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RNA电泳是一种常用的实验室技术,可鉴定、定量和纯化核酸片段以及评估质量。RNA 分子带负电,在凝胶电泳期间向正极移动,RNA电泳分为非变性RNA 电泳和变性RNA 电泳。
RNA 的长度通常决定了其在凝胶中的迁移,长RNA片段比短片段移动更慢。然而,RNA 分子通过分子内碱基配对而具有广泛的二级结构,这可能影响其凝胶迁移。对于大多数应用,使用变性条件进行RNA 电泳来破坏二级结构。对于分辨RNA 不同构象的应用,建议使用天然(或非变性)凝胶。
非变性条件下的RNA凝胶电泳保留了RNA 分子的二级结构。琼脂糖通常优于丙烯酰胺,因为其毒性较低,并且在可分离典型RNA 分子的浓度下更易于处理。我们为非变性琼脂糖凝胶电泳提供了便捷试剂,包括方便的预制E-Gel™ 琼脂糖凝胶和用于您自制凝胶的UltraPure™ 试剂。
非变性RNA 电泳产品:
为了准确测定RNA 片段的分子量,使用变性条件进行RNA 凝胶电泳是至关重要的。由于Northern 印迹通常是根据RNA 大小进行RNA 分子表征,因此通常在使用Northern 印迹进行RNA分析之前进行变性电泳。变性条件可破坏氢键,使RNA 作为单链分子电泳而不具有二级结构。变性试剂有很多选择,包括乙二醛、甲酰胺和甲基汞。这些化合物的缺点在于具有毒性,需谨慎处理。
传统上,甲醛被用作RNA 电泳的变性试剂。NorthernMax™ 试剂盒包含一套完整的无RNA 酶试剂,用于含甲醛琼脂糖凝胶电泳。这些凝胶必须在通风橱里操作。使用NorthernMax™-Gly 试剂盒,在电泳前需将RNA 样品置于乙二醛/DMSO 上样缓冲液中变性,随后在无甲醛的琼脂糖凝胶中电泳。
有多种RNA分子量标准可用于准确预估RNA 的分子量大小,包括Millennium™ 标记物。
仅供研究使用。不可用于人或动物的治疗或诊断。
仅供科研使用,不可用于诊断目的。