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RNA 提取产品包括用于纯化总 RNA、转录组 RNA、mRNA、microRNA和其他小 RNA 以及序列特异性 RNA 的试剂盒和试剂。我们还提供纯化的 RNA。我们丰富的产品可为研究科学家提供所需的质量和性能。我们的全套产品由科学家和工程师提供支持,适用于各种样品类型、通量和上样量的 RNA 分离和纯化应用。
高质量、高纯度、完整的总 RNA 起始材料是许多实验(例如 RT-PCR、qRT-PCR、阵列分析、Northern 印迹、核酸酶保护测定和 RNA 测序)成功的关键。下表可帮助您选择合适的 Invitrogen 产品,从特定类型和规模的样品纯化总 RNA。
立刻订购 | 立刻订购 | 立刻订购 | 立刻订购 | |
高纯度完整 RNA 的金标准 | 在20分钟内获得高质量 RNA | RNA 和 DNA 高通量纯化 | 完整、无纯化的系统,适合 qRT-PCR 结果 | |
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TRIzol 试剂 | PureLink 试剂盒 | MagMAX 试剂盒 | Cells to Ct | |
推荐用途 | 引用最多、最畅销 | 最适合 qPCR
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分离方法 | 高纯度有机萃取(需要酒精沉淀) | 快速、便捷的硅胶柱 | 磁珠法,可扩展,形式灵活 | 化学裂解(获得 qRT-PCR 结果所需的时间) |
制备时间 | 约 1 小时 | < 20 分钟 | 约 45 分钟 | 10 分钟
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兼容的样品类型 | 大多数样品类型,特别是难裂解样品 | 细胞和组织 | 组织、细胞、血液、血清/血浆、尿液、植物 | 细胞
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原始材料用量 | 100 mg 组织或 107 细胞(需要 1 mL 试剂) | 最多 200 mg 组织,5 x 106 至 1 x 108 个细胞 | 最多 100 mg 组织,最多 5 x 106 个细胞 | 1-100,000 个细胞
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随附逆转录试剂 | | |||
随附 qPCR 预混液 | ||||
适合高通量 | (多种板形式可选) |
有机溶剂萃取具有可靠的性能,结合硅胶膜过滤或磁珠纯化方法使用时,是最苛刻应用的理想选择。Invitrogen TRIzol 试剂特性:
磁性颗粒可提供溶液相结合能力和洗涤动力学,可促进 RNA 纯化和改良样品处理方法(包括自动化),是高通量处理的理想选择。Applied Biosystems MagMAX 磁珠特性:
Invitrogen 产品旨可最大限度减少核酸酶污染,在非理想的条件下认可确保实验成功。这些产品依据最严苛的质量规范生产,主要包括:
硅胶滤膜可轻松快速纯化 RNA,适于获取大多数应用所需的纯 RNA。Invitrogen PureLink 纯化柱特性:
研究有时需要检测的不只是来一份样品的RNA。例如,研究人员可能希望比较遗传变异对基因表达的影响或评估蛋白质和同源 mRNA 水平。为满足这一需求,一些 Ambion 纯化产品设计用于从样品中同时提取 RNA 和 DNA或 RNA 和蛋白质。具有这些功能的试剂盒允许用户使用一个试剂盒简化流程的同时,从样品中获取更多信息。
MELT 总核酸提取试剂盒提供了一种无需进行物理消化即可从新鲜或冷冻组织中提取 RNA 或 DNA 的方法。对于 FFPE 样品,RecoverALL FFPE 组织总核酸提取试剂盒建立了通过传统过滤法纯化 RNA 和 DNA 的标准,而新的 MagMAX FFPE 组织总核酸提取试剂盒允许用户从 FFPE 样品中通过磁珠法纯化相同的 RNA 和 DNA,无需使用二甲苯。
PARIS 试剂盒用于提取总 RNA,同时生成适用于常见蛋白质分析技术的天然裂解物。相关的 mirVana PARIS 试剂盒也可用于获取总 RNA 和天然裂解物,但它也回收小分子 RNA,与总 RNA 一起回收,或单独富集小分子 RNA 组份。
MagMAX 总核酸提取试剂盒结合机械法(氧化锆珠磨)和化学裂解法纯化 RNA 和基因组 DNA,专用于处理难裂解的细菌。而 MELT 总核酸提取试剂盒提供了一种无需造成物理破坏即可从新鲜或冷冻组织中提取 RNA 或 DNA 的闭管酶方法。对于 FFPE 样品,RecoverALL FFPE 组织总核酸提取试剂盒专门允许用户通过传统的玻璃纤维薄膜过滤纯化 RNA 和 DNA,而新的 MagMAX FFPE 组织总核酸提取试剂盒允许用户从 FFPE 样品中通过磁珠法纯化 RNA 和 DNA,无需使用二甲苯。
MELT 总核酸提取系统:一种用于组织破碎(无需手动操作)、RNA 保存和总核酸纯化的新技术。Nature Methods,2005 年 8 月 23 日。
MicroRNA(miRNA)和小干扰 RNA(siRNA)可调节基因表达。它们与其他几类小的非编码 RNA(例如 snRNA、snoRNA 和 piRNA)一起,在各种生物过程中发挥巨大作用。
虽然大多数传统 RNA 分离方法在回收这些较小的 RNA 时效率不高,但我们的 RNA 专家开发的几种试剂盒却可从多种类型样品中定量回收小 RNA。
