StemScale PSC Suspension Medium | Thermo Fisher Scientific

PSC培養の新たな次元

Gibco StemScale ™ PSC Suspension Mediumは、浮遊培養による大量のヒト多能性幹細胞（PSC）の生成を可能にし、PSCスフェロイド培養系の凝集に関する現在の技術的課題に対処するように開発された、スケーラブルで簡便な培地です。

優れた増殖能力—1継代あたり5～10倍の高い増殖能を有し、他の浮遊培地と比較して3倍の増殖が可能です。
簡素化されたワークフロー—培養または継代中にマイクロキャリアやセルストレーナーを使用する必要がなく、簡単に培地を交換できます。
幅広い培養フォーマットに対応—マルチウェルプレート、振とうフラスコ、バイオリアクターなど、さまざまな容器タイプに対応しており、PSC培養のスケールアップが可能です。
PSC株間の一貫性—多能性と細胞生存率を維持しながら、信頼性の高い安定したスフェロイド形成を実現します

注文情報データを見る製品カタログをダウンロードする

PSCスフェロイドからの神経および心筋の分化
Ordering information
リソース—アプリケーションノート、プロトコル、ポスターなど

「StemScaleは堅牢で、使用している細胞株にかかわらず結果を再現できます。」

– C. Miranda、リスボン大学

優れた増殖能力

Gibco StemScale PSC Suspension Mediumは、スフェロイドの自己組織化による浮遊培養中の多能性幹細胞の増殖をサポートし、高品質のPSCを大量に必要とするアプリケーションに最適です。

StemScale培地は、継代あたり5～10倍の増殖と、他の培地の3倍の増殖能を提供します（図1）。

図1.StemScale培地による優れた増殖能力30回の継代と20週間の培養後、StemScale培地は継代ごとに10倍以上の細胞増殖を実現しています（左図）。StemScale培地は、他社培地Mと比較すると、同一期間で最大3倍の増殖が得られています（右図）。

図2.StemScale培地は、細胞の生存率と多能性の維持をサポートStemScale培地は、他の浮遊培養システムと比較して3継代で優れた細胞生存率を示し、30継代後でも高い多能性を維持します。

ページトップへ

より多くの細胞を短時間で生成

StemScale培地を用いてPSCを自己凝集性のスフェロイドとして浮遊培養すると、接着培養と比較して、培地やプラスチック器具の消費量を減らしながら、より多くの細胞をより短時間で培養することができます（表1）。

ここでは、6ウェルプレートの単一ウェルからスタートして、接着培養と浮遊培養で増殖した細胞間の時間と細胞数の違いを示しています。

培養日数	培養容器のフォーマット	平均細胞収量 *	培地の消費量	培養容器のフォーマット	平均細胞収量 *	培地の消費量
	浮遊培養によるスケールアップ			接着培養によるスケールアップ
3 days	6-well plate (single well)	1.5 x 10⁶ cells	6 mL	6-well plate (single well)	1.5 x 10⁶ cells	6 mL
7 days	6-well plate (full plate)	18 x 10⁶ cells	30 mL	100 mm dish	9 x 10⁶ cells	48 mL
11 days	100 mL bioreactor	150 x 10⁶ cells	200 mL	150 mm dish	22 x 10⁶ cells	72 mL
15 days	500 mL bioreactor	750 x 10⁶ cells	1,000 mL	Nunc TripleFlask Treated Cell Culture Flask	78 x 10⁶ cells	800 mL
19 days	3 L bioreactor	4.5 x 10⁹ cells	6,000 mL	2層Nunc Cell Factory System	300 x 10⁶ cells	1,200 mL
23 days	–	–	–	10-layer Nunc Cell Factory System	1.5 x 10⁹ cells	6,000 mL
27 days	–	–	–	30-layer Nunc Cell Factory System	4.5 x 10⁹ cells	18,000 mL
* 値は、培養容器フォーマットごとの4日間の増殖に基づくデータから推定したものです。3 L bioreactorおよび30-layer Thermo Scientific Nunc Cell Factory Systemの値は、表に記載されている小型のバイオリアクターおよびNunc Cell Factory Systemのフォーマットから推定したものです。

