サーモフィッシャーサイエンティフィックは、お客様が必要とする純度およびスケールでプラスミドDNAを分離するように設計された幅広いプラスミドDNA抽出製品を提供しています。低回収率や不純物の存在など、プラスミド調製の一般的な問題の解決に役立つよう設計された、高性能で費用対効果の高い、当社の幅広いプラスミド精製技術から選択できます。当社のキットやプラスミド分離プロトコルの動画を使用して、プラスミドDNAを手動で精製する方法をご確認ください。

プラスミド精製とは?

プラスミド精製は、プラスミドの分離またはプラスミドDNAの分離としても知られ、細菌細胞からプラスミドDNAを抽出および精製するプロセスを指します。これにより、さらなる分析や実験のために、高濃度で高純度のプラスミドを取得できます。プラスミド精製における重要なステップには通常、細菌細胞の溶解、細胞破片の除去、プラスミドDNAの結合、洗浄、プラスミドDNAの溶出、およびダウンストリームアプリケーションに応じたオプションの追加ステップなどが含まれます。


プラスミドDNA分離の調製サイズ

 MiniprepMidiprepMaxiprepMegaprepGigaprep
オーバーナイト細菌培養液の量1~5 mL25~100 mL100~500 mL500 mL~2.5 L2.5~5 L
およその収量最大40 µg最大400 µg最大1.5 mg最大5 mg最大15 mg


プラスミドDNA分離の純度グレードおよびエンドトキシンレベル

プラスミド分離に関して、研究者のそれぞれのニーズに応じてさまざまなオプションをご用意しています。分子グレードのプラスミド分離技術はスピードと費用対効果を提供し、高純度のレベルが不要なクローニング、核酸標識、PCR、シーケンシングなどの堅牢なアプリケーションに最適です。一方、トランスフェクショングレードのプラスミド精製技術は、標準的な細胞株のトランスフェクションやin vitro転写などの、より高い純度と収量が必要なアプリケーション用に設計されています。トランスフェクショングレードのプラスミドDNAは、分子生物学アプリケーションにも使用できます。感受性細胞株のトランスフェクションやin vivo研究などのもっとも高感度のアプリケーションには、高度なトランスフェクショングレードのプラスミド分離技術が推奨されます。この技術は最高の純度を確保するのに役立ち、すべての分子およびトランスフェクショングレードアプリケーションにも使用できます。

純度グレード分子トランスフェクション高度なトランスフェクション
エンドトキシン濃度>10 EU/µg0.1~1 EU/µg<0.1 EU/µg

ダウンストリームのアプリケーションに必要な量および純度でプラスミドDNAを確実に精製することは、タンパク質発現ワークフローにおける重要なステップです。トランスフェクショングレードのプラスミドを回収し、これらをGibco ExpiCHOおよびExpi293哺乳類一過性発現系で使用する方法をご確認ください。


自動プラスミド精製のソリューション

自動プラスミド精製とは、高度なロボット工学、リキッドハンドリング機能、および特殊な磁気ビーズ精製キットを使用して、細菌培養からのプラスミドDNAの分離を合理化することを指します。これらのソリューションは複数のサンプルを同時に処理できるため、スループットの向上と手動処理時間の短縮に役立ちます。また、精製ステップと使用する試薬の量を正確に制御することで、人為的ミスを最小限に抑えて再現性を実現するのにも役立ちます。サーモフィッシャーは、革新的な技術を採用した自動プラスミド精製ソリューションを提供しています。このソリューションにより、トランスフェクショングレードのプラスミドDNAをハイスループットで、遠心分離機を使用することなく、最小限のハンズオンステップで精製できます。この精製pDNAは、高感受性細胞株へのトランスフェクション、ショートヘアピンベクターの調製、酵素修飾、分子クローニング、制限酵素消化、シーケンシング、 およびin vitro転写/翻訳などのさまざまなダウンストリームアプリケーションに使用できます。

 

Applied Biosystems MagMAX Pro HT NoSpin Plasmid Miniprep Kit

Thermo Scientific KingFisher Plasmid Pro

image of magmax pro ht no spin kitimage of plasmid pro instrument
利用可能な調製サイズMiniMaxi
純度グレード/エンドトキシン濃度トランスフェクショングレード
(0.1~1 EU/µg)
トランスフェクショングレード
(0.1~1 EU/µg)


トランスフェクショングレードのプラスミドDNA精製用キット

トランスフェクショングレードのプラスミド分離キットは、エンドトキシンを最小限の濃度に抑えながら細菌培養からプラスミドDNA(pDNA)を抽出する必要がある科学者向けに特別に設計されています。プラスミド精製プロセスでは、溶解した細菌から大量のエンドトキシンが放出されます。これは細胞増殖、細胞生存率、トランスフェクション効率、タンパク質発現に悪影響を及ぼし、また敗血症を模倣する可能性があります。これらの懸念に対処するため、エンドトキシンが低レベルのプラスミドDNA分離を実現するように設計された当社のキットは、これらのエンドトキシンを慎重に除去し、分離したプラスミドDNAの完全性を確保します。これらのキットは迅速かつ簡単なプラスミド精製方法を提供し、高感度のダウンストリームアプリケーションにおいて高純度と高収量を実現します。調製サイズの大小にかかわらず、当社のトランスフェクショングレードプラスミド分離キットはお客様の特有のニーズに合わせてカスタマイズされているため、お客様は信頼性と再現性のある結果を達成できます。 

