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MSMSA は、特定のアンプリコンにおけるメチル化の状態を評価する DNA フラグメント解析のひとつです。

フラグメント解析アッセイのサンプルはその後ダウンストリームの配列解析にも使用できるため、このアプリケーションはスクリーニングに最適です。 このアッセイのプライマーは、Methyl Primer Express® ソフトウェアを使用して CpG を含まない領域で設計します。そのため PCR では、メチル化の状態に左右されない増幅が可能です。

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MSMSA は、特定のアンプリコンにおけるメチル化の状態を評価する DNA フラグメント解析のひとつです。 フラグメント解析アッセイのサンプルはその後ダウンストリームの配列解析にも使用できるため、このアプリケーションはスクリーニングに最適です。 このアッセイのプライマーは、Methyl Primer Express® ソフトウェアを使用して CpG を含まない領域で設計します。そのため PCR では、メチル化の状態に左右されない増幅が可能です。

メチル化感受性移動度シフト アッセイの手順

DNA 精製キット

DNA の抽出は、DNA シーケンシングとフラグメント解析の実験ワークフローにおける重要な第一ステップです。 DNA の配列解析における全体的な読み取りの品質と精度、長さは、サンプル自体の特性と核酸抽出法に大きく左右される可能性があります。 最適な抽出法は、サンプル源や組織の種類、サンプルの入手方法、抽出前の取り扱いもしくは保存方法によって異なります。

推奨製品: DNA単離法

PCR キット

methylSEQr™ Bisulfite Conversion Kits は、DNA サンプルに含まれる非メチル化シトシン(C)をウラシル(U)に変換します。 メチル化されたシトシンは変換されません。 バイサルファイト処理した DNA の配列を未処理の DNA と比較することでシトシンの変換を検出し(T 塩基として検出されます)、サンプルに含まれるどの CpG ジヌクレオチドのシトシンがメチル化されているかを特定します。

推奨製品: バイサルファイト処理の実行

お客様に最適なキットとは?

PCR キット

メチル化マッピングのための高品質 PCR プライマーを設計します。 お客様はプライマー設計ソフトウェアに対象領域をカット&ペーストするだけです。 このツールが CpG アイランドを検索し、in silico で DNA のバイサルファイト処理をシミュレーションします。 PCR を実行し、目的の領域を増幅します。

推奨製品: PCR の実行

フラグメント解析のサイジング グラフ画像

PCR 産物のサンプルをサイズ スタンダードと Hi-Di Formamide の混合液に加え、熱変性して電気泳動します。

推奨製品: 解析サンプルの調製

サイズ情報

サイジング実験に使用する GeneScan サイズ スタンダードの詳細については、次の表をご覧ください。

t
DNA フラグメントの標識サイズ スタンダードを標識する蛍光色素推奨サイズ スタンダード使用可能なアプリケーションその他のキットと製品
dR110、dR6G、dTAMRA™、dROX(Dye Set DS-02 - Filter E5)LIZ®
SNaPshot®
マイクロサテライト、LOH、キメリズム、ISSR、RFLP、T-RFLP、MSMSA
5-FAM™、HEX™、NED™(Dye Set DS-30 - Filter D)ROX™GeneScan™ 500 ROX™ Size Standardカスタム フラグメント解析カスタム プライマー
6-FAM™、VIC®、NED™(Dye Set DS-31 - Filter D**)ROX™GeneScan™ 500 ROX™ Size Standard

カスタム フラグメント解析

カスタム プライマー
5-FAM™、JOE、NED™(Dye Set DS-32 - Filter F)ROX™GeneScan™ 500 ROX™ Size Standard
マイクロサテライト(法医学)
AFLP
6-FAM™、VIC®、NED™、PET®(Dye Set DS-33 - Filter G5)LIZ®GeneScan™ 600 LIZ Size Standard v2.0
マイクロサテライト(法医学)
病原菌検出
カスタム フラグメント解析
キャピラリ電気泳動

キャピラリ電気泳動の際、PCR 産物はポリマーを充填したキャピラリに電気的にインジェクションされます。 蛍光標識した DNA フラグメントに高い電圧をかけてサイズ別に分離し、レーザーとカメラのシステムで検出します。

お客様に最適な電気泳動装置(ジェネティック アナライザ)とは?

