弊社は、トランスクリプトーム解析のための二つの優れたオプションを提供します:
- 探索研究および 遺伝子発現 解析のための、全トランスクリプトームシーケンス、または RNA-Seq。融合遺伝子やスプライシングバリアントを含めた、既知および新規転写物の同定と定量のために、Ion GeneStudio S5 システムと Invitrogen RNA 精製キットおよび Ion Torrent ライブラリ作成キットを組み合わせてご使用ください。
- 遺伝子レベル発現解析のための Ion AmpliSeq Transcriptome ソリューション。従来の遺伝子発現解析に理想的な、Ion AmpliSeq Transcriptome Human Gene Expression キットは、高速かつ FFPE 適合のワークフローによって、わずか 10 ng の RNA インプット量から、20,000 を超える RefSeq 転写産物をターゲットにできます。
Ion AmpliSeq トランスクリプトームソリューションに関する詳細はこちら ›
Ion AmpliSeq Transcriptome Human Gene Expression キットのアプリケーションノートをダウンロードする ›
マイクロアレイ技術を超える RNA-Seq 手法の利点
- 向上した特異性と感度—融合転写産物や、その関連アイソフォームを含めたより多くの RNA 種を検出します
- 幅広いダイナミックレンジ—優れた読み取り深度により、典型的なマイクロアレイプラットフォームのようにシグナルを圧縮することなく、NGS アプローチによって生物学的に信頼性のある発現変化を検出します
- デジタル出力—NGS のリードカウントは遺伝子発現の絶対量を反映し存在量の少ない転写物の同定および特性解析を可能にします
- 既知および未知の転写物とバリアントを検出—NGS シーケンスカバレッジの非バイアス性は、ゲノムに関する事前の知識を必要としない、真にトランスクリプトームワイドなバイオマーカー探索を可能にします。
全トランスクリプトームシーケンスワークフローの概要
弊社は、遺伝子発現解析のための完全な RNA シーケンスソリューションを提供します。サンプル調製から解析までをサポートし、RNA シーケンスにおいてより多くの発見を可能にします。お客様の発見に対して、弊社の qPCR システムとその関連試薬による検証もサポートします。
弊社の全トランスクリプトーム RNA シーケンスワークフローは、お客様に以下を提供します。
- 迅速な結果
- ベンチトップシーケンサーによる、もっとも低いランニングコスト
- フレキシブルなスループット
- 合理化されたデータ解析
1RNA の濃縮
Invitrogen RiboMinus Eukaryote キット v2 は、90%を超える rRNA を除去し、システムのシーケンスパワーを向上させます
詳細はこちらから ›
2ライブラリの
構築
Ion Total RNA-Seq キット v2 は、わずか 100 ng のトータル RNA インプット量で可能な、高速かつシンプルなワークフローを提供し、ストランドの方向性を維持すると共に、バイアスやエラーを最小限に抑えます。
詳細はこちらから ›
3テンプレート
調製
簡単なテンプレート調製およびチップローディングが可能な、Ion Chef システムをご利用ください。初心者から熟練者まで、すべてのユーザーに適しています。
詳細はこちらから ›
4シーケンス
ラン
Ion GeneStudio S5 システムは、トランスクリプトームのための幅広い遺伝子パネルのシーケンスに理想的です。シーケンスのラン時間は 2.5 時間で、セットアップタイムはわずか 15 分です。
詳細はこちらから ›
5データ解析およびバリデーション
Torrent Suite ソフトウェアは、Partek Flow ソフトウェアパッケージなどのサードパーティーソフトウェアにアップロードできる、エクスポート可能な FASTQ または BAM フォーマットでシーケンスリードを提供します。
詳細はこちらから ›
遺伝子の転写は、短い RNA 、ポリアデニル化 RNA、または非アデニル化転写物などを含むさまざまな RNA 種に関わる、複雑でダイナミックなプロセスです。
トランスクリプトームシーケンスの成功において重要なのは、ライブラリを作成するために必要な質と量の RNA を得るための濃縮工程です。お客様の研究に合った濃縮方法の選択肢は、使用するアプリケーションと、利用できる RNA 量に依存します。
ストランド特異性
RNA はゲノム DNA から、ストランド特異的に転写されます。ストランド情報の保持は、調節や、センスおよびアンチセンス転写産物の役割、そして 複雑なパターンで転写が重複して起こる領域を解明するのに役立ちます。
独自の Invitrogen RNA ライブラリ構築技術は、ライブラリ内でストランド情報を保持するようにアダプターを結合するため、方向性を維持したまたままマップすることが可能。
