毒性在生物研究中至关重要,在药物开发中发挥着重要作用。毒性研究旨在在药物开发过程的早期排除有毒化合物,因为药物诱发的毒性是药物失效的主要原因。

赛默飞世尔科技拥有各种灵敏且准确的检测试剂盒,帮助探索及了解细胞毒素在生物系统中的效应。还有各种不同规格的可溶性生物标志物,可以更好地满足您的研究需求。

 

毒理学研究和检测概述

毒理学包括生物学、化学、药理学和医学等学科。毒理学涵盖从细胞到生态系统的整个生物系统,是研究化合物对生物机体有害效应的学科。毒素的效应受其 ADME(吸收、分布、代谢和排泄)特性的影响,还伴随着与他分子或细胞组分的相互作用 [1]。

有毒物质在体内的相互作用分为四步。首先,毒素必须进入到血液中。毒素可以通过胃肠道、皮肤接触或肺部吸入而被吸收。有毒物质被吸收后通过淋巴和/或血液进入循环系统,分布到各个器官和组织。

然后,循环中的毒素发生代谢或生物转化,其中化合物化学转化为代谢物,这些代谢物可能会在体内引起或强或弱的毒理学效应。最后,毒素和/或其代谢物排出体内。如果能够快速清除体内的毒素,就会减少毒素在靶点积聚以及造成伤害的几率。最常见的排泄方法是肾脏系统或消化道排泄 [2]。


通用的检测方法

毒理学检测大致可以分为多个类别。在研究环境中,对合成和天然产物/化合物进行检测,以评估其潜在毒理学效应。在药品、农药、化妆品、添加剂等受管制物质的开发和生产过程中,所有化合物在公开使用前必须对最终产品进行毒性检测。

测试方法将揭示有关化合物的物种、器官和剂量特异性影响。最常见的检测方法是意外暴露研究,使用细胞株的体外研究以及涉及动物模型的体内研究 [3]。在检测结束时,确定了化合物的 LD50,该值已知对 50% 的受试人群是致死剂量。


ELISA 和微球检测

在检测时要了解化合物的作用机理及其在体内引起的潜在细胞毒性效应。免疫毒性可以在体外使用 ELISA 或 ProcartaPlex 多重免疫检测进行测定。这些检测法可用于检测体内的各种生物标志物,以确定毒素对生物标志物的影响。因此,表 1 重点介绍了使用这些方法进行毒理学研究和检测获得并公布的若干典型数据。

微球检测法的优势在于多重检测,即能够一次检测不同的生物标志物。这种方法经济高效且节省时间,只需要少量的样品(适用于样品受限/有限的情况)。由于不同物种的生物标志物数量众多,研究人员可以全面了解不同的毒理学效应。

