液体クロマトグラフィー質量分析（LC－MS）

汎用性と分解能をもたらす LC－MS

液体クロマトグラフィー（LC）は、広く使用されている分離手法であり、試料のイオン化を介して質量分析と組み合わせて使用されます。LC－ MS では、可溶性化合物（移動相）は固定相（担体）が充填されたカラムを通過します。これにより、化合物をその重量や移動相とカラムの固定相に対するアフィニティーに基づいて効果的に分離できます。LC 分離されたサンプルは、適切なイオン化法によりイオン化されます。H+ イオンが付加する陽イオン化だけでなく、H+ イオンの損失による陰イオン化も可能です。

このステップの後に、サンプルは質量分析計の真空チャンバーに導入されます。

LC は、タンパク質や複雑なペプチドのような、より大きく不揮発性の分子に対して選択される分離技術である。 MS と組み合わせて LC－MS として適用することで、逆相液体クロマトグラフィーなど、異なるカラムケミストリーを使用できるため、幅広いサンプルに対応します。

また LC は、質量は同一で質量分析計では識別（分離）できない異性体の分離にも最適です。実際、優れた分解能と幅広い質量範囲により、LC はゲル電気泳動の代替手法としても広く普及しています。さらに、LC にはイオン抑制を削減する効果があります。イオン抑制は、分子の相互作用が完全なイオン化プロセスを妨げる場合に発生します。

高速液体クロマトグラフィーである HPLC は、LC を改善した代替手法として広まっています。HPLC は、当初は 50 ～ 350 bar の高圧で機能するため、高圧液体クロマトグラフィーとして定義されていました。これに対し、LC では、移動相がカラムを通過する際の重力に頼っています。

このセクションでは、次の内容を学習します。