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L-グルタミン＆GlutaMAX細胞培養サプリメント 
L-グルタミンは細胞培養に必須のアミノ酸添加物です
L-グルタミンは、哺乳類細胞培養培地に一般的に添加されるアミノ酸サプリメントです。L-グルタミンは、特に細胞が急速に分裂しているときに補助的なエネルギー源として機能し、また、タンパク質や核酸などの合成のための窒素源として細胞に使用されます。
細胞培養培地などの水溶液では、L-グルタミンは、細胞にとって毒性のあるアンモニアに分解されます。この影響を最小限に抑えるために、低濃度のL-グルタミンを培養に継続的に供給するフィードバッチ戦略を採用するか、溶液中でより安定であるように設計されたGibco GlutaMAXサプリメントなどのL-グルタミン代替製剤を使用できます。
細胞培養用L-グルタミン
L-グルタミンは、エネルギー生産だけでなく、タンパク質合成や核酸合成のための、細胞培養に不可欠な栄養素です。当社は、このアミノ酸培地サプリメントを液体および粉末の両方の形で提供しています。粉末グルタミンはUSPグレードの化学薬品として提供され、液体組成はすぐに使用できる200 mMストック溶液として提供されます。
GlutaMAXサプリメントは細胞をより長く健康な状態に保ちます
L-グルタミンは細胞培養に欠かせない栄養素ですが、細胞培養培地で自然に分解され、副産物としてアンモニアやピロリジンカルボン酸が生成されます。Gibco GlutaMAXサプリメントは、細胞培養培地でL-グルタミンの直接の代替品として使用できるように改良された細胞培養サプリメントです。
GlutaMAXサプリメントはL-アラニン-L-グルタミンジペプチドであるため、水溶液中での安定性が高く、自然に分解することがありません。
さまざまな組成からお選びいただけます
当社は、L-グルタミンの代わりにGlutaMAXジペプチドを使用した多数の製剤を提供しています。オプションにはDMEM、MEM、RPMI、Opti-MEM、およびその他の基礎培地があります。
GlutaMAXサプリメントはスタンドアロンサプリメントとしても提供されています。現在の細胞培養培地組成で、等モル濃度でL-グルタミンの直接的な代替として200 mM溶液GlutaMAXサプリメントをご使用ください。GlutaMAXサプリメントは室温で安定しており、凍結融解サイクルを回避できるため、頻繁な液体処理ステップによる培養のコンタミリスクを軽減します。
Gibco GlutaMAX培地および培地サプリメントは、接着性および浮遊性両方の哺乳類細胞培養に適しており、順応の必要はほぼありません。
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GlutaMAXサプリメント vs L-グルタミン
GlutaMAXサプリメントで細胞培養を最大限に活用
GlutaMAXサプリメントはどのように機能するか？
ジペプチド利用のメカニズムは、培養中にペプチダーゼが徐々に放出され、培地中のジペプチドが徐々に加水分解されます（図1）。これは、L-グルタミンが継続的に培養液に供給されるが、低濃度で維持されるというフィードバッチ培養の戦略に匹敵します。結果として、効率的なエネルギー代謝と高い成長率を実現します。
図1.培養における培地から細胞へのL-グルタミンの制御された送達。
GlutaMAXサプリメントを含有する培地で細胞を培養すると、細胞はジペプチドを加水分解するアミノペプチダーゼを徐々に放出し、L-アラニンとL-グルタミンが培地中にゆっくりと放出されます。その後、 L-グルタミンとL-アラニンは細胞に取り込まれ、タンパク質産生またはTCAサイクルで利用されます。これは、 L-グルタミンが継続的に培養に供給され、低濃度で維持されるフィードバッチ培養戦略に匹敵します。その結果として、アンモニアを余分に蓄積することなく、効率的なエネルギー代謝と高い成長率を実現します。
図2.GlutaMAX培地で培養したヒト間葉幹細胞。DAPI核染色、およびInvitrogen Alexa Fluor 488二次抗体に結合したCD105一次抗体で染色。
図3. 脂肪細胞分化条件下でGlutaMAX培地で培養したヒト間葉幹細胞。Hoechst 33342核染色、 Invitrogen LipidTOX Green中性脂肪、およびInvitrogen MitoTracker Redで染色。
GlutaMAXサプリメントはどのようにして細胞培養を改善させるか？
細胞培養でL-グルタミンの代わりにGlutaMAXサプリメントを使用することで、細胞の生存率と増殖を改善し、潜在的に生産性レベルを向上させることが可能です。
結果は、使用する細胞株によって異なる場合があります。アプリケーション特異的な例として、図4および5はAE1細胞の増殖曲線および組換えIgG1産生を示しています。GlutaMAXサプリメントによる培養は細胞数と生産性の向上を実証しています。
GlutaMAXサプリメントは細胞培養の寿命を延ばすことができ、細胞を継代しなければならない回数を低減し、時間とコストを節約できます。
図6は、 10%FBSと、L-グルタミンまたはGlutaMAXサプリメントを含有するD-MEMで培養したMDBK細胞を比較しています。GlutaMAXサプリメントで培養した細胞は、 L-グルタミンの添加で培養した細胞よりも2日遅くピーク密度に達し、 生存率は穏やかに低下します。誘導期のわずかな増加は、ペプチダーゼを放出してジペプチドを消化するのに必要な時間に起因します。
これにより、 細胞が利用できるL-グルタミン量が徐々に増加します。（Appl Biochem Biotechnol 30:29 (1991)).