表 1.关于毒理学研究用免疫学检测的出版物清单。

参考文献总结生物标志物靶标/使用的 Panel检测方法
Effects of active and passive smoking on salivary cytokines levels in rats: A pilot studyStudy of the effects of smoking on salivary cytokine levels in rats.IL-6、IL-12p70、IFN-γProcartaplex
The mycotoxin alternariol suppresses lipopolysaccharide-induced inflammation in THP-1 derived macrophages targeting the NF-κB signalling pathwayStudy of the immunosuppressive effects of CD molecules & proinflammatory cytokines of the mycotoxin alternariol (metabolite of black mold) in human cells.NF-kB、IL-8、IL-6、TNF-α、IL-10Procartaplex
A New Immortalized Human Alveolar Epithelial Cell Model to Study Lung Injury and Toxicity on a Breathing Lung-On-Chip SystemIn vitro evaluation of inhalation toxicity in a distal alveolar region model using human cell line.IL-8ELISA
Pulmonary inflammatory response from co-exposure to LPS and glyphosateAssessment of the effects of agricultural respiratory toxins, glyphosate and endotoxin in mice and their resulting lung inflammatory responses.TNF-α、keratinocyte chemoattractant (KC)、MCP-1、MIP-2、IL-1β、IL-10、IL-13、IL-33、IL-4、IL-5、IL-6ProcartaPlex
Formaldehyde exposure induces differentiation of regulatory T cells via the NFAT‑mediated T cell receptor signalling pathway in Yucatan minipigsInvestigation of formaldehyde exposure and resulting toxicological effects on minipigs.IL-4、IFN-γ、TNF-αProcartaPlex
Topical application of the quaternary ammonium compound Didecyldimethylammonium chloride activates type 2 innate lymphoid cells and initiates a mixed-type allergic responseStudy of the hypersensitivity immune responses in murine models upon dermal exposure of an industrial/commercial compound in murine models.Th1/Th2/Th9/Th17/Th22/Treg Cytokine 17-Plex Mouse ProcartaPlex PanelProcartaPlex
Effects of different surface modifying agents on the cytotoxic and antimicrobial properties of ZnO nanoparticlesEvaluation of cytotoxic properties of surface-modified ZnO nanoparticles by investigating inflammatory cytokine production in human cells.Inflammation 20-Plex Human ProcartaPlex PanelProcartaPlex
Evaluation of IL-1 blockade as an adjunct to linezolid therapy for tuberculosis in mice and macaquesAssessment of reduced hematopoietic toxicity in a non-human primate model by addition of alpha-IL-IR1 to linezolid regimen.Cytokine & Chemokine 30-Plex NHP ProcartaPlex PanelProcartaPlex
Combined toxicity of air pollutants related to e-waste on inflammatory cytokines linked with neurotransmitters and pediatric behavioral problemsStudy of the toxicological effects of e-waste inhalation in humans.IL-1β、IL-6、TNF-αProcartaPlex

用于毒理学研究的 ELISA 试剂盒

ELISA 试剂盒可用于检测和测定各种可能在毒理学环境中激活的生物标志物。这些试剂盒可用于多种生物来源,使研究人员能够研究毒素对不同物种体内不同通路的可能影响。

适用于流行靶标的 Invitrogen ELISA 试剂盒,如 IL-6 , IFN γ , VEGF 等,见 表 2。VEGF 人 ELISA KI 与其他市售替代品 的比较如图 1 所示。

查找 ELISA 试剂盒

了解更多有关 ELISA 试剂盒和组分的信息

常见毒理学研究蛋白靶标和 ELISA 试剂盒性能数据

表 2.查看用于检测以下常见靶标的赛默飞 ELISA 试剂盒:

plot of Invitrogen VEGF Human ELISA Kit and competitor ELISA

图 1.使用 Invitrogen 人 VEGF ELISA 试剂盒和竞品 ELISA 试剂盒获得的代表性数据。Human serum samples were tested using VEGF Human ELISA Kit and compared to a competitor ELISA.数据相关性达到 R2=0.9677.

用于毒理学研究的 ProQuantum 高灵敏度免疫检测试剂盒

ProQuantum 免疫检测试剂盒是高灵敏度、高性能试剂盒,用于检测低表达的靶蛋白,无需专用仪器。这些检测试剂盒利用基于邻位的扩增技术,并将分析物特异性高亲和力抗体-抗原结合与类似于 qPCR 的信号检测和扩增功能相结合,以实现简单而强大的下一代蛋白质定量。

用于 IL-6 , IL-18 , TNF α 等常用靶标的 Invitrogen ProQuantum 免疫检测试剂盒见 表 3。使用 IL-6  ProQuantum 免疫检测试剂盒 KI 标准曲线 图 2 所示。

查找所有 ProQuantum 检测试剂盒

进一步了解 ProQuantum 免疫检测试剂盒的工作原理

阅读 BioProbes Journal 文章:ProQuantum 高灵敏度免疫检测试剂盒——新一代靶标特异性蛋白质定量产品

常见毒理学研究蛋白靶标和 ProQuantum 检测试剂盒性能数据

表 3.毒理学相关 ProQuantum 免疫检测试剂盒。查看用于检测以下常见靶标的赛默飞 ELISA 试剂盒:

