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細胞内フローサイトメトリーでの 5 ステップ
細胞内フローサイトメトリーにおけるベストプラクティス
細胞内分子を染色して検出する能力は、特徴的な細胞サブセットを識別できる可能性、ならびに細胞集団の特徴を一層明らかにできる可能性をもたらします。当社のリソース、ツールおよび製品は、フローサイトメトリー実験を計画する際に時間と労力を節約し、効率を高めるのに役立ちます。
当社の効率的アプローチを用いて時間とエネルギーを節約することにより、必要とする抗体が迅速かつ容易に見つかります。
フローサイトメトリー用に細胞内染色を行う場合、固定および透過処理用のバッファーの選択は、データの品質および正確さに大きな影響を与えます。フローサイトメトリー用に細胞内可溶質のタンパク質、核タンパク質および分泌タンパク質を染色するための最適化したソリューションを提供しています。
- 固定および透過処理用のバッファーは、データの品質および正確度に大きな影響を与えます
- 最適化された染色用バッファーを使用して、ご自分で差異を調べてください
細胞質染色
| eBioscience Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set | FIX & PERM Cell Fixation & Cell Permeabilization Kit | |
|---|---|---|
| 用途 |
IC Fix & Perm buffer set の詳細を見る |
|
| 内容 |
|
|
| サイズ | 1 キット | 50 回分 |
| 製品番号 | 88-8824-00 | GAS003 |
| 規制状況 | RUO–研究目的の使用に限定。診断目的の用途には使用禁止。 | 汎用試薬。 |
| 適用 | 研究目的の使用に限定（すなわち、任意のサンプルタイプの研究）。 | 診断目的で人体から検体を採取、調整、および検査するために使用される一般的な研究用途に使用。 |
核染色
| eBioscience Foxp3 / Transcription Factor Staining Buffer Set | |
|---|---|
| 用途 |
|
| 内容 |
|
| サイズ | 1 キット |
| 製品番号 | 00-5523-00 |
ウェブツール：フローサイトメトリー用パネルビルダー
- フローサイトメトリーパネルを設計する方に最適
- 簡素化された、カスタム可能なパネル設計
- スペクトル視覚化に構築された効率的な抗体選択
記事：フローサイトメトリーパネル設計 – 基本
- フローサイトメトリーパネルを初めて設計する人に最適な読み物
- フローサイトメトリーパネルを設計する際に考慮すべき重要点をご覧ください
- 引用したパネル設計に関する重要な参考文献
ウェブ参考文献：最適化フローサイトメトリーマルチプレックスパネル
- 経験を問わず有用です
- 最適化マルチカラー免疫蛍光パネル（OMIP）の詳細をご覧ください
- 既存の公開されたフローサイトメトリーパネルを検索してください
- 公開されたパネルを活用すれば時間を節約できます
e-learning：マルチカラーフローサイトメトリーパネル設計の基本
- 初心者に最適、実施時間は 1 時間
- スタンフォード大学の Holden T. Maecker 博士は、良好なパネル設計に関する以下の注意事項について論じています。
- 例および実際の応用
- コントロールおよび標準化
- マスサイトメトリープラットフォームに対するパネル設計の適合性
Invitrogen LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stains を使用して死細胞や余計なアーティファクトを効率的に除去することにより、時間を節約し、細胞集団の分析が不正確になるのを防止します。
- 細胞の固定および透過処理は細胞死をもたらし、しばしば余計なアーチファクトの発生につながります
- 時間を節約し、細胞集団の分析が不正確になるのを防止してください。
- こうした死細胞やあらゆる余計なアーティファクトを効率的に除去してください
下記レーザー用の LIVE/DEAD キットをご覧ください。UV ＆ 405 nm レーザー | 488 ＆ 561 nm レーザー | 633／635 レーザー
UV ＆ 405 nm レーザー
| LIVE/DEAD Fixable Blue 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Violet 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Aqua 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Yellow 染色剤 | |
|---|---|---|---|---|
| アッセイの基本 | LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain キットは、細胞膜の統合性および利用可能なアミンの利用に基づいて、死細胞から生細胞を識別する固定可能な生存率解析用色素です。次いで、細胞は元の細胞染色パターンを失わずに、細胞内抗原検出用に固定することができます。死細胞はフローサイトメトリーのリードアウトから簡単に除外されます。 | |||
| リードアウト | 死細胞は蛍光が強く、生細胞から識別されやすいため、最小限の蛍光で染色されます。 | |||
| レーザー（nm） | UV | 405 | 405 | 405 |
| Ex／Em（nm） | 350／450 | 416／451 | 367／526 | 400／575 |
| 文献目録 |
引用文献
| |||
| マルチプレックス利用 |
あり
|
はい
|
はい
|
あり
|