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30 分钟内从绝大多数样品中分离 | 可回收所有 RNA 和蛋白质 | HTP 分离富集小 RNA 的总 RNA | 从细胞样品到 qPCR 结果的完整试剂盒 | |
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mirVana miRNA 分离试剂盒(含有或不含有苯酚) | mirVana Paris | MagMAX mirVana 总 RNA 分离试剂盒 | TaqMan microRNA Cells-to-CT 试剂盒 | |
最畅销产品 | ||||
分离的 RNA 类型 | 小分子 RNA & 大分子 RNA | 小分子 RNA & 大分子 RNA | 小分子 RNA & 大分子 RNA | 小分子 RNA & 大分子 RNA |
最畅销产品 | ||||
制备时间 | 20 分钟 | 30 分钟 | <1 小时 | 10 分钟 |
适用的样品类型 | 最广泛的样品类型 | 最广泛的样品类型 | 血清/血浆、全血、新鲜/冷冻组织、细胞、尿液 | 细胞 |
分离方法 | 纯度最高,便捷;同时包括有机萃取和硅胶柱 | 纯度最高,便捷;同时包括有机萃取和硅胶柱 | 采用磁珠,可扩展,形式灵活 | Cells-to-CT 直接裂解,无需专门的纯化步骤 |
随附逆转录试剂 | 无 | 无 | 无 | TaqMan MicroRNA 逆转录试剂盒 |
随附 qPCR 预混液 | 无 | 无 | 无 | TaqMan |
试剂盒规格 | 40 次制备 | 40 制备 | 96 次制备 | 100 次溶解反应-加上-试剂用于 200 次 qRT-PCR 测定 |
立刻订购 | 立刻订购 | 立刻订购 | 立刻订购 | |
从总 RNA 中快速纯化 mRNA | 无需纯化, 直接从粗提样品获取mRNA | 来自微量样品的 mRNA 最适合 mRNA 的二代测序 | HTP mRNA 直接或从总 RNA 中富集而来 | |
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Dynabeads\ mRNA 纯化试剂盒 | Dynabeads mRNA DIRECT | Dynabeads mRNA DIRECT 微量试剂盒 | mRNA Catcher Plus | |
最畅销产品 | ||||
制备时间 | 15 分钟 | 15 分钟 | 15 分钟 | 1.5 小时 |
从粗提样品中直接分离 mRNA | 无 | 有 | 有 | 有 |
从总 RNA 中富集 mRNA | 有 | 无 | 无 | 有 |
起始材料量 | <75μg 总 RNA | <20 x 106 个细胞 2–200mg 动物组织 4–400mg 植物组织 | <1 X 104 个细胞 <5mg 动物或植物组织 | 100 至 1 x 106 个细胞 <4mg 组织 40µL 全血 100ng–100µg 总 RNA |
产品形式 | 从纯的总 RNA 中进行快速磁珠捕获 | 直接从粗提样品中进行快速磁珠捕获 | 直接从微型样品中进行快速磁珠捕获 | 直接用于 HTP 的 96 孔包被板 |
兼容高通量应用 | 有 | 有 | 有 | 有 |
试剂盒规格 | 2 mL oligo dT磁珠 | 5mL 或 10mL oligo dT磁珠 | 2mL oligo dT 珠(足够用于制备 100 次 mRNA) | 96 或 960 次制备 |
Oligo(dT)/磁性捕获方法
用于 mRNA 的柱纯化是一种可靠的纯化方法,但需要大量的手动操作,这就意味着需要更多的时间且通量更低。与 oligo(dT) 偶联的磁珠能够提供额外的处理和可扩大优势;但是,该过程需要额外使用磁力架。
Invitrogen Ambion Poly(A)Purist MAG 试剂盒采用与 Poly(A)Purist 试剂盒相同的杂交和洗涤溶液,但提高了磁珠的易用性、速度及可扩展性。该方案通常仅需 45 分钟,并且该试剂盒可执行 8 次大规模富集反应(最多1mg 总 RNA 上样量)至 80 次小规模富集反应(低至 30μg 总 RNA 上样量)。与 Poly(A)Purist 试剂盒一样,该试剂盒仅需从先前纯化的总 RNA 中富集 mRNA。
Invitrogen Dynabeads mRNA 纯化试剂盒可用于从总 RNA 制备样品中纯化 mRNA,通常可在 15 分钟内从纯化的总 RNA 中富集 mRNA,并且允许用户灵活地在低至 5μL 条件下从磁珠中对 mRNA 进行洗脱,甚至可在未洗脱的磁珠上直接进行 cDNA 合成。
对于偏好使用 Dynabeads 技术在一个试剂盒中进行样品裂解和富集的用户,Invitrogen Dynabeads mRNA DIRECT 试剂盒可在 15 分钟内对各种样品进行裂解和富集处理。事实上,使用该技术可以从单个细胞中捕获 mRNA 并产生 cDNA 文库。灵活的规格可允许用户对提取步骤进行放大或缩小,并提供只需 5μL 即可从磁珠上直接进行 cDNA 合成。5mL 规格足够进行 20 次标准分离,10mL 规格足够进行 40 次标准分离。
对于需要使用较小上样量的用户,Invitrogen Dynabeads mRNA DIRECT 微量提取试剂盒提供了从最高 2.5 x 104 个单核细胞、1 x 104 个培养细胞或最多5mg 组织样品(取决于组织样品类型)中进行 100 次 mRNA 分离所需的足够试剂,且具有与其他 Dynabeads 试剂盒相同的洗脱灵活性。