Dot-plot of increasing IL-6 concentrations

图 2.人 IL-6 的代表性标准曲线。使用 Invitrogen 人 IL-6 ProQuantum 免疫检测试剂盒获得的 IL-6 标准曲线显示 IL-6 蛋白质动态范围较宽 (0.0064–5,000 pg/mL)。

用于毒理学研究的 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

ProcartaPlex Panel 可用于同时检测和测定与毒素管理有关的可溶性生物标志物。从我们针对肝毒性和肾毒性研究专门设计和优化的预配置 检测板中选择 (表 4) 或使用检测板配置器定制适合您与毒理学研究和检测相关的研究需求的检测板。

用于肝脏和肾脏毒性的 ProcartaPlex 检测能够在单个孔中同时定量多达 11 个毒性靶标(包括 FDA 推荐的生物标志物)[4]。除其他外, ADME/Tox 研究的,与 CYP 靶标高度相关的是 ProcartaPlex 的一部分。这些检测试剂 盒可与其他检测类型 (如酶活性检测试剂盒或 QuantiGene Plex mRNA) 配合使用,以获得对候选药物的更全面信息 (图 3)。器官特异性毒性试验,特别是针对肾脏的毒性试验,具有很高的兴趣,因为它是一个中心解毒器官,暴露于药物,活性代谢物和环境化学品中。临床前安全评估期间,通常会评估肾毒性。肾毒性检测是针对较常见的样本类型进行的,如尿液,血清 / 血浆和细胞培养上清液。

ProcartaPlex 肝脏毒性检测组合

ProcartaPlex 肾毒性检测组合

ProcartaPlex 肝脏毒性检测可作为预配置检测板提供,并针对细胞裂解物进行了优化。例如, ProcartaPlex 肝毒性试验和匹配的 QuantiGene Plex mRNA 试验可用于测定常用 CYP3A4 诱导剂, viz. 利福平,苯巴比妥, 3- 甲基胆蒽和利托纳维尔的影响,以评价 mRNA 诱导的 CYP3A4 以及原代人肝细胞中的蛋白表达 (图 3)。  对酶活性进行检查,以补充该数据集。ProcartaPlex 肾毒性检测提供多种规格,包括预混 Panel ,单重检测试剂盒和定制混合混合 & 匹配检测板。 预配置的 ProcartaPlex 肾毒性检测组合可在一个孔中同时定量多达 11 种关键尿蛋白。例如,使用 Procartaplex 肾毒性检测组合 ( 图 4) 和 (  图 5) 检测了来自肾脏疾病患者 (AKI , RKF 和 CKDu) 和健康供体 (对照) 的尿液样本。与健康供体相比,肾脏疾病个体尿液样本中的肾蛋白标记物显著增加。

 

ProcartaPlex Panel 选择工具

进一步了解 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

毒理学相关预混多重免疫检测 Panel 的数据

Graph showing enzyme activity, mRNA and protein expression of CYP3A4 after Rifampicin, Phenobarbital, 3-Methylcholanthrene and Ritonavir submission

图3.利福平,苯巴比妥, 3- 甲基胆蒽和利托纳维尔对 CYP3A4 诱导的影响。µm 瓶原代人肝细胞 (0.5-0.7x 10 5 / 孔) 在 96 孔板中培养,并使用利福 µm 平 (30 μ L) ,苯巴比妥 (2000 μ L) , 3- 甲基胆蒽 µm (2 μ L) 或利托纳维尔 (10 µm μ L) 处理 48 小时。使用 ProcartaPlex 人肝毒性检测组合 1 (66x 和 匹配的 QuantiGene Plex mRNA 检测,) 通过细胞上清液中的蛋白表达,酶活性和 mRNA 分析 (A) 对裂解的原代人肝细胞中的 CYP3A4 诱导进行了评估 (C)。数据表示为载体对照 (0.1% DMSO) 的倍数变化和归一化 mRNA/GAPDH 比率和蛋白质/GAPDH 比率。载体对照上的 2 倍感应阈值通过虚线表示。

