逆転写ポリメラーゼ連鎖反応（RT-PCR）は、逆転写酵素を介してRNAをcDNAに変換し、それをDNAポリメラーゼで複製するプロセスです。逆転写から良好な結果を得るには、十分な量の開始RNAがあり、インタクトで、ゲノムDNAフリーである必要があります。

リアルタイムPCRは定量的PCRまたはqPCRとも呼ばれ、DNAや相補的DNA（cDNA）などの、PCRテンプレートのコピー数を定量化します。qPCR向けRNA抽出用Invitrogenキットおよび試薬は、RT-PCR反応に必要なRNAの品質と量を提供するように設計されています

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選択ガイド：RT-PCRおよびqPCR用のRNA抽出キット

 高純度でインタクトなRNAのゴールドスタンダード20分未満で高品質のRNAを取得RNAおよびDNAのハイスループット精製qRT-PCR結果を得るための完全な精製不要システム
対応可能なPCRタイプ逆転写PCRおよびダウンストリームアプリケーション逆転写PCRおよびダウンストリームアプリケーション逆転写PCRおよびダウンストリームアプリケーションそのままqPCRへ
試薬／キットTRIzol試薬PureLinkキットMagMAXキットCells-to-CTキット
利点もっとも多く引用され、経済的迅速で便利拡張可能で柔軟合理的で、qRT-PCRに最適
分離方法有機溶媒試薬シリカフィルター、カラム、またはプレートフォーマット磁気ビーズ（拡張性、柔軟性）化学溶解
ハイスループット対応不可不可可可
RT試薬を含む無し無し不可あり
qPCR試薬を含む無し無し不可あり
調製時間約1時間< 20分約45分10分
適合するサンプルタイプ溶解が困難なタイプを含む、ほとんどのサンプルタイプ細胞および組織細胞、血液、植物、組織細胞
開始物質の量100 mgの組織、または107の細胞（1 mLの試薬が必要） 200 mgまでの組織、または5 x 106 ～1 x 108 の細胞100 mgまでの組織、または5 x 106までの細胞1～103の細胞

 

qPCR前のRNAサンプル精製：DNA除去

RNAサンプルはqPCRの前に精製する必要があります。ゲノムDNA汚染は、偽陽性のRT-PCR結果につながる可能性があります。サーモフィッシャーサイエンティフィックは、RNA調製物に存在する可能性のあるゲノムDNAの除去に使用できるDNasesを多数提供しています。

DNA-free DNase処理および除去キットは、RNAサンプルから汚染DNAを除去し、プロテイナーゼK処理や有機抽出を使用することなくDNaseを除去するために必要なすべてのものを含んでいます。

TURBO DNase酵素キットは、野生型ウシDNaseから編集した高活性酵素を含んでいます。TURBO DNaseは非常に低濃度のDNA結合において高い効果を示すことから、この酵素は微量のDNA混入を除去するのに特に有効です。

リソース

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.

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