细菌缺乏在真核 mRNA 上所发现的相对稳定的 poly(A) 尾。直到最近,从细菌中分离 mRNA 仍然几乎无法实现。Invitrogen MICROBExpress 细菌 mRNA 分离试剂盒采用一种全新的技术,可从大肠杆菌和其他细菌种属的总 RNA 中去除多达 >95% 的 16S 和 23S rRNA。该试剂盒适用于广泛的革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,并可在约 2 小时内从不超过 10μg 纯化的细菌总 RNA 中富集 mRNA。使用 MICROBExpress 试剂盒分离得到的 mRNA 是用于合成阵列分析中标记 cDNA 的优良模板,也是定量 RT-PCR、Northern 印迹以及 cDNA 文库构建的理想选择。
这是一种最独特的 mRNA 纯化方法,利用经过特殊处理并结合有优化的试剂的孔板,从细胞、组织、血液或纯化的总 RNA 中裂解和富集 mRNA。Invitrogen mRNA Catcher PLUS 产品采用通过专有表面处理的 96 孔板,以方便且适于自动化的方式进行 mRNA 纯化。与 20-mer oligo(dT) 结合的锁核酸 (LNA) 技术提高了其特异性和杂交效率,同时从整个工作流程中免除了离心、沉淀和相分离步骤。
mRNA Catcher PLUS试剂盒能够处理 100ng 至 100µg 总 RNA,100 至 106 哺乳动物细胞,最多 4mg 组织以及 40µL 全血。结合能力为 >80ng/孔。该方案采用简单的裂解、杂交、洗涤和洗脱过程,可以在开放式液体处理器上完全实现自动化,从开始到结束大约仅需要1.5小时。该系统还在洗脱 mRNA 中具有相当的灵活性,并可在未洗脱的杂交板中进行 cDNA 的合成。
使用 Dynabeads 靶向特定 RNA 序列并直接从粗裂解物或其他生物液中分离特定 RNA 分子。捕获的 RNA(包括许多应用首选的 Dynabeads 链霉素亲和素)适于广泛的下游应用,包括蛋白纯化、核酸纯化、蛋白互作研究、免疫沉淀、免疫检测、噬菌体展示、生物淘选、药物筛选和细胞分离。
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一个试剂盒中包含 4 种磁珠,可选择最适合您应用的那款磁珠 | 粘性样品最理想解决方案 | 高表面积,可最大限度富集 | |
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Dynabeads 链霉素亲和素试剂盒(试用装) | Dynabeads M-270 链霉亲和素 | Dynabeads MyOne 链霉亲和素 C1 | |
最畅销产品 | |||
粒径大小 | 1 µm x 2,2.8 µm x 2 | 2.8 µm | 1 µm |
生物素化免疫球蛋白(μg/mg 磁珠) | 最多 20 | 最多 10 | 最多 20 |
结合能力(游离生物素) | 6502,500 pmole/mg 磁珠 | 650-1,350 pmole/mg 磁珠 | 2500 pmole/mg磁珠 |
规格 | 4 x 1 mL | 2 或 10 mL | 2 或 10 mL |
配基类型 | 链霉亲和素 | 链霉亲和素 | 链霉亲和素 |
我们的链霉素亲和素偶联 Dynabeads 是一种强大的多功能工具,可用于明确靶向和捕获特定 RNA 或 DNA 序列,然后将其直接从溶液中提取出来。这些单一尺寸的超顺磁性 Dynabeads 为硝酸纤维素膜提供了有效的固相替代方法,可为您提供绝佳的产物质量和一致性的数据。 优异的近液相反应动力学,可实现超快速实验方案。磁性处理方法固有的简便性使得下游操作和缓冲液更换非常简单,就如同磁铁一样将结合磁珠的靶标吸附浓缩到管壁上,然后丢弃上清液即可。这些磁珠可兼容极其广泛的样品类型,包括大多数体液、植物粗裂解物、动物和微生物来源样品以及纯化的总 RNA 或 DNA。由于这些 Dynabeads磁珠仅与特异性靶向的 RNA 或 DNA 分子相互作用,因此始终不必进行上游总 RNA 或 DNA 纯化。
每毫克 1 µm Dynabeads MyOne 链霉素亲和素 C1 磁珠具备极高的表面积,可高度富集低丰度 RNA 或 DNA。 当您需要从粘性更高的样品(如脑脊液)中捕获核酸时,建议使用尺寸更大的 2.8 μm Dynabeads M-270 链霉素亲和素磁珠。上述 Dynabeads(MyOne 链霉素亲和素 C1 和 M-270 链霉素亲和素)磁珠经过优化设计,具有轻微带负电的表面,确保非靶标核酸序列的非特异性结合水平可忽略不计。
相关应用实例包括:RNA/DNA 致病源分离 (1,2,3,4)、消减杂交 (5,6,7)、cDNA 筛选和富集,突变序列检测和分离 (8,9,10)、细胞特异性转录本分离和 mRNA 差异显示。
直接捕获步骤包括将双链 PCR 产物固定在磁珠上。这些产物可轻松转化为磁珠结合的单链模板,然后用于直接从溶液中捕获特定 RNA 或 DNA 分子。
在某些情况下,通过替代间接捕获方法可实现更快的反应动力学。此类间接捕获步骤允许在磁珠固定之前捕获靶标序列。首先,将生物素化的捕获序列(单链 DNA)与样品一起孵育,等待其与溶液中的靶标 RNA 或 DNA 分子杂交。然后将链霉素亲和素包被的 Dynabeads 磁珠加入混合物中,并通过链霉素亲和素-生物素键将杂交序列固定在 Dynabeads 上。
您是否知道 Dynabeads 已在全球超过25,000台常规 IVD 仪器上使用?
