TOPO®テクノロジーで迅速かつ効果的なPCRクローニング

サブクローニング用のTOPO® TA subcloning kitは、最大95%の組換え効率を得られる5分のベンチトップ反応によって、Taqを用いて増幅したPCR産物を直接ライゲーションするために、人気のpCR2.1®-TOPO® TAベクターを利用します。

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pCR2.1®-TOPO® TAベクターの特徴：

  • in vitro RNA転写とシーケンシング用のT7プロモーター/M13フォワードおよびリバースプライマー領域
  • インサート配列を簡単に切り出すための、PCR産物インサートに隣接のEcoRIサイト
  • 15の便利な検証済み制限部位がお持ちのインサートに隣接し、簡便な方向性サブクローニングが可能
  • E. coliでの選別用にアンピシリン、カナマイシン耐性遺伝子が選択可能
  • 組み換え体でのセレクションに使用するための簡単な青/白コロニースクリーニング
  • 利便性が向上し、最もクローニング効率の優れたOneShot® TOP10コンピテントセル

pCR2.1®-TOPO® TAベクター図

pCR2.1®-TOPO® TAベクター

TOPO TAクローニングの性能と価値

各TOPO® TA Cloning® Kitには、直鎖状およびトポイソメラーゼI活性化pCR®2.1-TOPO®ベクター、塩類溶液、dNTP、コントロールテンプレートとプライマー、M13フォワードおよびリバースプライマー、One Shot®ケミカルコンピテントまたはElectrocomp™ E. coli、S.O.C.培地、スーパーコイル型のコントロールプラスミドが含まれます。TOPO® TA Cloning® Kitfor Subcloning without competent cellsは、コンピテントセルおよびS.O.C. 培地は添付されておらず、ご自身の菌株を使用することで柔軟性を高めることができます。Medium are not provided.

さらに、TOPO® TA Cloning® KitはPureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit（50プレップ）と組み合わせたコンボキットでご利用でき、お手持ちのTOPO®クローンインサートでダウンストリーム解析のための迅速なプラスミド精製を実現します。

プルーフリーディング酵素をお使いですか？

Platinum® Pfxなど、3´→5´エキソヌクレアーゼ活性がある耐熱性ポリメラーゼには3´ Aオーバーハングがありません。Taqポリメラーゼで生成したPCR産物はTOPO® TAサブクローニングキットでクローニングを高い効率で行いますが、それは3´ Aオーバーハングが削られていないためです。ただし、プルーフリーディングポリメラーゼを使用する場合や平滑末端断片をクローニングしたい場合、PCR反応の最後にTaqとインキュベートすることで3´ Aオーバーハングを付加できます。

または、Zero Blunt® TOPO® PCRクローニングキットを試したい場合もあるかもしれません。これらのキットでは、熱安定性の高いプルーフリーディングポリメラーゼを使って生成した平滑末端PCR産物を迅速に効率よくクローニングすることができます。ccdB遺伝子をポジティブセレクションに利用することも可能です。

注文のご案内

カタログ番号製品詳細添付されるコンピテントセル反応数 
451641サブクローニング用TOPO® TA Cloning® Kitなし10ご注文はこちら
K4500J10TOPO® TA Cloning® Kit for SubcloningTOP10 (genotype)10ご注文はこちら
450641
TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, without chemically competent cells
なし25ご注文はこちら
K450001
TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® TOP10 Chemically Competent E. coli
TOP10 (genotype)25ご注文はこちら
K452001
TOPO® TA Cloning Kit with One Shot® MAX Efficiency™ DH5α™ T1 Phage-Resistant Chemically Competent E. coli
MAX Efficiency™ DH5α™ T1R (genotype)25ご注文はこちら
K455001
TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® TOP10F' Chemically Competent E. coli TOP10F' (genotype)25ご注文はこちら
K456001TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® TOP10 Electrocomp™ E. coliElectrocompetent TOP10 (genotype)25ご注文はこちら
K451020
TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® Mach1™ Phage-Resistant Chemically Competent E. coliMach1™ T1R (genotype)25ご注文はこちら
K450002TOPO® TA Cloning® Kit with One Shot® TOP10 Chemically Competent E. coli and PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit TOP10 (genotype)25ご注文はこちら
K451022 TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® Mach1™ Phage-Resistant Chemically Competent E. coli and PureLink™ Quick Plasmid Miniprep Kit Mach1™ T1R (genotype)25ご注文はこちら
K450040 TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® TOP10 Chemically Competent E. coli TOP10 (genotype)50ご注文はこちら
K452040TOPO® TA Cloning Kit with One Shot® MAX Efficiency™ DH5α™ T1 Phage-Resistant Chemically Competent E. coli MAX Efficiency™ DH5α™ T1R (genotype)50ご注文はこちら
K455040 TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® TOP10F' Chemically Competent E. coli TOP10F' (genotype)50ご注文はこちら
K456040TOPO® TA Cloning Kit for Subcloning, with One Shot® TOP10 Electrocomp™ E. coli Electrocompetent TOP10 (genotype)50ご注文はこちら

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For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.