図4.細胞増殖。AE-1マウス骨髄腫細胞を1x105細胞／mLで播種しました。3日後からサンプルを毎日採取し、細胞密度を3回評価しました。細胞生存率はトリパンブルー色素排除法により測定しました。細胞密度は、GlutaMAXを含有するサンプルではL-グルタミンを含有するサンプルの細胞密度が低下した後も増加し続けました。
図5.IgG1産生。図4のサンプルもまた、ELISAによりIgGIgG1産生を測定しました。GlutaMAXサプリメントを含有するサンプルは、L-グルタミンを含有するサンプルよりも優れていました。
図6.MDBK細胞を、10%FBSおよびL-グルタミンまたはGlutaMAXサプリメントを含有するD-MEMに、約 1x105 細胞／フラスコで25 cm2 Tフラスコに播種しました。
L-グルタミンは細胞培養でどのように使用されますか？
L-グルタミンは、細胞培養培地の組成に必要な必須アミノ酸です。L-グルタミンは、プリンおよびピリミジンヌクレオチド、アミノ糖、グルタチオン、 L-グルタミン酸、およびその他のアミノ酸の形成に加え、タンパク質合成およびグルコース産生にも関与しています。他のほとんどのアミノ酸とは異なり、L-グルタミンは溶液中で安定ではありません。分解が進行する速度は、時間、温度、およびpHにより変化します。当社は、L- グルタミンのより安定した代替品としてGibco GlutaMAX supplementを提供しています。
L-グルタミンをどのように解凍すればよいですか？
L-グルタミンが濃縮ストック溶液の場合、冷却すると沈殿しやすくなります。65}℃ウォーターバスで穏やかに撹拌しながら軽く温めると、沈殿物が溶解します。沈殿物が完全に溶解するまでは、製品を使用しないでください。
L-グルタミンの有効期間はどれくらいですか？
製造日から24ヵ月です
L-グルタミンはどのくらいの量を培地に添加するべきですか？
Gibco L-glutamineは細胞培養サプリメントとして機能する、すぐに使用可能な200 mMストック溶液として提供されます。至適濃度は、細胞の培養に使用する細胞の種類や培地により異なりますが、通常は2～6 mMの範囲です。
L-グルタミンとGlutaMAXの違いは何ですか？
L-グルタミンは、エネルギー産生だけでなく、タンパク質合成や核酸合成にも欠かせない、細胞培養における不可欠な栄養素です。しかし、細胞培養培地中のL-グルタミンは自然分解し、副産物としてアンモニアおよびピロリジンカルボン酸を生成します。
GlutaMAXサプリメントはL-アラニンL-グルタミンジペプチドで、水溶液中でより安定しており、自然に分解することはありません。Gibco GlutaMAX培地およびGlutaMAXサプリメントを添加した培地は、接着性および浮遊性の哺乳類細胞培養の両方に適しており、順応の必要はほぼありません。
GlutaMAXサプリメントはどのように機能するか？
ジペプチド利用のメカニズムは、培養中にペプチダーゼが徐々に放出され、培地中のジペプチドが徐々に加水分解されます（図1）。これは、L-グルタミンが継続的に培養液に供給されるが、低濃度で維持されるというフィードバッチ培養の戦略に匹敵します。結果として、効率的なエネルギー代謝と高い成長率を実現します。
図1.培養における培地から細胞へのL-グルタミンの制御された送達。
GlutaMAXサプリメントを含有する培地で細胞を培養すると、細胞はジペプチドを加水分解するアミノペプチダーゼを徐々に放出し、L-アラニンとL-グルタミンが培地中にゆっくりと放出されます。その後、 L-グルタミンとL-アラニンは細胞に取り込まれ、タンパク質産生またはTCAサイクルで利用されます。これは、 L-グルタミンが継続的に培養に供給され、低濃度で維持されるフィードバッチ培養戦略に匹敵します。その結果として、アンモニアを余分に蓄積することなく、効率的なエネルギー代謝と高い成長率を実現します。
図2.GlutaMAX培地で培養したヒト間葉幹細胞。DAPI核染色、およびInvitrogen Alexa Fluor 488二次抗体に結合したCD105一次抗体で染色。
図3. 脂肪細胞分化条件下でGlutaMAX培地で培養したヒト間葉幹細胞。Hoechst 33342核染色、 Invitrogen LipidTOX Green中性脂肪、およびInvitrogen MitoTracker Redで染色。
GlutaMAXサプリメントはどのようにして細胞培養を改善させるか？
細胞培養でL-グルタミンの代わりにGlutaMAXサプリメントを使用することで、細胞の生存率と増殖を改善し、潜在的に生産性レベルを向上させることが可能です。
結果は、使用する細胞株によって異なる場合があります。アプリケーション特異的な例として、図4および5はAE1細胞の増殖曲線および組換えIgG1産生を示しています。GlutaMAXサプリメントによる培養は細胞数と生産性の向上を実証しています。
GlutaMAXサプリメントは細胞培養の寿命を延ばすことができ、細胞を継代しなければならない回数を低減し、時間とコストを節約できます。
図6は、 10%FBSと、L-グルタミンまたはGlutaMAXサプリメントを含有するD-MEMで培養したMDBK細胞を比較しています。GlutaMAXサプリメントで培養した細胞は、 L-グルタミンの添加で培養した細胞よりも2日遅くピーク密度に達し、 生存率は穏やかに低下します。誘導期のわずかな増加は、ペプチダーゼを放出してジペプチドを消化するのに必要な時間に起因します。
これにより、 細胞が利用できるL-グルタミン量が徐々に増加します。（Appl Biochem Biotechnol 30:29 (1991)).
