검증된 positive/negative control

고품질의 control을 사용하는 것은 CRISPR-Cas9 실험의 성공적으로 개발할 뿐 아니라 high-thoughput의 CRISPR-Cas9 스크리닝 과정에서도 성능을 좌우하는 중요한 역할을 합니다. Thermo Fisher Scientific은 전달 조건을 최적화하고, 편집 효율을 극대화하며, hit 선택 기준을 설정하는 데 도움을 주도록 검증된 양성 및 음성 control에 대한 완벽한 솔루션을 제공합니다. 이러한 control은 개선된 signal to noise 비율로 견고한assay를 구축하는 데 도움을 줍니다.

Gloved hand holding a 96-well plate with colorful samples

CRISPR control 정보

Control 유형설명권장 용도 
CRISPR positive control 

실험 설계에 사용되는 CRISPR 시약의 유전자 편집 효율을 모니터링하려면 CRISPR positive control이 필요합니다. Positive control은 여러 세포 유형에서 높은 편집 효율이 입증된 검증된 gRNA 염기서열입니다. Thermo Fisher Scientific에서 제공하는 positive control 일부는 여러 세포 유형에서 최대 90%의 편집 효율을 제공합니다.

개별의 LentiArray 및 TrueGuide gRNA를 사용할 수 있습니다. 

Positive control은 세포 모델에서 최대의 편집 효율을 제공하는 조건을 판단하기 위한 assay 개발 과정에서 사용됩니다. 

특정 유전자에 대한 개별 gRNA는 assay 개발을 위한 생물학적 control 역할을 할 수 있고, 스크리닝 수행 시 on-plate positive control 역할을 할 수도 있습니다.

 

주문
CRISPR negative control CRISPR negative control은 관찰된 표현형이 목적한 유전자 변형의 결과이며, 비특이적으로 유도된 결과가 아님을 보여주기 위해 필요합니다. Negative control은 인간 유전체의 어떠한 염기서열도 인식하지 못하는 non-targeting control gRNA 염기서열입니다.
Thermo Fisher Scientific에서 제공하는 non-targeting control gRNA negative control은 스크리닝 분석 수행 과정 뿐 아니라 assay 개발 및 on-plate control 모두에서 사용할 수 있도록 다양한 용량으로 제공됩니다.
주문
CRISPR 전달 최적화 control형질 주입이 성공했는지 확인하기 위해 CRISPR 전달 효율을 확인할 수 있도록 최적화된 control이 필요합니다. Thermo Fisher Scientific은 LentiArray CRISPR 라이브러리를 이용하는 경우, GFP를 발현하는 positive/negative control 중 하나로 사용할 수 있는 일련의 control Lentivirus를 제공합니다. 
GFP 마커는 시각적 측정치를 제공하여 바이러스 전달 조건의 빠른 최적화를 지원합니다.
주문


데이터: GFP control을 사용한 assay 설계 최적화

다음 실험에서는 HT1080 세포를 LentiArray CRISPR control Lenttivirus, 인간 HPRT 및 GFP로 감염시켰습니다. 이 기법은 형질 도입 효율의 시각 측정치를 제공하고 사용되는 세포 주의 multiplicity of infection (MOI)를 판단하는 데 도움을 줍니다. 이 예에서는 녹색의 형광 단백질(GFP) 활성화 control을 사용하여 형질 도입 및 assay 설계를 최적화하는 방법을 설명합니다.

GFP를 발현하는 세포의 현미경 이미지 2개 (1개는 CRISPR positive control, 1개는 CRISPR negative control)

그림 1. LentiArray CRISPR positive control Lentivirus, 인간 HPRT 및 GFP로 감염된 HT1080 세포 

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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.