Ambion RNA 专家致力提供最高质量的 RNA。为了实现这一目标,我们不断努力了解"高质量 RNA" 对于不同下游应用的真正意义。mRNA 完整性、基因组 DNA 污染、存在/不存在酶抑制剂以及 poly(A) 制备物中的核糖体 RNA 污染,都是影响 RNA 质量的重要因素。随着我们越发了解这些因素对于下游应用的影响,我们将努力确保自己的 FirstChoice RNA 产品能够超越您最严苛的应用要求。
我们提供人类、小鼠和大鼠组织,以及大肠杆菌和人类细胞系来源的 FirstChoice 总 RNA。此类 RNA 通过 Ambion RNA 分离试剂获得,可提供高纯、完整且包含所有小 RNA 组分的 RNA。纯化的 RNA 将接受严苛的 DNase 处理。我们提供的 RNA 可直接用于任何下游应用,包括 RT-PCR。请注意,尽管无法从 RNA 样品中彻底去除每个 DNA 分子,但每种制剂都经过测试,可确保任何残留 DNA 污染都微乎其微。
我们采用 Agilent 2100 Bioanalyzer 仪器进行毛细管电泳来验证 RNA 的完整性。FirstChoice 总 RNA 以方便、即用型的 1 mg/mL THE RNA 存储液形式提供。
产品名称 | 货号 | 种属 | 样品来源 | 数量 |
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大肠杆菌总 RNA | AM7940 | 大肠杆菌 | 正常组织 | 200 µg |
乳腺癌 (MCF-7) 总 RNA | AM7846 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
Burkitts 淋巴瘤 (Raji) 总 RNA | AM7856 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
宫颈腺癌 (HeLa-S3) 总 RNA | AM7852 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
FirstChoice 人脑参考 RNA (1 mg⁄mL) | AM6050 | 人类 | 正常组织 | 50 µg |
人脑总 RNA | AM7962 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人乳腺总 RNA | AM6952 | 人类 | 正常组织 | 50 µg |
人结肠总 RNA | AM7986 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人心脏总 RNA | AM7966 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人肾脏总 RNA | AM7976 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人肝脏总 RNA | AM7960 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人肺总 RNA | AM7968 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人胰腺总 RNA | AM7954 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人前列腺总 RNA | AM7988 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人骨骼肌总 RNA | AM7982 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人脾脏总 RNA | AM7970 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人睾丸总 RNA | AM7972 | 人类 | 正常组织 | 10 µg |
白血病 (K-562) 总 RNA | AM7832 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
早幼粒细胞白血病 (HL-60) 总 RNA | AM7836 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
T 细胞白血病 (Jurkat) 总 RNA | AM7858 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
如需订购以上任何产品,请联系客户服务部。
生物(动物、昆虫、植物、真菌、细菌)和环境(水、空气、食品)样品的病毒分析越来越多地采用分子检测方法,这就需要从检测样本中获取RNA或NA。病毒 RNA 的纯化在获得良好回收率和检测灵敏度方面存在着特殊的挑战。Ambion RNA 专家已经开发出多种 RNA 纯化产品,这些产品经过优化,能够以数种规格从一系列样品类型中提取出产量最高、纯度最优、完整性最好的病毒 RNA。
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
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实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
总 RNA | ||||||
