Dynabeads 小鼠 CD8 (Lyt 2)

本产品适用于直接磁性分离或去除脾脏或淋巴结细胞悬液中的小鼠 CD8+ T 细胞。为了快速得出一致的蛋白或基因表达分析结果，在 CD8+ T 细胞仍附着到微珠时进行裂解，并直接处理以用于进一步分子分析。如果需要无微珠 T 细胞，我们建议使用 Dynabeads FlowComp™ 小鼠 CD8（货号114.62D）。

分离原理

Dynabeads 与试管中的细胞样本混合。Dynabeads 将在短暂的孵育过程中结合靶细胞，然后用磁铁分离微珠结合细胞。

阳性分离 – 丢弃上清液并将微珠结合细胞用于下游分子应用。

去除 – 丢弃微珠结合细胞并将剩余的未接触细胞用于任何应用。

样本制备

小鼠细胞通常从脾脏、胸腺或淋巴结中获得，但也可使用其他来源。有关推荐的样本制备程序，请访问泛小鼠 IgG - 去除或阳性分离不同物种的细胞并点击我们的快速链接。 


所需的其他材料

• 磁铁：有关磁铁建议，请参阅 Dynabeads mRNA 纯化试剂盒（从总 RNA 制备液中纯化 mRNA）。
• 兼具倾斜和旋转功能的混合器
• 分离缓冲液（无菌）：添加了 0.1% BSA 和 2mM EDTA 且不含 Ca²⁺ 和 Mg²⁺ 的磷酸盐缓冲盐水 (PBS)（例如 Gibco 货号 10010-023）。推荐的培养基：RPMI 1640（例如 Gibco 货号 12633-012）或含 10% FCS/FBS 的 DMEM，在 CO₂ 环境中培养。

备注：

• BSA 可用人血清白蛋白 (HSA) 或 2% FBS/FCS 代替。
• EDTA 可用 0.6% 柠檬酸钠代替。

重要提示：

• 使用可以倾斜和旋转试管的混合器，确保 Dynabeads 不会沉淀在试管中
• 孵育 Dynabeads 和细胞时，孵育温度必须介于 2-8°C 之间，以减少吞噬活性和其他代谢过程。
• 请遵循推荐的体积和孵育时间
• 移液时，避免出现气泡。

1. 在小瓶中重悬 Dynabeads。


2. 将所需体积的 Dynabeads 转移至试管中。


3. 加入相同体积或至少 1 mL 的分离缓冲液并混合。


4. 将试管放入磁铁1分钟并丢弃上清液。


5. 从磁铁中取出试管，在体积与 Dynabeads 初始体积（第2步）相同的分离缓冲液中重悬洗过的 Dynabeads。

1. 根据表1将适当体积的 Dynabeads 加入制备的样本中。


2. 在 2-8°C 下孵育20分钟（阳性分离）或30分钟（去除），同时轻轻倾斜和旋转试管。


3. 将试管放入磁铁2分钟。


4. 如需去除，将上清液转移至新试管中，待进一步使用。


5. 如需阳性分离，丢弃上清液并洗涤微珠结合细胞3次（洗涤方法：在分离缓冲液中重悬至原样本体积），然后使用磁铁进行分离。