 

图4.急性肾损伤 (AKI) 和肾功能衰竭 (RKF) 个体样本中的尿液蛋白标志物。ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 1 , 11le xand ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 2 , 9le x人 用其检测单个患者的关键尿蛋白标志物。数据显示,与对照组(健康供体)相比,10 名急性肾损伤 (AKI) 和 13 名肾功能衰竭 (RKF) 个体的尿液样本中的标志物显著增加。

 

图 5.病因不明 (CKDu) 个体的慢性肾病中的尿蛋白标志物。来自 40 人的尿液样品使用 ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 1 , 11ple xand ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 2 , 9plex 进行检测。数据显示,与对照组(健康供体)相比,CKDu 个体的 10 种蛋白质标志物显著增加。


表4.用于毒理学相关研究的预混 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

产品名称规格货号

ProcartaPlex 人肝脏毒性检测组合 1 , 6plex

靶标CYP1A2 , CYP3A4 , CYP2B6 , CYP2C9 , β -2- 微球蛋白 (B2M) , GAPDH

96 次EPX060-15857-901

ProcartaPlex 人肝毒性检测组合 2 , 5plex

靶标CYP2D6 , CYP2C19 , CP2E1 , β -2- 微球蛋白 (B2M) , GAPDH

96 次EPX050-15858-901

ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 1 , 11plex

靶标列表 [微球编码]: KIM-1/HAVCR/TIM-1 (Kidney injury molecule 1), Renin, Calbindin, Osteoactivin/GPNMB (Transmembrane Glycoprotein NMB), GSTA1 (Glutathione S-transferase A1), IL-18, IP-10 (CXCL10), MCP-1 (CCL2), VEGF-A, Clusterin (APO-J), RBP4 (Retinol-binding protein 4)

96 次EPX110-15855-901

ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 2 , 9plex

靶标列表 [微球编码]: Uromodulin, Alpha-1-microglobulin, TFF3 (Trefoil factor 3), Osteopontin (OPN), Cystatin C, NGAL, Beta-2-microglobulin (B2M), TIMP-1, EGF

96 次EPX090-15856-901

ProcartaPlex 大鼠肾毒性检测组合 1 , 5plex

靶标列表 [微球编码]:  Calbindin, KIM-1, Osteopontin (OPN), TFF3, VEGF-A

96 次EPX050-30124-901

ProcartaPlex 大鼠肾毒性检测组合 2,5plex

靶标列表 [微球编码]:  Albumin, Cystatin, Clusterin (Apo-J), NGAL, TIMP-1

96 次EPX050-30125-901


多重基因表达和蛋白质检测

QuantiGene RNA 基因表达分析为多重基因表达定量提供了快速、高通量的解决方案,可同时测量 96 孔板或 384 孔板的单个孔中多达 80 个目的基因。QuantiGene Plex 分析基于杂交,并结合了分支 DNA (bDNA) 技术,该技术使用信号扩增而不是靶标扩增来直接测量 RNA 转录物。该检测在 Luminex® 平台上运行,工作流程简单,不需要 RNA 纯化。有了这些功能,用户就可以使用相同的样本,将用于基因表达谱分析的 QuantiGene 工作流程与用于蛋白质定量的 ProcartaPlex 工作流程合并(图 6)。为了研究相关 ADME (吸收,分布,代谢和排泄) 及毒理学生物标志物的基因表达, QuantiGene Plex 人类 ADME毒 理学检测组合 (80-出租车) 可用于分析与药物代谢相关的 80 个基因靶标,包括酶,转运体和 CYP。