PureLink 病毒 RNA/DNA 小量试剂盒 | 离液盐裂解,硅胶膜 | |||||
RNAqueous 试剂盒 | 高离液盐裂解,二氧化硅过滤器 | |||||
MagMAX AI/ND 病毒 RNA 分离试剂盒 | 高离液盐裂解,磁性颗粒 | |||||
MagMAX-96 AI/ND 病毒 RNA 分离试剂盒 | 离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
DNA/RNA | ||||||
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
PureLink Pro 96 病毒 RNA/DNA 纯化试剂盒 | 高离液盐裂解,二氧化硅过滤器,96 孔处理,适合自动化 | |||||
MagMAX 总核酸分离试剂盒 | 离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
MagMAX-96 病毒 RNA 分离试剂盒 | 离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
Dynabeads SILANE 病毒 NA | 高离液盐裂解,磁珠,适合自动化 | |||||
iPrep PureLink 病毒试剂盒 | 高离液盐裂解,磁性颗粒,适合自动化 | |||||
MagMAX 病毒 RNA 分离试剂盒 | 高离液盐裂解,磁性颗粒 | |||||
MagMAX-96 病毒 RNA 分离试剂盒(5 x 96 次) | 高离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
MicroRNA | ||||||
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
mirVana miRNA 分离试剂盒 | 离液盐裂解,硅胶膜 | |||||
mirVana miRNA 分离试剂盒(不含苯酚 - 必须单独购买) | 高离液盐裂解,二氧化硅过滤器 | |||||
TRIzol LS 试剂 | TRIzol 试剂裂解,一步式试剂 | |||||
mRNA | ||||||
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
Dynabeads mRNA DIRECT 试剂盒 | 离液盐裂解,磁珠 | |||||
Dynabeads mRNA DIRECT 微量提取试剂盒 | 高离液盐裂解,磁珠 |
高质量、高纯度、完整的总 RNA 起始材料是许多实验(例如 RT-PCR、qRT-PCR、阵列分析、Northern 印迹、核酸酶保护测定和 RNA 测序)成功的关键。下表可帮助您选择合适的 Invitrogen 产品,从特定类型和规模的样品纯化总 RNA。
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高纯度完整 RNA 的金标准 | 在20分钟内获得高质量 RNA | RNA 和 DNA 高通量纯化 | 完整、无纯化的系统,适合 qRT-PCR 结果 | |
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TRIzol 试剂 | PureLink 试剂盒 | MagMAX 试剂盒 | Cells to Ct | |
推荐用途 | 引用最多、最畅销 | 最适合 qPCR
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分离方法 | 高纯度有机萃取(需要酒精沉淀) | 快速、便捷的硅胶柱 | 磁珠法,可扩展,形式灵活 | 化学裂解(获得 qRT-PCR 结果所需的时间) |
制备时间 | 约 1 小时 | < 20 分钟 | 约 45 分钟 | 10 分钟
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兼容的样品类型 | 大多数样品类型,特别是难裂解样品 | 细胞和组织 | 组织、细胞、血液、血清/血浆、尿液、植物 | 细胞
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原始材料用量 | 100 mg 组织或 107 细胞(需要 1 mL 试剂) | 最多 200 mg 组织,5 x 106 至 1 x 108 个细胞 | 最多 100 mg 组织,最多 5 x 106 个细胞 | 1-100,000 个细胞
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随附逆转录试剂 | | |||
随附 qPCR 预混液 | ||||
适合高通量 | (多种板形式可选) |
有机溶剂萃取具有可靠的性能,结合硅胶膜过滤或磁珠纯化方法使用时,是最苛刻应用的理想选择。Invitrogen TRIzol 试剂特性:
磁性颗粒可提供溶液相结合能力和洗涤动力学,可促进 RNA 纯化和改良样品处理方法(包括自动化),是高通量处理的理想选择。Applied Biosystems MagMAX 磁珠特性:
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PARIS 试剂盒用于提取总 RNA,同时生成适用于常见蛋白质分析技术的天然裂解物。相关的 mirVana PARIS 试剂盒也可用于获取总 RNA 和天然裂解物,但它也回收小分子 RNA,与总 RNA 一起回收,或单独富集小分子 RNA 组份。