 Invitrogen PureLink Fast Low-Endotoxin Purification KitsInvitrogen PureLink HiPure Plasmid KitsPureLink HiPure Plasmid Filter Kits
 productproductPureLink HiPure Plasmid Filter Midiprep Kit
利用可能な調製サイズMidiMaxiMiniMidiMaxiMegaGigaMidiMaxi
純度グレード/エンドトキシン濃度トランスフェクショングレード
(0.1~1 EU/µg)
トランスフェクショングレード
(0.1~1 EU/µg)
トランスフェクショングレード
(0.1~1 EU/µg)


高度トランスフェクショングレードのプラスミドDNA精製用キット

さらに高レベルのエンドトキシン除去を必要とする科学者に、高度トランスフェクショングレードのプラスミド分離キットを提供しています。これらのキットは標準的なトランスフェクショングレードキットより優れており、エンドトキシン除去レベルが向上しているため、分離したプラスミドDNAの最大限の純度を確保するのに役立ちます。当社の高度トランスフェクショングレードのプラスミド分離キットを使用すると、最高品質のpDNAを必要とするダウンストリームアプリケーションを確実に実施できます。これらのキットは、微量のエンドトキシンでも結果に大きな影響を与える可能性がある重要な実験で作業する研究者に最適です。当社の高度トランスフェクショングレードのプラスミド分離キットを使用することで、エンドトキシンに伴うリスクを排除し、お客様の科学研究に適した純粋なプラスミドDNAを得られます。

 Thermo Scientific GeneJET Endo-Free Plasmid Maxiprep KitInvitrogen PureLink Expi Endotoxin-Free Plasmid Purification Kits
 productproduct
利用可能な調製サイズMaxiMaxiMegaGiga
純度グレード/エンドトキシン濃度高度トランスフェクショングレード
(< 0.1 EU/µg)
高度トランスフェクショングレード
(< 0.1 EU/µg)


分子生物学グレードのプラスミド精製用キット

迅速で、容易で、信頼性の高いプラスミド精製を実現するために、当社のInvitrogen PureLinkおよびGeneJET分子グレードプラスミドDNA(pDNA)分離キットは、さまざまな標準的分子生物学アプリケーションに適合する、高純度ですぐに使用可能なプラスミドを生成します。分子生物学グレードキットは細菌および酵母細胞の形質転換に適していますが、エンドトキシンが存在しているため、感受性の高い哺乳類細胞のトランスフェクションには適していない場合があります。トランスフェクションアプリケーションについては、上記のトランスフェクショングレードのプラスミド精製キットをご覧ください。

 Invitrogen PureLink Pro Quick 96 Plasmid Purification KitInvitrogen PureLink Quick Plasmid Miniprep KitThermo Scientific GeneJET Plasmid Kits
 productproductproduct
利用可能な調製サイズ小規模の96ウェルプレートフォーマットMiniMiniMidiMaxi
純度グレード/エンドトキシン濃度分子グレード
(> 10 EU/µg)
分子グレード
(> 10 EU/µg)
分子グレード
(> 10 EU/µg)


プラスミド分離用の追加バッファー


プラスミド精製—How-toビデオ

PureLinkおよびGeneJetキットによるプラスミドDNAの抽出

エンドトキシンフリーのプラスミドDNAの精製方法

この動画で、PureLink Expi Endotoxin-Free Maxi Plasmid Purification Kitを使用してプラスミドDNAを精製する方法をご覧ください。この動画では、初代培養細胞のトランスフェクションなど、高感度アプリケーションに適したエンドトキシンフリーの高品質プラスミドDNAを分離および精製する方法をご紹介します。

分子生物学グレードのプラスミドDNAの精製方法

この動画では、当社のGeneJET Plasmid Miniprep Kitを使用して、分子生物学グレードのプラスミドDNAを15分で精製する方法をご紹介します。分子生物学グレードのプラスミドDNAは、クローニング、核酸標識、PCR、DNAシーケンシング、および形質転換に適しています。

当社のメガプレップキットによるプラスミドDNAの精製方法

Invitrogen PureLink HiPure Expi Plasmid Megaprep Kitを使用して、トランスフェクショングレードのプラスミドDNAをわずか90分で分離できます。これらのキットに含まれる革新的で独自の陰イオン交換樹脂は、大容量と高流量、高分解能、および効率性を兼ね備えています。

トランスフェクショングレードのプラスミドDNAの精製方法

Invitrogen PureLink HiPure Plasmid Filter Maxiprep Kitを使用して、トランスフェクショングレードのプラスミドDNAを精製する方法をご確認ください。トランスフェクショングレードのプラスミドDNAは、すべての分子生物学アプリケーションに加えて、in vitro転写およびトランスフェクションに適しています。

Resources
  • Protocol Videos—Videos to help you isolate nucleic acids using a variety of techniques.
  • DNA & RNA Selection Guide—Find the right purification products.
  • Videos—View our library of DNA & RNA purification and analysis videos.
  • Application Notes—Explore our application notes from scientists sharing data for isolation products
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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

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