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フローサイトメトリーによるCAR T 細胞の特徴付け
養子免疫療法は、持続的抗癌治療のために免疫細胞を患者に移入する療法です。キメラ抗原受容体（CAR）細胞はある種の養子療法に使用されるもので、特定の抗原を発現する細胞を標的とするために遺伝子組み換え受容体コンストラクトを T 細胞で発現させます。CAR T 細胞は特定の B 細胞癌の腫瘍細胞を破壊し、固形腫瘍根絶を前進させます。
次世代 CAR 療法の研究はフローサイトメトリーにより迅速に進んでいます。T 細胞枯渇の検出および遺伝子転写物の検出のためのツールについて学びましょう。
どのようにワークするかCAR T 細胞は腫瘍細胞死を誘導します
CAR T 細胞フローサイトメトリーのワークフロー
CAR T 細胞の開発におけるフローサイトメトリーの用途
T 細胞活性化および増殖のモニタリング
T 細胞は特異的シグナルがないと増殖しません。Dynabeads 磁気ビーズおよび細胞ヘルスアッセイにより、細胞工学に用いる T 細胞の増殖および品質検査を行います。Dynabeads 磁気ビーズを用いて T 細胞を分離し、抗 CD3 および抗 CD28 抗体をロードしたDynaBeadsで活性化、増殖させます。これにより、T 細胞を刺激するためにフィーダー細胞の使用あるいは手動でサイトカインを添加する必要性がなくなります。次に、細胞増殖および生存率を検出できる色素を使用して T 細胞の増殖を追跡します。
CAR T 細胞の枯渇を調べます
遺伝子操作 CAR T 細胞を含む T 細胞は、腫瘍微小環境中で分泌される免疫抑制分子で阻害される可能性があります。分散後の腫瘍細胞のフローサイトメトリーをCAR T 細胞浸潤腫瘍切片の免疫組織化学分析で補います。細胞をカウントし、一般的な免疫抑制マーカーである IDO1、PD-L1、FoxP3、TDO、IL-10 および TGFβを含めサンプル中の複数のマーカーを調べます。