了解有关 基因表达抑制 和 ADME/DMPK / 毒理学检测的 QuantiGene RNA 检测的更多信息

图 6.QuantiGene 基因表达和 ProcartaPlex 蛋白质定量检测的组合工作流程。

毒理学研究和检测概述

毒理学包括生物学、化学、药理学和医学等学科。毒理学涵盖从细胞到生态系统的整个生物系统,是研究化合物对生物机体有害效应的学科。毒素的效应受其 ADME(吸收、分布、代谢和排泄)特性的影响,还伴随着与他分子或细胞组分的相互作用 [1]。

有毒物质在体内的相互作用分为四步。首先,毒素必须进入到血液中。毒素可以通过胃肠道、皮肤接触或肺部吸入而被吸收。有毒物质被吸收后通过淋巴和/或血液进入循环系统,分布到各个器官和组织。

然后,循环中的毒素发生代谢或生物转化,其中化合物化学转化为代谢物,这些代谢物可能会在体内引起或强或弱的毒理学效应。最后,毒素和/或其代谢物排出体内。如果能够快速清除体内的毒素,就会减少毒素在靶点积聚以及造成伤害的几率。最常见的排泄方法是肾脏系统或消化道排泄 [2]。


通用的检测方法

毒理学检测大致可以分为多个类别。在研究环境中,对合成和天然产物/化合物进行检测,以评估其潜在毒理学效应。在药品、农药、化妆品、添加剂等受管制物质的开发和生产过程中,所有化合物在公开使用前必须对最终产品进行毒性检测。

测试方法将揭示有关化合物的物种、器官和剂量特异性影响。最常见的检测方法是意外暴露研究,使用细胞株的体外研究以及涉及动物模型的体内研究 [3]。在检测结束时,确定了化合物的 LD50,该值已知对 50% 的受试人群是致死剂量。


ELISA 和微球检测

在检测时要了解化合物的作用机理及其在体内引起的潜在细胞毒性效应。免疫毒性可以在体外使用 ELISA 或 ProcartaPlex 多重免疫检测进行测定。这些检测法可用于检测体内的各种生物标志物,以确定毒素对生物标志物的影响。因此,表 1 重点介绍了使用这些方法进行毒理学研究和检测获得并公布的若干典型数据。

微球检测法的优势在于多重检测,即能够一次检测不同的生物标志物。这种方法经济高效且节省时间,只需要少量的样品(适用于样品受限/有限的情况)。由于不同物种的生物标志物数量众多,研究人员可以全面了解不同的毒理学效应。

表 1.关于毒理学研究用免疫学检测的出版物清单。

参考文献总结生物标志物靶标/使用的 Panel检测方法
Effects of active and passive smoking on salivary cytokines levels in rats: A pilot studyStudy of the effects of smoking on salivary cytokine levels in rats.IL-6、IL-12p70、IFN-γProcartaplex
The mycotoxin alternariol suppresses lipopolysaccharide-induced inflammation in THP-1 derived macrophages targeting the NF-κB signalling pathwayStudy of the immunosuppressive effects of CD molecules & proinflammatory cytokines of the mycotoxin alternariol (metabolite of black mold) in human cells.NF-kB、IL-8、IL-6、TNF-α、IL-10Procartaplex
A New Immortalized Human Alveolar Epithelial Cell Model to Study Lung Injury and Toxicity on a Breathing Lung-On-Chip SystemIn vitro evaluation of inhalation toxicity in a distal alveolar region model using human cell line.IL-8ELISA
Pulmonary inflammatory response from co-exposure to LPS and glyphosateAssessment of the effects of agricultural respiratory toxins, glyphosate and endotoxin in mice and their resulting lung inflammatory responses.TNF-α、keratinocyte chemoattractant (KC)、MCP-1、MIP-2、IL-1β、IL-10、IL-13、IL-33、IL-4、IL-5、IL-6ProcartaPlex
Formaldehyde exposure induces differentiation of regulatory T cells via the NFAT‑mediated T cell receptor signalling pathway in Yucatan minipigsInvestigation of formaldehyde exposure and resulting toxicological effects on minipigs.IL-4、IFN-γ、TNF-αProcartaPlex
Topical application of the quaternary ammonium compound Didecyldimethylammonium chloride activates type 2 innate lymphoid cells and initiates a mixed-type allergic responseStudy of the hypersensitivity immune responses in murine models upon dermal exposure of an industrial/commercial compound in murine models.Th1/Th2/Th9/Th17/Th22/Treg Cytokine 17-Plex Mouse ProcartaPlex PanelProcartaPlex
Effects of different surface modifying agents on the cytotoxic and antimicrobial properties of ZnO nanoparticlesEvaluation of cytotoxic properties of surface-modified ZnO nanoparticles by investigating inflammatory cytokine production in human cells.Inflammation 20-Plex Human ProcartaPlex PanelProcartaPlex
Evaluation of IL-1 blockade as an adjunct to linezolid therapy for tuberculosis in mice and macaquesAssessment of reduced hematopoietic toxicity in a non-human primate model by addition of alpha-IL-IR1 to linezolid regimen.Cytokine & Chemokine 30-Plex NHP ProcartaPlex PanelProcartaPlex
Combined toxicity of air pollutants related to e-waste on inflammatory cytokines linked with neurotransmitters and pediatric behavioral problemsStudy of the toxicological effects of e-waste inhalation in humans.IL-1β、IL-6、TNF-αProcartaPlex