| 色素適合性 | Indo-1（青色）、DAPI、Hoechst 33342 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | Pacific Blue 色素、CellTrace Violet 染色剤、FxCycle Violet 染色剤、BV421 または eFluor 450 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | Pacific Green 色素、F2N12S アポトーシスアッセイ, AmCyan またはB V510 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | Pacific Orange 色素、Qdot 605、F2N12S アポトーシスアッセイまたは BV605 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません |
| 固定可能 |
あり
|
はい
|
はい
|
あり
|
| サンプルのタイプ |
生細胞
| |||
| サイズ | 80 回分 | |||
| 製品番号 | ||||
488 ＆ 561 nmレーザー
| LIVE/DEAD Fixable Green 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Red 染色剤 | ||
|---|---|---|---|
| アッセイの基本 | LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain キットは、細胞膜の統合性および利用可能なアミンの利用に基づいて、死細胞から生細胞を識別する固定可能な生存率解析用色素です。次いで、細胞は元の細胞染色パターンを失わずに、細胞内抗原検出用に固定することができます。死細胞はフローサイトメトリーのリードアウトから簡単に除外されます。 | ||
| リードアウト | 死細胞は蛍光が強く、生細胞から識別されやすいため、最小限の蛍光で染色されます。 | ||
| レーザー（nm） | 488 | 488 | 561 |
| Ex／Em（nm） | 495／520 | 595／615 | |
| 文献目録 |
引用文献
| ||
| マルチプレックス利用 |
あり
|
あり
| |
| 色素適合性 | FITC、Alexa Fluor 488、GFP または CellTrace CSFE 染色剤などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | R-PE、ヨウ化プロピジウム、SYTOX AADvanced 染色剤、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610 および PE-Texas Red タンデムなどの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | |
| 固定可能 |
あり
|
あり
| |
| サンプルのタイプ |
生細胞
| ||
| サイズ | 80 回分 | ||
| 製品番号 | |||
633／635 nmレーザー
| LIVE/DEAD Fixable Far Red 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Near-IR 染色剤 | |
|---|---|---|
| アッセイの基本 | LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain キットは、細胞膜の統合性および利用可能なアミンの利用に基づいて、死細胞から生細胞を識別する固定可能な生存率解析用色素です。次いで、細胞は元の細胞染色パターンを失わずに、細胞内抗原検出用に固定することができます。死細胞はフローサイトメトリーのリードアウトから簡単に除外されます。 | |
| リードアウト | 死細胞は蛍光が強く、生細胞から識別されやすいため、最小限の蛍光で染色されます。 | |
| レーザー（nm） | 633／635 | 633／635 |
| Ex／Em（nm） | 650／665 | 750／775 |
| 文献目録 |
引用文献
| |
| マルチプレックス利用 |
あり
|
あり
|
| 色素適合性 | APC、Alexa Fluor 647 色素、FxCycle Far Red および CellTrace Far Red 染色剤などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7 または Vybrant DyeCycle Ruby 染色剤などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません |
| 固定可能 |
あり
|
あり
|
| サンプルのタイプ |
生細胞
| |
| サイズ | 80 回分 | |
| 製品番号 |
L34973
|
L34975
|
フローサイトメトリー用に細胞内標的を染色する場合は、しばしば重複する蛍光放射スペクトルを持つ複数の抗体の使用を必要とします。測定する蛍光シグナルが目的の蛍光色素、すなわち目的の細胞集団に起因することを確実にするため、放射スピルオーバーを適切に補正しなければなりません。
- 実験上の抗体補正コントロールを適切かつ簡単に設定して時間を節約してください
- 抗体補正コントロールの設定に必要なことは、1 本のバイアルに1滴を滴下するだけです
抗体補正のための eBeads マイクロスフェアについて詳しく知る
| UltraComp eBeads | |
|---|---|
| 用途 | ビーズは、蛍光標識抗体を用いる免疫表現型分類実験での色素の補正用に設計されており、単色補正コントロールとしての使用を目的に、個々の蛍光色素結合抗体で染色することができます。 |
| 反応性 | ハムスター、マウスおよびラットの抗体、ならびに κ 鎖および λ 鎖の認識 |
| フォーマット | 1 本のバイアルに 1 滴を滴下するだけ |
| ほぼ標準的なレーザーである UV ～ 633 nm に適合 | |
| サイズ | 25 回分 |