Ion Total RNA-Seq キット v2 は、わずか 100 ng のトータル RNA インプット量で可能な、高速かつシンプルなワークフローを提供し、ストランドの方向性を維持すると共に、バイアスやエラーを最小限に抑えます。RiboMinus Eukaryote キット v2 は、90%を超える rRNA を除去し、システムのシーケンスパワーを向上させます。Invitrogen ERCC RNA Spike-In ミックスは、非標識のポリアデニル化転写物で構成され、ダイナミックレンジ、検出下限、fold-changeレスポンスを測定するため、サンプルの精製後、RNA 解析実験に添加するようデザインされています。
Ion Chef システム* は、ハイスループットな自動テンプレート調製とチップローディングを、経験によらずすべてのユーザーに提供します。低スループットのユーザーには、現在、完全自動テンプレート調製の可能な Ion OneTouch 2 システムがご利用いただけます。
転写産物のシーケンスにより、特定の時間における細胞内の RNA の存在を見ることができます。RNA-Seq は、転写産物のより優れたカバレッジを提供することで、マイクロアレイで見ることができる以上のことを可能にします。システムは、お客様のラボで、そしてお客様のご予算内で、トランスクリプトームのシーケンスに必要なカバレッジを提供します。
Ion Proton システム
- スケーラブル—お客様の実験スケールに合わせて選択可能なフレキシブルな半導体チップデザインにより、シーケンスを待つ必要がありません。
- 高速—RNA サンプルからデータ解析までが 24 時間未満で完了します
- 正確—発現変動の検出において、感度とダイナミックレンジでマイクロアレイを凌駕します。qPCR データとの高い相関も見られます
- 手頃な価格—Ion Proton システムは、RNA-Seq のためのコスト効率に優れたシステムです。
必要なトランスクリプトームシーケンスカバレッジ
特定のトランスクリプトーム実験に必要なカバレッジの深度は、その研究の目的によってさまざまです。たとえば、miRNA 種の発現レベルだけを見ることが研究の目的である場合は、より短いリード長と、適度なシーケンス深度で良いかもしれません。レアな転写物の検出が目的であれば、より多くのリードが必要でしょう。
実験デザイン | 必要なカバレッジ | サンプル数
|
ヒト全トランスクリプトーム解析 | 3 ~ 4 千万リード | 1 ~ 4 サンプル |
ポリ(A) | 1.5 ~ 2.5 千万リード | 2 ~ 8 サンプル |
Small RNA および miRNA シーケンス | 発現解析には 1 ~ 2 百万リード 探索には 2 ~ 5 百万リード | 最大 16 のバーコード化サンプル |
チップベースのシステムは、数パネルだけのランや、あるいは全トランスクリプトームシーケンスの結果を見たい場合など、お客様の研究に必要な深度で扱えるよう、フレキシブルにデザインされています。このフレキシビリティは、高速なシーケンスラン時間と直観的なソフトウェアを組み合わせることで、サンプルから結果までを、お客様のご予算とスケジュールで提供できます。
スマートなインフォマティクスの使用
Ion Torrent シーケンス装置によるシンプル性は、プレインストールされた使いやすい Torrent Suite ソフトウェアによってさらに高まります。このデータ解析ソフトウェアは、最適化されたシグナル処理、ベースコーリング、そしてシーケンスアライメントなど、生データから答えを導くためのツールを提供します。
Torrent Suite ソフトウェアは、網羅的な下流の解析を目的とした Partek Flow ソフトウェアパッケージなどのサードパーティーソフトウェアにアップロードできる、エクスポート可能な BAM フォーマットでシーケンスリードを提供します。Torrent Suite ソフトウェアに関する詳細はこちら。
Partek Flow ソフトウェアによって、トランスクリプトームシーケンスデータから生物学的な洞察へ
Ion Torrent データ用に構築された Partek Flow ソフトウェアにおけるトランスクリプトームパイプラインが、データ解析をシンプル化します。Partek Flow ソフトウェアは以下を提供します:
- バイオインフォマティクスワークフローによる合理的な統合
- ポイントアンドクリックによるインターフェース
- インタラクティブなビジュアル化
- リードアライメント
- 転写産物レベルの測定
- マルチサンプルによる遺伝子発現解析
Partek Flow ソフトウェアは、パワフルな統計学、視覚化ツール、直観的なユーザーインターフェース、そして生物学的な思考によって構築されたパイプラインによって、迅速かつ簡便に、シーケンスデータから研究結果の生物学的解釈を提供します。
Partek Flow ソフトウェアに関する詳細はこちら
Partek Flow ソフトウェアの無料トライアルを請求する