用于毒理学研究的 ELISA 试剂盒

ELISA 试剂盒可用于检测和测定各种可能在毒理学环境中激活的生物标志物。这些试剂盒可用于多种生物来源,使研究人员能够研究毒素对不同物种体内不同通路的可能影响。

适用于流行靶标的 Invitrogen ELISA 试剂盒,如 IL-6 , IFN γ , VEGF 等,见 表 2。VEGF 人 ELISA KI 与其他市售替代品 的比较如图 1 所示。

查找 ELISA 试剂盒

了解更多有关 ELISA 试剂盒和组分的信息

常见毒理学研究蛋白靶标和 ELISA 试剂盒性能数据

表 2.查看用于检测以下常见靶标的赛默飞 ELISA 试剂盒:

plot of Invitrogen VEGF Human ELISA Kit and competitor ELISA

图 1.使用 Invitrogen 人 VEGF ELISA 试剂盒和竞品 ELISA 试剂盒获得的代表性数据。Human serum samples were tested using VEGF Human ELISA Kit and compared to a competitor ELISA.数据相关性达到 R2=0.9677.

用于毒理学研究的 ProQuantum 高灵敏度免疫检测试剂盒

ProQuantum 免疫检测试剂盒是高灵敏度、高性能试剂盒,用于检测低表达的靶蛋白,无需专用仪器。这些检测试剂盒利用基于邻位的扩增技术,并将分析物特异性高亲和力抗体-抗原结合与类似于 qPCR 的信号检测和扩增功能相结合,以实现简单而强大的下一代蛋白质定量。

用于 IL-6 , IL-18 , TNF α 等常用靶标的 Invitrogen ProQuantum 免疫检测试剂盒见 表 3。使用 IL-6  ProQuantum 免疫检测试剂盒 KI 标准曲线 图 2 所示。

查找所有 ProQuantum 检测试剂盒

进一步了解 ProQuantum 免疫检测试剂盒的工作原理

阅读 BioProbes Journal 文章:ProQuantum 高灵敏度免疫检测试剂盒——新一代靶标特异性蛋白质定量产品

常见毒理学研究蛋白靶标和 ProQuantum 检测试剂盒性能数据

表 3.毒理学相关 ProQuantum 免疫检测试剂盒。查看用于检测以下常见靶标的赛默飞 ELISA 试剂盒:

Dot-plot of increasing IL-6 concentrations

图 2.人 IL-6 的代表性标准曲线。使用 Invitrogen 人 IL-6 ProQuantum 免疫检测试剂盒获得的 IL-6 标准曲线显示 IL-6 蛋白质动态范围较宽 (0.0064–5,000 pg/mL)。