| 製品番号 | 01-2222-41 |
当社の効率的アプローチを用いて時間とエネルギーを節約することにより、必要とする抗体が迅速かつ容易に見つかります。
フローサイトメトリー用に細胞内染色を行う場合、固定および透過処理用のバッファーの選択は、データの品質および正確さに大きな影響を与えます。フローサイトメトリー用に細胞内可溶質のタンパク質、核タンパク質および分泌タンパク質を染色するための最適化したソリューションを提供しています。
- 固定および透過処理用のバッファーは、データの品質および正確度に大きな影響を与えます
- 最適化された染色用バッファーを使用して、ご自分で差異を調べてください
細胞質染色
| eBioscience Intracellular Fixation & Permeabilization Buffer Set | FIX & PERM Cell Fixation & Cell Permeabilization Kit | |
|---|---|---|
| 用途 |
IC Fix & Perm buffer set の詳細を見る |
|
| 内容 |
|
|
| サイズ | 1 キット | 50 回分 |
| 製品番号 | 88-8824-00 | GAS003 |
| 規制状況 | RUO–研究目的の使用に限定。診断目的の用途には使用禁止。 | 汎用試薬。 |
| 適用 | 研究目的の使用に限定（すなわち、任意のサンプルタイプの研究）。 | 診断目的で人体から検体を採取、調整、および検査するために使用される一般的な研究用途に使用。 |
核染色
| eBioscience Foxp3 / Transcription Factor Staining Buffer Set | |
|---|---|
| 用途 |
|
| 内容 |
|
| サイズ | 1 キット |
| 製品番号 | 00-5523-00 |
ウェブツール：フローサイトメトリー用パネルビルダー
- フローサイトメトリーパネルを設計する方に最適
- 簡素化された、カスタム可能なパネル設計
- スペクトル視覚化に構築された効率的な抗体選択
記事：フローサイトメトリーパネル設計 – 基本
- フローサイトメトリーパネルを初めて設計する人に最適な読み物
- フローサイトメトリーパネルを設計する際に考慮すべき重要点をご覧ください
- 引用したパネル設計に関する重要な参考文献
ウェブ参考文献：最適化フローサイトメトリーマルチプレックスパネル
- 経験を問わず有用です
- 最適化マルチカラー免疫蛍光パネル（OMIP）の詳細をご覧ください
- 既存の公開されたフローサイトメトリーパネルを検索してください
- 公開されたパネルを活用すれば時間を節約できます
e-learning：マルチカラーフローサイトメトリーパネル設計の基本
- 初心者に最適、実施時間は 1 時間
- スタンフォード大学の Holden T. Maecker 博士は、良好なパネル設計に関する以下の注意事項について論じています。
- 例および実際の応用
- コントロールおよび標準化
- マスサイトメトリープラットフォームに対するパネル設計の適合性
Invitrogen LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stains を使用して死細胞や余計なアーティファクトを効率的に除去することにより、時間を節約し、細胞集団の分析が不正確になるのを防止します。
- 細胞の固定および透過処理は細胞死をもたらし、しばしば余計なアーチファクトの発生につながります
- 時間を節約し、細胞集団の分析が不正確になるのを防止してください。
- こうした死細胞やあらゆる余計なアーティファクトを効率的に除去してください
下記レーザー用の LIVE/DEAD キットをご覧ください。UV ＆ 405 nm レーザー | 488 ＆ 561 nm レーザー | 633／635 レーザー
UV ＆ 405 nm レーザー
| LIVE/DEAD Fixable Blue 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Violet 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Aqua 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Yellow 染色剤 | |
|---|---|---|---|---|
| アッセイの基本 | LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain キットは、細胞膜の統合性および利用可能なアミンの利用に基づいて、死細胞から生細胞を識別する固定可能な生存率解析用色素です。次いで、細胞は元の細胞染色パターンを失わずに、細胞内抗原検出用に固定することができます。死細胞はフローサイトメトリーのリードアウトから簡単に除外されます。 | |||
| リードアウト | 死細胞は蛍光が強く、生細胞から識別されやすいため、最小限の蛍光で染色されます。 | |||
| レーザー（nm） | UV | 405 | 405 | 405 |
| Ex／Em（nm） | 350／450 | 416／451 | 367／526 | 400／575 |
| 文献目録 |
引用文献
| |||
| マルチプレックス利用 |
あり
|
はい
|
はい
|
あり
|
| 色素適合性 | Indo-1（青色）、DAPI、Hoechst 33342 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | Pacific Blue 色素、CellTrace Violet 染色剤、FxCycle Violet 染色剤、BV421 または eFluor 450 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | Pacific Green 色素、F2N12S アポトーシスアッセイ, AmCyan またはB V510 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | Pacific Orange 色素、Qdot 605、F2N12S アポトーシスアッセイまたは BV605 などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません |
| 固定可能 |
あり
|
はい
|
はい
|
あり
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| サンプルのタイプ |
生細胞
| |||
| サイズ | 80 回分 | |||
| 製品番号 | ||||
488 ＆ 561 nmレーザー
| LIVE/DEAD Fixable Green 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Red 染色剤 | ||
|---|---|---|---|
| アッセイの基本 | LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain キットは、細胞膜の統合性および利用可能なアミンの利用に基づいて、死細胞から生細胞を識別する固定可能な生存率解析用色素です。次いで、細胞は元の細胞染色パターンを失わずに、細胞内抗原検出用に固定することができます。死細胞はフローサイトメトリーのリードアウトから簡単に除外されます。 | ||
| リードアウト | 死細胞は蛍光が強く、生細胞から識別されやすいため、最小限の蛍光で染色されます。 | ||
| レーザー（nm） | 488 | 488 | 561 |
| Ex／Em（nm） | 495／520 | 595／615 | |
| 文献目録 |
引用文献
| ||
| マルチプレックス利用 |
あり
|
あり
| |
| 色素適合性 | FITC、Alexa Fluor 488、GFP または CellTrace CSFE 染色剤などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | R-PE、ヨウ化プロピジウム、SYTOX AADvanced 染色剤、7-AAD、PE-Alexa Fluor 610 および PE-Texas Red タンデムなどの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | |
| 固定可能 |
あり
|
あり
| |
| サンプルのタイプ |
生細胞
| ||
| サイズ | 80 回分 | ||
| 製品番号 | |||
633／635 nmレーザー
| LIVE/DEAD Fixable Far Red 染色剤 | LIVE/DEAD Fixable Near-IR 染色剤 | |
|---|---|---|
| アッセイの基本 | LIVE/DEAD Fixable Dead Cell Stain キットは、細胞膜の統合性および利用可能なアミンの利用に基づいて、死細胞から生細胞を識別する固定可能な生存率解析用色素です。次いで、細胞は元の細胞染色パターンを失わずに、細胞内抗原検出用に固定することができます。死細胞はフローサイトメトリーのリードアウトから簡単に除外されます。 | |
| リードアウト | 死細胞は蛍光が強く、生細胞から識別されやすいため、最小限の蛍光で染色されます。 | |
| レーザー（nm） | 633／635 | 633／635 |
| Ex／Em（nm） | 650／665 | 750／775 |
| 文献目録 |
引用文献
| |
| マルチプレックス利用 |
あり
|
あり
|
| 色素適合性 | APC、Alexa Fluor 647 色素、FxCycle Far Red および CellTrace Far Red 染色剤などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません | APC-Alexa Fluor 750、APC-Cy7 または Vybrant DyeCycle Ruby 染色剤などの Invitrogen 製品群と組み合わせて使用することはできません |
| 固定可能 |
あり
|
あり
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| サンプルのタイプ |
生細胞
| |
| サイズ | 80 回分 | |
| 製品番号 |
L34973
|
L34975
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フローサイトメトリー用に細胞内標的を染色する場合は、しばしば重複する蛍光放射スペクトルを持つ複数の抗体の使用を必要とします。測定する蛍光シグナルが目的の蛍光色素、すなわち目的の細胞集団に起因することを確実にするため、放射スピルオーバーを適切に補正しなければなりません。
- 実験上の抗体補正コントロールを適切かつ簡単に設定して時間を節約してください
- 抗体補正コントロールの設定に必要なことは、1 本のバイアルに1滴を滴下するだけです
抗体補正のための eBeads マイクロスフェアについて詳しく知る
| UltraComp eBeads | |
|---|---|
| 用途 | ビーズは、蛍光標識抗体を用いる免疫表現型分類実験での色素の補正用に設計されており、単色補正コントロールとしての使用を目的に、個々の蛍光色素結合抗体で染色することができます。 |
| 反応性 | ハムスター、マウスおよびラットの抗体、ならびに κ 鎖および λ 鎖の認識 |
| フォーマット | 1 本のバイアルに 1 滴を滴下するだけ |
| ほぼ標準的なレーザーである UV ～ 633 nm に適合 | |
| サイズ | 25 回分 |
| 製品番号 | 01-2222-41 |
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Resources
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