  機器
 3730xl
3730xL
3730
3730
3500xl
3500xL
3500
3500
3130xl
3130xL
3130
3130
310
310
キャピラリ本数96482481641
互換性のあるアプリケーション:
(S) サポート済み、(A) AB が証明済み、(C) お客様が証明済み、(N) サポートなし
メチル化SSSSSSC

MSMSA プロファイルを解析します。

お客様に最適なデータ解析ソフトウェアとは?

DNA 精製キット

DNA の抽出は、DNA シーケンシングとフラグメント解析の実験ワークフローにおける重要な第一ステップです。 DNA の配列解析における全体的な読み取りの品質と精度、長さは、サンプル自体の特性と核酸抽出法に大きく左右される可能性があります。 最適な抽出法は、サンプル源や組織の種類、サンプルの入手方法、抽出前の取り扱いもしくは保存方法によって異なります。

推奨製品: DNA単離法

PCR キット

methylSEQr™ Bisulfite Conversion Kits は、DNA サンプルに含まれる非メチル化シトシン(C)をウラシル(U)に変換します。 メチル化されたシトシンは変換されません。 バイサルファイト処理した DNA の配列を未処理の DNA と比較することでシトシンの変換を検出し(T 塩基として検出されます)、サンプルに含まれるどの CpG ジヌクレオチドのシトシンがメチル化されているかを特定します。

推奨製品: バイサルファイト処理の実行

お客様に最適なキットとは?

PCR キット

メチル化マッピングのための高品質 PCR プライマーを設計します。 お客様はプライマー設計ソフトウェアに対象領域をカット&ペーストするだけです。 このツールが CpG アイランドを検索し、in silico で DNA のバイサルファイト処理をシミュレーションします。 PCR を実行し、目的の領域を増幅します。

推奨製品: PCR の実行

フラグメント解析のサイジング グラフ画像

PCR 産物のサンプルをサイズ スタンダードと Hi-Di Formamide の混合液に加え、熱変性して電気泳動します。

推奨製品: 解析サンプルの調製

サイズ情報

サイジング実験に使用する GeneScan サイズ スタンダードの詳細については、次の表をご覧ください。

t
DNA フラグメントの標識サイズ スタンダードを標識する蛍光色素推奨サイズ スタンダード使用可能なアプリケーションその他のキットと製品
dR110、dR6G、dTAMRA™、dROX(Dye Set DS-02 - Filter E5)LIZ®
SNaPshot®
マイクロサテライト、LOH、キメリズム、ISSR、RFLP、T-RFLP、MSMSA
5-FAM™、HEX™、NED™(Dye Set DS-30 - Filter D)ROX™GeneScan™ 500 ROX™ Size Standardカスタム フラグメント解析カスタム プライマー
6-FAM™、VIC®、NED™(Dye Set DS-31 - Filter D**)ROX™GeneScan™ 500 ROX™ Size Standard

カスタム フラグメント解析

カスタム プライマー
5-FAM™、JOE、NED™(Dye Set DS-32 - Filter F)ROX™GeneScan™ 500 ROX™ Size Standard
マイクロサテライト(法医学)
AFLP
6-FAM™、VIC®、NED™、PET®(Dye Set DS-33 - Filter G5)LIZ®GeneScan™ 600 LIZ Size Standard v2.0
マイクロサテライト(法医学)
病原菌検出
カスタム フラグメント解析
キャピラリ電気泳動

キャピラリ電気泳動の際、PCR 産物はポリマーを充填したキャピラリに電気的にインジェクションされます。 蛍光標識した DNA フラグメントに高い電圧をかけてサイズ別に分離し、レーザーとカメラのシステムで検出します。

お客様に最適な電気泳動装置(ジェネティック アナライザ)とは?

  機器
 3730xl
3730xL
3730
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3500xl
3500xL
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3500
3130xl
3130xL
3130
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310
310
キャピラリ本数96482481641
互換性のあるアプリケーション:
(S) サポート済み、(A) AB が証明済み、(C) お客様が証明済み、(N) サポートなし
メチル化SSSSSSC

MSMSA プロファイルを解析します。

お客様に最適なデータ解析ソフトウェアとは?

メチル化感受性移動度シフト アッセイ用推奨製品

Verti サーマル サイクラ

3500 シリーズ ジェネティック アナライザ

GeneMapper® ソフトウェア

情報:

北米開催のトレーニング コース

欧州開催のトレーニング コース

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