用于毒理学研究的 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

ProcartaPlex Panel 可用于同时检测和测定与毒素管理有关的可溶性生物标志物。从我们针对肝毒性和肾毒性研究专门设计和优化的预配置 检测板中选择 (表 4) 或使用检测板配置器定制适合您与毒理学研究和检测相关的研究需求的检测板。

用于肝脏和肾脏毒性的 ProcartaPlex 检测能够在单个孔中同时定量多达 11 个毒性靶标(包括 FDA 推荐的生物标志物)[4]。除其他外, ADME/Tox 研究的,与 CYP 靶标高度相关的是 ProcartaPlex 的一部分。这些检测试剂 盒可与其他检测类型 (如酶活性检测试剂盒或 QuantiGene Plex mRNA) 配合使用,以获得对候选药物的更全面信息 (图 3)。器官特异性毒性试验,特别是针对肾脏的毒性试验,具有很高的兴趣,因为它是一个中心解毒器官,暴露于药物,活性代谢物和环境化学品中。临床前安全评估期间,通常会评估肾毒性。肾毒性检测是针对较常见的样本类型进行的,如尿液,血清 / 血浆和细胞培养上清液。

ProcartaPlex 肝脏毒性检测组合

ProcartaPlex 肾毒性检测组合

ProcartaPlex 肝脏毒性检测可作为预配置检测板提供,并针对细胞裂解物进行了优化。例如, ProcartaPlex 肝毒性试验和匹配的 QuantiGene Plex mRNA 试验可用于测定常用 CYP3A4 诱导剂, viz. 利福平,苯巴比妥, 3- 甲基胆蒽和利托纳维尔的影响,以评价 mRNA 诱导的 CYP3A4 以及原代人肝细胞中的蛋白表达 (图 3)。  对酶活性进行检查,以补充该数据集。ProcartaPlex 肾毒性检测提供多种规格,包括预混 Panel ,单重检测试剂盒和定制混合混合 & 匹配检测板。 预配置的 ProcartaPlex 肾毒性检测组合可在一个孔中同时定量多达 11 种关键尿蛋白。例如,使用 Procartaplex 肾毒性检测组合 ( 图 4) 和 (  图 5) 检测了来自肾脏疾病患者 (AKI , RKF 和 CKDu) 和健康供体 (对照) 的尿液样本。与健康供体相比,肾脏疾病个体尿液样本中的肾蛋白标记物显著增加。

 

ProcartaPlex Panel 选择工具

进一步了解 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

毒理学相关预混多重免疫检测 Panel 的数据

Graph showing enzyme activity, mRNA and protein expression of CYP3A4 after Rifampicin, Phenobarbital, 3-Methylcholanthrene and Ritonavir submission

图3.利福平,苯巴比妥, 3- 甲基胆蒽和利托纳维尔对 CYP3A4 诱导的影响。µm 瓶原代人肝细胞 (0.5-0.7x 10 5 / 孔) 在 96 孔板中培养,并使用利福 µm 平 (30 μ L) ,苯巴比妥 (2000 μ L) , 3- 甲基胆蒽 µm (2 μ L) 或利托纳维尔 (10 µm μ L) 处理 48 小时。使用 ProcartaPlex 人肝毒性检测组合 1 (66x 和 匹配的 QuantiGene Plex mRNA 检测,) 通过细胞上清液中的蛋白表达,酶活性和 mRNA 分析 (A) 对裂解的原代人肝细胞中的 CYP3A4 诱导进行了评估 (C)。数据表示为载体对照 (0.1% DMSO) 的倍数变化和归一化 mRNA/GAPDH 比率和蛋白质/GAPDH 比率。载体对照上的 2 倍感应阈值通过虚线表示。

 