図4.細胞増殖。AE-1マウス骨髄腫細胞を1x105細胞／mLで播種しました。3日後からサンプルを毎日採取し、細胞密度を3回評価しました。細胞生存率はトリパンブルー色素排除法により測定しました。細胞密度は、GlutaMAXを含有するサンプルではL-グルタミンを含有するサンプルの細胞密度が低下した後も増加し続けました。
図5.IgG1産生。図4のサンプルもまた、ELISAによりIgGIgG1産生を測定しました。GlutaMAXサプリメントを含有するサンプルは、L-グルタミンを含有するサンプルよりも優れていました。
図6.MDBK細胞を、10%FBSおよびL-グルタミンまたはGlutaMAXサプリメントを含有するD-MEMに、約 1x105 細胞／フラスコで25 cm2 Tフラスコに播種しました。
L-グルタミンは細胞培養でどのように使用されますか？
L-グルタミンは、細胞培養培地の組成に必要な必須アミノ酸です。L-グルタミンは、プリンおよびピリミジンヌクレオチド、アミノ糖、グルタチオン、 L-グルタミン酸、およびその他のアミノ酸の形成に加え、タンパク質合成およびグルコース産生にも関与しています。他のほとんどのアミノ酸とは異なり、L-グルタミンは溶液中で安定ではありません。分解が進行する速度は、時間、温度、およびpHにより変化します。当社は、L- グルタミンのより安定した代替品としてGibco GlutaMAX supplementを提供しています。
L-グルタミンをどのように解凍すればよいですか？
L-グルタミンが濃縮ストック溶液の場合、冷却すると沈殿しやすくなります。65}℃ウォーターバスで穏やかに撹拌しながら軽く温めると、沈殿物が溶解します。沈殿物が完全に溶解するまでは、製品を使用しないでください。
L-グルタミンの有効期間はどれくらいですか？
製造日から24ヵ月です
L-グルタミンはどのくらいの量を培地に添加するべきですか？
Gibco L-glutamineは細胞培養サプリメントとして機能する、すぐに使用可能な200 mMストック溶液として提供されます。至適濃度は、細胞の培養に使用する細胞の種類や培地により異なりますが、通常は2～6 mMの範囲です。
L-グルタミンとGlutaMAXの違いは何ですか？
L-グルタミンは、エネルギー産生だけでなく、タンパク質合成や核酸合成にも欠かせない、細胞培養における不可欠な栄養素です。しかし、細胞培養培地中のL-グルタミンは自然分解し、副産物としてアンモニアおよびピロリジンカルボン酸を生成します。
GlutaMAXサプリメントはL-アラニンL-グルタミンジペプチドで、水溶液中でより安定しており、自然に分解することはありません。Gibco GlutaMAX培地およびGlutaMAXサプリメントを添加した培地は、接着性および浮遊性の哺乳類細胞培養の両方に適しており、順応の必要はほぼありません。
GMP manufacturing
Gibco cell culture products are manufactured in facilities that are compliant with current good manufacturing practices (GMP) for medical devices and adheres to a robust quality management system.
Sustainable solutions
We are committed to delivering products that serve the research needs of our customers, while striving to develop them in a way that minimizes our use of natural resources and our impact on the environment.
リソース
細胞培養＆トランスフェクションラーニングセンター
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Media Formulation Tool
FiDMEM、DMEM/F-12、MEM および RPMI-1640培地に対して、適切な Gibco 培地組成を見つけることができます。
関連製品
サポート
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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.