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MELT 总核酸提取系统:一种用于组织破碎(无需手动操作)、RNA 保存和总核酸纯化的新技术。Nature Methods,2005 年 8 月 23 日。
MicroRNA(miRNA)和小干扰 RNA(siRNA)可调节基因表达。它们与其他几类小的非编码 RNA(例如 snRNA、snoRNA 和 piRNA)一起,在各种生物过程中发挥巨大作用。
虽然大多数传统 RNA 分离方法在回收这些较小的 RNA 时效率不高,但我们的 RNA 专家开发的几种试剂盒却可从多种类型样品中定量回收小 RNA。
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30 分钟内从绝大多数样品中分离 | 可回收所有 RNA 和蛋白质 | HTP 分离富集小 RNA 的总 RNA | 从细胞样品到 qPCR 结果的完整试剂盒 | |
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mirVana miRNA 分离试剂盒(含有或不含有苯酚) | mirVana Paris | MagMAX mirVana 总 RNA 分离试剂盒 | TaqMan microRNA Cells-to-CT 试剂盒 | |
最畅销产品 | ||||
分离的 RNA 类型 | 小分子 RNA & 大分子 RNA | 小分子 RNA & 大分子 RNA | 小分子 RNA & 大分子 RNA | 小分子 RNA & 大分子 RNA |
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制备时间 | 20 分钟 | 30 分钟 | <1 小时 | 10 分钟 |
适用的样品类型 | 最广泛的样品类型 | 最广泛的样品类型 | 血清/血浆、全血、新鲜/冷冻组织、细胞、尿液 | 细胞 |
分离方法 | 纯度最高,便捷;同时包括有机萃取和硅胶柱 | 纯度最高,便捷;同时包括有机萃取和硅胶柱 | 采用磁珠,可扩展,形式灵活 | Cells-to-CT 直接裂解,无需专门的纯化步骤 |
随附逆转录试剂 | 无 | 无 | 无 | TaqMan MicroRNA 逆转录试剂盒 |
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试剂盒规格 | 40 次制备 | 40 制备 | 96 次制备 | 100 次溶解反应-加上-试剂用于 200 次 qRT-PCR 测定 |
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从粗提样品中直接分离 mRNA | 无 | 有 | 有 | 有 |
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起始材料量 | <75μg 总 RNA | <20 x 106 个细胞 2–200mg 动物组织 4–400mg 植物组织 | <1 X 104 个细胞 <5mg 动物或植物组织 | 100 至 1 x 106 个细胞 <4mg 组织 40µL 全血 100ng–100µg 总 RNA |
产品形式 | 从纯的总 RNA 中进行快速磁珠捕获 | 直接从粗提样品中进行快速磁珠捕获 | 直接从微型样品中进行快速磁珠捕获 | 直接用于 HTP 的 96 孔包被板 |
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Oligo(dT)/磁性捕获方法
用于 mRNA 的柱纯化是一种可靠的纯化方法,但需要大量的手动操作,这就意味着需要更多的时间且通量更低。与 oligo(dT) 偶联的磁珠能够提供额外的处理和可扩大优势;但是,该过程需要额外使用磁力架。
Invitrogen Ambion Poly(A)Purist MAG 试剂盒采用与 Poly(A)Purist 试剂盒相同的杂交和洗涤溶液,但提高了磁珠的易用性、速度及可扩展性。该方案通常仅需 45 分钟,并且该试剂盒可执行 8 次大规模富集反应(最多1mg 总 RNA 上样量)至 80 次小规模富集反应(低至 30μg 总 RNA 上样量)。与 Poly(A)Purist 试剂盒一样,该试剂盒仅需从先前纯化的总 RNA 中富集 mRNA。
Invitrogen Dynabeads mRNA 纯化试剂盒可用于从总 RNA 制备样品中纯化 mRNA,通常可在 15 分钟内从纯化的总 RNA 中富集 mRNA,并且允许用户灵活地在低至 5μL 条件下从磁珠中对 mRNA 进行洗脱,甚至可在未洗脱的磁珠上直接进行 cDNA 合成。
对于偏好使用 Dynabeads 技术在一个试剂盒中进行样品裂解和富集的用户,Invitrogen Dynabeads mRNA DIRECT 试剂盒可在 15 分钟内对各种样品进行裂解和富集处理。事实上,使用该技术可以从单个细胞中捕获 mRNA 并产生 cDNA 文库。灵活的规格可允许用户对提取步骤进行放大或缩小,并提供只需 5μL 即可从磁珠上直接进行 cDNA 合成。5mL 规格足够进行 20 次标准分离,10mL 规格足够进行 40 次标准分离。
对于需要使用较小上样量的用户,Invitrogen Dynabeads mRNA DIRECT 微量提取试剂盒提供了从最高 2.5 x 104 个单核细胞、1 x 104 个培养细胞或最多5mg 组织样品(取决于组织样品类型)中进行 100 次 mRNA 分离所需的足够试剂,且具有与其他 Dynabeads 试剂盒相同的洗脱灵活性。
