Search Thermo Fisher Scientific
Search Thermo Fisher Scientific
細胞膜はタンパク質が埋め込まれたリン脂質二重層で構成され、正味の負電荷を帯びています。したがって、細胞膜は DNA や RNA のリン酸骨格のような負に帯電している大きい分子を通過させなための浸透可能なバリアとして存在します。核酸の細胞膜通過を可能にするために、核酸を化学物質とキャリア分子でコーティングして中和する方法から、DNA を直接細胞に導入するために細胞膜に一時的な細孔を作る物理的方法まで、それぞれ異なるアプローチを用いた多くの技術が開発されてきました。
現在利用可能なトランスフェクション技術は、大きく3つのグループに分けられます。すなわち、化学的、生物学的、物理的技術です。すべての細胞、すべての実験に1つの方法を適用することはできません。理想的なアプローチは細胞の種類と実験のニーズに応じて選択する必要があり、トランスフェクション効率が高く、細胞毒性が低く、正常な生理機能への影響が最小限で、使いやすく、再現性が高い必要があります (Kim and Eberwine, 2010)。
キャリア分子を使用して負に帯電した核酸を中和、または正電荷を付与するために化学的方法には次のものがあります。
非ウイルス遺伝子を細胞に導入するために遺伝子改変ウイルスを使用する(形質導入ともいいます)生物学的方法には、次のものがあります。
物理的方法は、核酸を細胞質または細胞核に直接導入するもので、次のものがあります。
技術 | 利点 | 欠点 |
---|---|---|
カチオン性脂質媒介性導入 |
|
|
リン酸カルシウム共沈殿法 |
|
|
DEAE-デキストラン法 |
|
|
他のカチオン性ポリマーによる導入(例:ポリブレン、PEI、デンドリマー) |
|
|
技術 | 利点 | 欠点 |
---|---|---|
ウイルス導入 |
|
|
技術 | 利点 | 欠点 |
---|---|---|
エレクトロポレーション |
|
|
遺伝子銃 導入(微粒子 打ち込み) |
|
|
マイクロインジェクション |
|
|
レーザー法による トランスフェクション (フォトトランスフェクション) |
|
|
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.