フローサイトメトリー用核アポトーシスアッセイ

アポトーシスを起こす細胞は核クロマチン凝縮の増加を示します。クロマチンが凝縮すると、 細胞透過性核酸染色は高蛍光性となり、従来の死細胞染色と組み合わせたときにアポトーシス細胞の識別を可能にします。

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図 1.Vybrant® DyeCycle™ Violet染色試薬およびSYTOX® AADvanced™ 染色試薬によるクロマチン凝縮の解析。  Jurkat細胞（ヒトT細胞白血病）を10 µM camptothecinで6時間処理（3B）またはコントロールとして未処理のまま放置（3A）した。その後、細胞をアポトーシスキット- Vybrant® DyeCycle™ Violet/ SYTOX ® AADvanced™ キットの試薬と混合し、405および488 nmで励起可能なフローサイトメーターにより分析した。カンプトセシン処理された細胞（3B）はコントロール細胞（3A）に比べてアポトーソス細胞の割合が高くなっていることに注目してください。A=アポトーシス細胞、V = 生存細胞、N = ネクローシス細胞。

アポトーシス中に起こるDNA断片化がDNA鎖切断を生じることにより、TUNEL（terminal deoxynucleotidyl transferase dUTP nick end labeling）アッセイによる解析が可能となります。  APO-BrdU TUNELアッセイはDNA切断部位と細胞内の全DNAを標識し、イメージングまたはフローサイトメトリーによってアポトーシス細胞を検出するための2色アッセイです。 全DNA量または細胞周期を解析するためのPropidium iodide（PI）も含まれています。