション時間が必要になります。 核酸はガラスフィルターにより精製され、フィルター上でヌクレアーゼ処理が行われ、核酸の溶出には水または付属の低塩濃度バッファーが使用されます。