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フローサイトメトリー用細胞カウントビーズ
フローサイトメーターの多くは、サンプルに含まれる細胞の濃度を直接測定することも絶対計数することもできません。 絶対細胞数計測は通常、血球計数機器による細胞濃度の測定とフローサイトメーターの Population データの収集を別々に実施（複数のプラットフォームを使用した試験）してこれを組み合わせるか、またはビーズの内部計数標準をフロー サイトメーターのサンプルに適用（単一のプラットフォームを使用した試験）するかのどちらかで算出します。 そこでライフテクノロジーズは、CountBright™ 絶対細胞数計測用ビーズと AccuCheck Flow Cytometry Cell Counting Beads を開発しました。
CountBright™ 細胞絶対数計数用ビーズ
CountBright™ Absoluteフローサイトメトリー用細胞カウントビーズは、幅広い励起および発光波長で強い蛍光シグナルを発する、濃度測定済みで校正済みのビーズ懸濁液です。 これは、リンパ球と同等サイズのため、機器の設定を変更する必要がありません。 絶対計数するには、特定の量の計測用ビーズを既知の量のサンプルに加え、ビーズあたりのサンプル量がわかるようにします。 サンプルに含まれるビーズの数が解析量を示し、サンプル 1 μL あたりの細胞の数を正確に算出します。
CountBright Absolute フローサイトメトリー用細胞カウントビーズには、以下のメリットがあります。
CountBright Absolute フローサイトメトリー用細胞カウントビーズには、以下のメリットがあります。
- 適合性—幅広い蛍光色素を搭載し、あらゆるメーカーの機器に適合します。
- 汎用性—使いやすいプロトコールにより、溶解全血/非洗浄全血など、さまざまなタイプの細胞に使用できます。
- 精度—複数のプラットフォームを使用した試験に比べて、高い信頼性を発揮します。
| 図1. 生細胞と死細胞の測定と細胞の絶対計数。 530/30 nm バンドパスフィルターで収集したcalcein蛍光シグナルと 610/20 nm バンドパスフィルターで収集したethidium homodimer-1蛍光シグナルのプロットにより、生細胞と死細胞だけでなくカウントビーズも明確に分離されます。 Jurkat 細胞（ヒト T 細胞白血病）の生細胞と熱処理細胞の混合液を、LIVE/DEAD® Viability/Cytotoxicity Kit の試薬で処理しました。このサンプルに CountBright™ Absolute Counting Beads を加え、488 nm 励起のフローサイトメトリーで解析しました。 |
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| 製品 | Ex（nm） | Em（nm） | 容量 | Cat. No. |
|---|---|---|---|---|
| CountBright™ Absolute Counting Beads | UV-635 | 385-800 | 5 mL | C36950 |
AccuCheck Counting Beads
AccuCheck Flow Cytometry Cell Counting Beads は、臨床アプリケーションに最適です。 このビーズは、シングルプラットフォーム法の絶対細胞数計測に適しています。フローサイトメトリーによる直接イムノフェノタイピングと、ピペッティング用とミキシング用の双方で内部コントロールとして働く 2 種類の蛍光ビーズのメリットを組み合わせました。 既知の量の AccuCheck Flow Cytometry Cell Counting Beads を既知の量のサンプルに加え、細胞とともにビーズを計数します。 ビーズの濃度がわかっているため、蛍光ビーズの全event数とカウントした細胞の数から 1 µL あたりの細胞数を割り出すことができます。
AccuCheck Counting Beads には、以下のメリットがあります。
AccuCheck Counting Beads には、以下のメリットがあります。
- 精度—2 色の蛍光ビーズの比率を利用した内部コントロールにより、ピペッティングの精度をチェックします。
- 信頼性—結果の安定性を高めるため、マルチプラットフォームよりもシングルプラットフォーム法をお勧めします。
- 適合性—大半のイムノフェノタイピング実験で、バリデーションが簡単です。
| 製品 | Ex（nm） | Em（nm） | 容量 | Cat. No. |
|---|---|---|---|---|
| AccuCheck Flow Cytometry Counting Beads | ビーズ A: 488 ビーズ B: UV-635 | ビーズ A: 525-670 ビーズ B: 525-670 | 10 mL | PCB100 |
Resources
Fluorophore and reagent selection guide for flow cytometry
Download Flow Cytometry Protocols Handbook
Spectral Flow Cytometry Fundamentals
Invitrogen eBioscience Resources—Selection guides, Best Protocols, product performance and more.
Intracellular Staining for Flow Cytometry How-To Video—for detecting cytokines and intranuclear markers.
Flow Cytometry Learning Center—Access flow cytometry educational resources for better experiment planning and execution.
Flow Cytometry Panel Builder—Design your flow cytometry panel with this online tool for a simplified, customizable experience to fit your needs.
5 Steps Resources
Support
Flow Cytometry Support Center—Find technical support recommendations for your flow cytometry workflows, including tips for experimental setup and in-depth troubleshooting help.
Flow Cytometry Panel Design Support—Work with one of our technical sales specialists to discuss your experimental needs and guide you through the process.