图4.急性肾损伤 (AKI) 和肾功能衰竭 (RKF) 个体样本中的尿液蛋白标志物。ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 1 , 11le xand ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 2 , 9le x人 用其检测单个患者的关键尿蛋白标志物。数据显示,与对照组(健康供体)相比,10 名急性肾损伤 (AKI) 和 13 名肾功能衰竭 (RKF) 个体的尿液样本中的标志物显著增加。

 

图 5.病因不明 (CKDu) 个体的慢性肾病中的尿蛋白标志物。来自 40 人的尿液样品使用 ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 1 , 11ple xand ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 2 , 9plex 进行检测。数据显示,与对照组(健康供体)相比,CKDu 个体的 10 种蛋白质标志物显著增加。


表4.用于毒理学相关研究的预混 ProcartaPlex 多重免疫检测 Panel

产品名称规格货号

ProcartaPlex 人肝脏毒性检测组合 1 , 6plex

靶标CYP1A2 , CYP3A4 , CYP2B6 , CYP2C9 , β -2- 微球蛋白 (B2M) , GAPDH

96 次EPX060-15857-901

ProcartaPlex 人肝毒性检测组合 2 , 5plex

靶标CYP2D6 , CYP2C19 , CP2E1 , β -2- 微球蛋白 (B2M) , GAPDH

96 次EPX050-15858-901

ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 1 , 11plex

靶标列表 [微球编码]: KIM-1/HAVCR/TIM-1 (Kidney injury molecule 1), Renin, Calbindin, Osteoactivin/GPNMB (Transmembrane Glycoprotein NMB), GSTA1 (Glutathione S-transferase A1), IL-18, IP-10 (CXCL10), MCP-1 (CCL2), VEGF-A, Clusterin (APO-J), RBP4 (Retinol-binding protein 4)

96 次EPX110-15855-901

ProcartaPlex 人肾毒性检测组合 2 , 9plex

靶标列表 [微球编码]: Uromodulin, Alpha-1-microglobulin, TFF3 (Trefoil factor 3), Osteopontin (OPN), Cystatin C, NGAL, Beta-2-microglobulin (B2M), TIMP-1, EGF

96 次EPX090-15856-901

ProcartaPlex 大鼠肾毒性检测组合 1 , 5plex

靶标列表 [微球编码]:  Calbindin, KIM-1, Osteopontin (OPN), TFF3, VEGF-A

96 次EPX050-30124-901

ProcartaPlex 大鼠肾毒性检测组合 2,5plex

靶标列表 [微球编码]:  Albumin, Cystatin, Clusterin (Apo-J), NGAL, TIMP-1

96 次EPX050-30125-901


多重基因表达和蛋白质检测

QuantiGene RNA 基因表达分析为多重基因表达定量提供了快速、高通量的解决方案,可同时测量 96 孔板或 384 孔板的单个孔中多达 80 个目的基因。QuantiGene Plex 分析基于杂交,并结合了分支 DNA (bDNA) 技术,该技术使用信号扩增而不是靶标扩增来直接测量 RNA 转录物。该检测在 Luminex® 平台上运行,工作流程简单,不需要 RNA 纯化。有了这些功能,用户就可以使用相同的样本,将用于基因表达谱分析的 QuantiGene 工作流程与用于蛋白质定量的 ProcartaPlex 工作流程合并(图 6)。为了研究相关 ADME (吸收,分布,代谢和排泄) 及毒理学生物标志物的基因表达, QuantiGene Plex 人类 ADME毒 理学检测组合 (80-出租车) 可用于分析与药物代谢相关的 80 个基因靶标,包括酶,转运体和 CYP。

了解有关 基因表达抑制 和 ADME/DMPK / 毒理学检测的 QuantiGene RNA 检测的更多信息

图 6.QuantiGene 基因表达和 ProcartaPlex 蛋白质定量检测的组合工作流程。

关于毒理学免疫检测的其他资料

免疫测定仪器

参考文献

仅供科研使用,不可用于诊断目的。

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