细胞缓冲液-细胞培养基添加剂-赛默飞

使用 Gibco 培养基添加剂改善细胞培养

培养基添加剂通常是成功细胞培养实验的重要组成部分。使用细胞培养基添加剂的多种优势包括，可定制细胞生长条件、提高细胞活力和生长率，可更长久地维持细胞健康。

Gibco 细胞培养基添加剂有助于确保细胞培养和研究结果的可靠性和一致性。

抗生素

在细胞培养基中适当补充抗生素可以保护细胞免受污染。此外，某些抗生素的选择可用于稳定的转染和细胞系的开发。

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L-谷氨酰胺和 GlutaMAX 添加剂

L-谷氨酰胺是一种必需的添加剂，为快速分裂的细胞提供能量。Gibco GlutaMAX 提供了增强的稳定性，为并改善的细胞健康提供支持。

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细胞培养缓冲液

为细胞提供缓冲液以防止 pH 值变化非常重要。这种基本缓冲液是通过在细胞培养基中加入 HEPES 或碳酸氢钠缓冲液来实现的。

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生长因子和细胞因子

生长因子和细胞因子对培养基中细胞的繁殖和发育很重要。Gibco 生长因子具有很高的生物活性，且经实证与 Gibco 培养基兼容。

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牛血清白蛋白（BSA）

BSA 为培养细胞提供增强的营养，减少补充血清的需要。BSA 在其他实验室工作流程中也很有用，包括作为免疫测定的封闭试剂。

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其他培养基添加剂

我们生产种类繁多的细胞培养基添加剂，以支持细胞的生长和维持。选择 Gibco 培养基添加剂以定制您的细胞培养。

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其他培养基添加剂

细胞培养缓冲液

细胞培养使用的碳酸氢钠

碳酸氢钠（NaHCO₃）是细胞培养中常用的缓冲液，用于在4–10%二氧化碳存在的情况下维持培养基的 pH 值。此外，碳酸氢钠提供一些营养价值，且很少对细胞有毒。

培养基中碳酸氢钠的最终浓度取决于培养基的配方和培养箱的二氧化碳浓度。根据所用碳酸氢钠的浓度，建议使用不同的 CO₂ 浓度。如果培养基配方包括：

NaHCO₃（g/L）<1.5，需要浓度为4%的 CO₂
NaHCO₃（g/L）1.5–2.2，需要浓度为5%的 CO₂

NaHCO₃（g/L）2.2–3.4，需要浓度为7%的 CO₂
NaHCO₃（g/L）>3.5，需要浓度为10%的 CO₂

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细胞培养中使用的 HEPES 缓冲液

尽管碳酸氢盐因其营养价值而成为最常用的细胞培养缓冲液，但与 HEPES 缓冲液相比，碳酸氢盐的缓冲能力在生理 pH 值时有所下降。HEPES 对细胞没有营养价值，但可以添加到 pH 7.2 至 7.6 的缓冲细胞培养基中。因此，当需要在 CO₂ 培养箱外长时间处理细胞培养物时，添加 HEPES 可提供额外的缓冲能力。

Gibco HEPES（4-（2-羟乙基）-1-哌嗪乙磺酸）是一种两性离子性的有机化学缓冲剂，被归类为" Good "缓冲液，源于 Norman Good 博士和他的同事在1966年发现的一组缓冲液（Good 等人，Biochemistry 1966）。 

"Good 缓冲液"（如 HEPES）具有以下特征：

pKa 值在6.0至8.0之间
高溶解度
膜不通透性
对生化反应的影响有限

较低的可见光和紫外光吸收率
化学和酶促稳定性
易于制备

细胞培养基中 HEPES 的水平可以从 10 mM 到 25 mM 不等。在 Gibco DMEM 中，HEPES 的浓度为 25 mM。然而，在 Gibco DMEM/F-12 中，其浓度为 15 mM。最常用的浓度为 25 mM。 

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其他细胞培养添加剂

2-巯基乙醇

广泛应用的化合物2 -巯基乙醇的分子式为 HOCH₂CH₂SH。它是乙二醇的混合物，用于还原二硫键。它能够清除羟基自由基（等），可作为生物抗氧化剂。羟基可溶于水并可降低挥发性。

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氨基酸溶液

要增加培养细胞的活性并刺激生长，可向培养基中添加氨基酸添加剂。此外，添加氨基酸添加剂可提供营养并减轻体外细胞的生物合成负担。在蒸馏水中制备，该溶液中的非必需氨基酸浓度是 MEM-α 培养基中浓度的100倍。

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HAT 添加剂

HAT 添加剂是次黄嘌呤钠、氨基蝶呤和胸苷的液体混合物。稀释后的 HAT 适合用作融合后选择培养基，以去除未融合或自融合的 HGPRT-骨髓瘤细胞。次黄嘌呤和胸苷通过利用 HGPRT 的补救途径（由融合的脾细胞提供）为杂交瘤的 DNA 合成提供预制嘌呤和嘧啶。叶酸拮抗剂、氨基喋呤抑制从头核苷生物合成途径。

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