细菌缺乏在真核 mRNA 上所发现的相对稳定的 poly(A) 尾。直到最近,从细菌中分离 mRNA 仍然几乎无法实现。Invitrogen MICROBExpress 细菌 mRNA 分离试剂盒采用一种全新的技术,可从大肠杆菌和其他细菌种属的总 RNA 中去除多达 >95% 的 16S 和 23S rRNA。该试剂盒适用于广泛的革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌,并可在约 2 小时内从不超过 10μg 纯化的细菌总 RNA 中富集 mRNA。使用 MICROBExpress 试剂盒分离得到的 mRNA 是用于合成阵列分析中标记 cDNA 的优良模板,也是定量 RT-PCR、Northern 印迹以及 cDNA 文库构建的理想选择。
这是一种最独特的 mRNA 纯化方法,利用经过特殊处理并结合有优化的试剂的孔板,从细胞、组织、血液或纯化的总 RNA 中裂解和富集 mRNA。Invitrogen mRNA Catcher PLUS 产品采用通过专有表面处理的 96 孔板,以方便且适于自动化的方式进行 mRNA 纯化。与 20-mer oligo(dT) 结合的锁核酸 (LNA) 技术提高了其特异性和杂交效率,同时从整个工作流程中免除了离心、沉淀和相分离步骤。
mRNA Catcher PLUS试剂盒能够处理 100ng 至 100µg 总 RNA,100 至 106 哺乳动物细胞,最多 4mg 组织以及 40µL 全血。结合能力为 >80ng/孔。该方案采用简单的裂解、杂交、洗涤和洗脱过程,可以在开放式液体处理器上完全实现自动化,从开始到结束大约仅需要1.5小时。该系统还在洗脱 mRNA 中具有相当的灵活性,并可在未洗脱的杂交板中进行 cDNA 的合成。
使用 Dynabeads 靶向特定 RNA 序列并直接从粗裂解物或其他生物液中分离特定 RNA 分子。捕获的 RNA(包括许多应用首选的 Dynabeads 链霉素亲和素)适于广泛的下游应用,包括蛋白纯化、核酸纯化、蛋白互作研究、免疫沉淀、免疫检测、噬菌体展示、生物淘选、药物筛选和细胞分离。
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一个试剂盒中包含 4 种磁珠,可选择最适合您应用的那款磁珠 | 粘性样品最理想解决方案 | 高表面积,可最大限度富集 | |
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Dynabeads 链霉素亲和素试剂盒(试用装) | Dynabeads M-270 链霉亲和素 | Dynabeads MyOne 链霉亲和素 C1 | |
最畅销产品 | |||
粒径大小 | 1 µm x 2,2.8 µm x 2 | 2.8 µm | 1 µm |
生物素化免疫球蛋白(μg/mg 磁珠) | 最多 20 | 最多 10 | 最多 20 |
结合能力(游离生物素) | 6502,500 pmole/mg 磁珠 | 650-1,350 pmole/mg 磁珠 | 2500 pmole/mg磁珠 |
规格 | 4 x 1 mL | 2 或 10 mL | 2 或 10 mL |
配基类型 | 链霉亲和素 | 链霉亲和素 | 链霉亲和素 |
我们的链霉素亲和素偶联 Dynabeads 是一种强大的多功能工具,可用于明确靶向和捕获特定 RNA 或 DNA 序列,然后将其直接从溶液中提取出来。这些单一尺寸的超顺磁性 Dynabeads 为硝酸纤维素膜提供了有效的固相替代方法,可为您提供绝佳的产物质量和一致性的数据。 优异的近液相反应动力学,可实现超快速实验方案。磁性处理方法固有的简便性使得下游操作和缓冲液更换非常简单,就如同磁铁一样将结合磁珠的靶标吸附浓缩到管壁上,然后丢弃上清液即可。这些磁珠可兼容极其广泛的样品类型,包括大多数体液、植物粗裂解物、动物和微生物来源样品以及纯化的总 RNA 或 DNA。由于这些 Dynabeads磁珠仅与特异性靶向的 RNA 或 DNA 分子相互作用,因此始终不必进行上游总 RNA 或 DNA 纯化。
每毫克 1 µm Dynabeads MyOne 链霉素亲和素 C1 磁珠具备极高的表面积,可高度富集低丰度 RNA 或 DNA。 当您需要从粘性更高的样品(如脑脊液)中捕获核酸时,建议使用尺寸更大的 2.8 μm Dynabeads M-270 链霉素亲和素磁珠。上述 Dynabeads(MyOne 链霉素亲和素 C1 和 M-270 链霉素亲和素)磁珠经过优化设计,具有轻微带负电的表面,确保非靶标核酸序列的非特异性结合水平可忽略不计。
相关应用实例包括:RNA/DNA 致病源分离 (1,2,3,4)、消减杂交 (5,6,7)、cDNA 筛选和富集,突变序列检测和分离 (8,9,10)、细胞特异性转录本分离和 mRNA 差异显示。
直接捕获步骤包括将双链 PCR 产物固定在磁珠上。这些产物可轻松转化为磁珠结合的单链模板,然后用于直接从溶液中捕获特定 RNA 或 DNA 分子。
在某些情况下,通过替代间接捕获方法可实现更快的反应动力学。此类间接捕获步骤允许在磁珠固定之前捕获靶标序列。首先,将生物素化的捕获序列(单链 DNA)与样品一起孵育,等待其与溶液中的靶标 RNA 或 DNA 分子杂交。然后将链霉素亲和素包被的 Dynabeads 磁珠加入混合物中,并通过链霉素亲和素-生物素键将杂交序列固定在 Dynabeads 上。
您是否知道 Dynabeads 已在全球超过25,000台常规 IVD 仪器上使用?
