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HILIC は、極性固定相を使用した逆相クロマトグラフィーの手法の一つです。移動相を使用する場合は、性質として非常に有機性が高くなり(60 ~70%超の溶液、通常はアセトニトリル)、微量の水性溶媒/バッファーまたはその他の極性溶液を含みます。移動相の水は水性層を形成します。その層が固定相の極性面に吸収され、検体の分離を促します。
分離手法としての HILIC の主な利点は、移動相でイオンペア添加剤を使用しなくても、従来の逆相では保持されない極性親水性化合物に対して強い保持力を発揮する点です。
アプリケーションに最適な HILIC 固定相を選択するためには、特定のカラム-溶媒-検体システムに関連する可能性のある HILIC 保持機構を理解しなければなりません。
これまでの研究から HILIC の保持メカニズムは複雑だと判明しています。親水性分割、水素結合、静電的相互作用、ファンデルワールス相互作用が組み合わさっています。
HILIC は、逆相液体クロマトグラフィー(RPLC)では保持が困難な親水性化合物の保持を可能にします。さらに、高い水性条件下で高極性化合物を分離する場合、RPLC より高い分離効率が得られます。
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