表1.浮遊培養システムと接着培養システムのスケールアップStemScale PSC Suspension Mediumを使用した浮遊培養システムでのスケールアップと接着培養システムでのスケールアップの比較

StemScale PSC Suspension Mediumで培養した多能性幹細胞

図3.StemScale培地で培養した多能性幹細胞。StemScale PSC Suspension Mediumに播種した多能性幹細胞は、5日間にわたって最適なスフェロイドサイズと生存率を維持します。

ページトップへ

「 StemScale培地は幹細胞の凝集体形成の効率を向上させます。」

– S. Rieck、 ViaCyte

簡素化されたワークフロー

図4.簡素化されたワークフロー（概略図）。StemScale培地を用いて、接着培養から浮遊培養への移行が容易にできます。StemScale培地は、必要に応じてフィード日をスキップできます。StemScale培地で培養を開始した後、50%培地交換を使用して、毎日または1日おきに定期的に行います。

Chart showing similar fold PSC expansion in StemScale medium with every day and every other day feeding.

Chart shows high percent pluripotency marker expression with flexible feeding in StemScale medium

図5.1日おきにフィードされた培養は、倍数変化（A）および多能性（B）において、毎日フィードされた培養と同様でした。

ページトップへ

ハウツー動画：PSCを浮遊で培養するための3つのステップ

StemScale PSC Suspension Mediumを使用して、ヒト多能性幹細胞を浮遊培養する方法を動画でご紹介します。

Step 1開始
Step 2メンテナンスおよび培地交換
Step 3継代

ステップ1：StemScale培地でのPSCスフェロイド培養の開始

ステップ2：50%量の培地交換によるPSCスフェロイドの維持

ステップ3：浮遊培養におけるPSCスフェロイドの継代

Step 1 : 開始

ステップ1：StemScale培地でのPSCスフェロイド培養の開始

Step 2 : メンテナンスおよび培地交換

ステップ2：50%量の培地交換によるPSCスフェロイドの維持

Step 3 : 継代

ステップ3：浮遊培養におけるPSCスフェロイドの継代

ページトップへ

複数の細胞株および容器フォーマットでの増殖

StemScale培地で培養した4種類の異なるPSC株で、1継代あたり6～11倍、15日間で18～28倍の増殖が達成されました。

図6.浮遊培養システムと接着培養システムの比較StemScale PSC Suspension Mediumを用いた浮遊培養システムでのスケールアップと、接着培養システムでのスケールアップを比較しています。

ページトップへ

PSC スフェロイドから神経および心筋への分化

神経誘導は、StemScale PSC Suspension Mediumで培養された PSC スフェロイドから直接開始されます。

図7.スフェロイドの神経誘導PSC Neural Induction Medium（製品番号A1647801）を使用すると、StemScale培地で培養されたPSCスフェロイドから直接多数の成熟神経幹細胞への分化が開始されます。

StemScale で培養したスフェロイドは、DAニューロン分化ワークフローにも適応できます。

図8.ドーパミン作動性ニューロンは、StemScale培地で培養したPSCスフェロイドから直接分化が開始されます。PSC Dopaminergic Neuron (DA) Differentiation kit（製品番号A3147701）を使用してStemScale培地で分化したDAニューロンは、接着培養における35日間のプロトコルと比較して、浮遊培養で同量のFOXA2/Otx2を共発現しました（データは示していません）。

PSCスフェロイドから分化した心臓オルガノイド

図9.StemScale 培地で培養したPSCスフェロイドから浮遊液中で分化した心筋細胞（A）StemScale培地で培養した未分化のhPSCスフェロイド（心筋誘導前）。（B）心筋誘導開始から12日後の培養中のスフェロイド。（C）心臓マーカーであるAlpha Sarcomeric actinin（緑色）およびCardiac Troponin T（赤色）で染色された心臓オルガノイド。核は、DAPI（青色）で対比染色しました。

ページトップへ