概述

Applied Biosystems QuantStudio 实时荧光定量 PCR 系统可检测低至1.5倍的变化。大多数系统还可针对10个对数级的起始模板，提供可重复的检测分析。

 

配套软件更为 QuantStudio 系统数据分析提供了在线工具包。该软件充分利用了我们的云端平台 Connect，提供了灵活、易用、有助于 qPCR 和相关数据功能解读的高度多用途分析工具。

 

这类模块允许用户将100多次基因分型、基因表达或其他 qPCR 实验合并为一个项目，在数分钟内完成相应数据分析。相关专题模块包括“设计和分析”、“高分辨率熔解曲线 (HRM) 分析”、“序列存在/缺失分析”、“标准曲线”、“基因分型”、“hPSC Scorecard 分析”和“相对定量分析”。相关示例如下。

灵敏度

可检测出低至1.5倍的差异

不同的簇表明 QuantStudio 7 Pro 系统具备2倍和1.5倍差异鉴别能力，置信度可达 99.9%，与其他 Applied Biosystems 平台、QuantStudio 7 Flex 和 7900HT 仪器相当。评估起始量存在2倍和1.5倍差异的总肝脏cDNA样品。使用搭载自动阈值和基线的对应平台软件分析运行，然后使用 SAS JMP v13 统计软件导出数据并分析。

扩增曲线图显示，使用  QuantStudio 7 Pro 系统检测到1.5倍的表达变化。扩增连续稀释的 KAZ 质粒。纵轴为参照 ROX 染料标准化的荧光变化。横轴为循环数，从左到右递增。绘制标准曲线，可验证这一判断。标准曲线的纵轴为循环阈值，横轴是连续稀释浓度（从左到右递增）。

使用96孔板在10倍稀释液中扩增 KAZ 质粒 DNA，10个对数级的起始模板量下均呈现了高度可重现性分离结果。纵轴为参照 ROX 染料标准化的扣除背景荧光对数值。横轴为循环数，从左到右递增。

单拷贝检测

单拷贝的 KAZ 质粒呈蓝色，而 NTC 呈紫色。QuantStudio 7 Pro 系统可从 NTC（43/48阳性孔）之中检测并清晰区分单拷贝 

多重分析（技术）

多重分析反应可检测 VIC 染料标记的 18S rRNA，并可通过 FAM 标记的 TaqMan 探针和引物检测 TGFb 基因。该反应采用快速预混液，一式96份重复运行。纵轴表示荧光变化（参照 ROX 染料标准化），横轴表示循环数（从左至右递增）。CT 值结果显示产物分离清晰、一致，各重复样品之间的标准偏差较低。

基因分型

上述曲线图展示了 Genotyping 应用程序中的改良可视化和等位基因鉴别曲线图如何从背景噪音中准确呈现真实信号。

HRM

High-Resolution Melt (HRM) Analysis 应用程序用于 PCR 后分析，可鉴定核酸序列中的变异。该方法可通过高亮度的 dsDNA 结合染料和 QuantStudio 系统，检测 PCR 溶解（解离）曲线的细微差异。这一系统搭载精确的温升控制功能、高级数据捕获功能和 HRM 分析软件，非常适合 HRM 分析。

 

 

仅供研究使用。不可用于诊断程序。