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遺伝子機能分析や創薬ターゲット発見で重要な要素は、タンパク質が細胞内でどのように相互作用しているかを理解することです。Gateway® テクノロジー搭載 ProQuest™ ツーハイブリッドシステムは、タンパク質相互作用を同定するための、試験済みの堅牢なin vivo 酵母ベースのシステムです。baitおよびprey発現用に特別に設計されたコンポーネントが用意されており、簡単な組換えクローニングを使用して、ProQuest™システムと他の発現および分析ツールとの間で、シーケンスを迅速に移すことができます。

ProQuest™システムのベクターの機能は以下のとおりです。

pDEST™ 32 baitベクター

  • 酵母のLowコピー数維持のためのARS-CEN配列
  • Gateway®クローニング用のattRサイト
  • ロイシン不含培地でのセレクションに使用するためのLEU2

pDEST™22 preyベクター

  • prey融合タンパク質を生成する目的の既知遺伝子の発現用
  • 酵母のLowコピー数維持のためのARS-CEN配列
  • Gateway®クローニング用のattRサイト
  • トリプトファン不含培地でのセレクションに使用するためのTRP1

pEXP-AD502 preyベクター

  • preyタンパク質同定のためのcDNA ライブラリまたは遺伝子ライブラリの作成用
  • 酵母のLowコピー数維持のためのARS-CEN配列
  • Gateway®クローニング用のattRサイト
  • ロイシン不含培地でのセレクションに使用するためのLEU2

pEXP32/Krev1

  • GAL4 DNA結合ドメインに融合したKrev-1(GTP結合タンパク質のRasファミリーのメンバーの1つ)を発現するコントロールbaitベクター

pEXP22/RalGDS-wt

  • GAL4 DNA活性化ドメインに融合した野生型RalGDSを発現する、強い陽性相互作用を持ったコントロールpreyベクター

pEXP22/RalGDS-m1

  • 弱い陽性相互作用コントロールの2つ目のコントロールpreyベクター

pEXP22/RalGDS-m2

  • 陰性相互作用を持つコントロールpreyベクター
参考文献
  1. Poon Ellen; Howman Emily V; Newey Sarah E; Davies Kay E; Association of syncoilin and desmin: linking intermediate filament proteins to the dystrophin-associated protein complex.J Biol Chem 2002 Feb 1;277(5):3433-9
  2. Richards MC, Heron SE, Spendlove HE, Scheffer IE, Grinton B, Berkovic SF, Mulley JC, Davy A, Novel mutations in the KCNQ2 gene link epilepsy to a dysfunction of the KCNQ2-calmodulin interaction.J Med Genet 2004 41(3):e35-e35
  3. Ueki N, Hayman MJ, Signal-dependent N-CoR requirement for repression by the Ski oncoprotein.J Biol Chem 2003 278(27)24858-24864
  4. Missero C; Pirro M T; Simeone S; Pischetola M; Di Lauro R; The DNA glycosylase T:G mismatch-specific thymine DNA glycosylase represses thyroid transcription factor-1-activated transcription.J Biol Chem 2001 276(36)33569-75
  5. Lu Q, Hope LW, Brasch M, Reinhard C, Cohen SN, TSG101 interaction with HRS mediates endosomal trafficking and receptor down-regulation.Proc Natl Acad Sci U S A 2003; 100(13):7626-31

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.