Ambion RNA 专家致力提供最高质量的 RNA。为了实现这一目标,我们不断努力了解"高质量 RNA" 对于不同下游应用的真正意义。mRNA 完整性、基因组 DNA 污染、存在/不存在酶抑制剂以及 poly(A) 制备物中的核糖体 RNA 污染,都是影响 RNA 质量的重要因素。随着我们越发了解这些因素对于下游应用的影响,我们将努力确保自己的 FirstChoice RNA 产品能够超越您最严苛的应用要求。
我们提供人类、小鼠和大鼠组织,以及大肠杆菌和人类细胞系来源的 FirstChoice 总 RNA。此类 RNA 通过 Ambion RNA 分离试剂获得,可提供高纯、完整且包含所有小 RNA 组分的 RNA。纯化的 RNA 将接受严苛的 DNase 处理。我们提供的 RNA 可直接用于任何下游应用,包括 RT-PCR。请注意,尽管无法从 RNA 样品中彻底去除每个 DNA 分子,但每种制剂都经过测试,可确保任何残留 DNA 污染都微乎其微。
我们采用 Agilent 2100 Bioanalyzer 仪器进行毛细管电泳来验证 RNA 的完整性。FirstChoice 总 RNA 以方便、即用型的 1 mg/mL THE RNA 存储液形式提供。
产品名称 | 货号 | 种属 | 样品来源 | 数量 |
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大肠杆菌总 RNA | AM7940 | 大肠杆菌 | 正常组织 | 200 µg |
乳腺癌 (MCF-7) 总 RNA | AM7846 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
Burkitts 淋巴瘤 (Raji) 总 RNA | AM7856 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
宫颈腺癌 (HeLa-S3) 总 RNA | AM7852 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
FirstChoice 人脑参考 RNA (1 mg⁄mL) | AM6050 | 人类 | 正常组织 | 50 µg |
人脑总 RNA | AM7962 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人乳腺总 RNA | AM6952 | 人类 | 正常组织 | 50 µg |
人结肠总 RNA | AM7986 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人心脏总 RNA | AM7966 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人肾脏总 RNA | AM7976 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人肝脏总 RNA | AM7960 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人肺总 RNA | AM7968 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人胰腺总 RNA | AM7954 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人前列腺总 RNA | AM7988 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人骨骼肌总 RNA | AM7982 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人脾脏总 RNA | AM7970 | 人类 | 正常组织 | 100 µg |
人睾丸总 RNA | AM7972 | 人类 | 正常组织 | 10 µg |
白血病 (K-562) 总 RNA | AM7832 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
早幼粒细胞白血病 (HL-60) 总 RNA | AM7836 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
T 细胞白血病 (Jurkat) 总 RNA | AM7858 | 人类 | 细胞系 | 100 µg |
如需订购以上任何产品,请联系客户服务部。
生物(动物、昆虫、植物、真菌、细菌)和环境(水、空气、食品)样品的病毒分析越来越多地采用分子检测方法,这就需要从检测样本中获取RNA或NA。病毒 RNA 的纯化在获得良好回收率和检测灵敏度方面存在着特殊的挑战。Ambion RNA 专家已经开发出多种 RNA 纯化产品,这些产品经过优化,能够以数种规格从一系列样品类型中提取出产量最高、纯度最优、完整性最好的病毒 RNA。
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
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实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
总 RNA | ||||||
PureLink 病毒 RNA/DNA 小量试剂盒 | 离液盐裂解,硅胶膜 | |||||
RNAqueous 试剂盒 | 高离液盐裂解,二氧化硅过滤器 | |||||
MagMAX AI/ND 病毒 RNA 分离试剂盒 | 高离液盐裂解,磁性颗粒 | |||||
MagMAX-96 AI/ND 病毒 RNA 分离试剂盒 | 离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
DNA/RNA | ||||||
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
PureLink Pro 96 病毒 RNA/DNA 纯化试剂盒 | 高离液盐裂解,二氧化硅过滤器,96 孔处理,适合自动化 | |||||
MagMAX 总核酸分离试剂盒 | 离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
MagMAX-96 病毒 RNA 分离试剂盒 | 离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
Dynabeads SILANE 病毒 NA | 高离液盐裂解,磁珠,适合自动化 | |||||
iPrep PureLink 病毒试剂盒 | 高离液盐裂解,磁性颗粒,适合自动化 | |||||
MagMAX 病毒 RNA 分离试剂盒 | 高离液盐裂解,磁性颗粒 | |||||
MagMAX-96 病毒 RNA 分离试剂盒(5 x 96 次) | 高离液盐裂解,磁性颗粒,96 孔处理,适合自动化 | |||||
MicroRNA | ||||||
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
mirVana miRNA 分离试剂盒 | 离液盐裂解,硅胶膜 | |||||
mirVana miRNA 分离试剂盒(不含苯酚 - 必须单独购买) | 高离液盐裂解,二氧化硅过滤器 | |||||
TRIzol LS 试剂 | TRIzol 试剂裂解,一步式试剂 | |||||
mRNA | ||||||
产品 | 产品形式 | 最适合的下游应用 | ||||
实时 RT-PCR | 微阵列分析 | 测序 | Northern 印迹 | 克隆 | ||
Dynabeads mRNA DIRECT 试剂盒 | 离液盐裂解,磁珠 | |||||
Dynabeads mRNA DIRECT 微量提取试剂盒 | 高离液盐裂解,磁珠 |
仅供科研使用,不可用于诊断目的。