TOPO® TAクローニングで迅速かつ効果的なPCRクローニング

PCR増幅DNA断片(平滑またはAオーバーハング)を40以上の選択肢があるサブクローニング、シーケンシング、発現ベクターにたった5分で直接クローニングします。それにより、最高95%の組換えクローンが得られます。

  • 迅速-効率が低いライゲーションや適切な制限酵素の検索の手間を回避できます。
  • 効率的-最大95%の組換えクローンを得ることでコロニースクリーニングを最小化します。
  • トラブルシューティングツール-TOPO®クローニング技術でクローンができなければ、クローニングは不可能です。

TOPO®クローニングのプロトコル

図1 TOPO®クローニングプロトコル。TOPO® PCRクローニングに必要なのは、3つの簡単なステップだけです。PCR生成物とTOPO®クローニングベクターを混合し、5分後、E. coliを形質転換します。

TOPO TAクローニングと従来のクローニング方法の比較

ステップTOPO® TAクローニングキットTA/UAクローニング制限酵素またはカットバックを用いたクローニング
既存プライマーが使用できますか?YesYesNo
クローニングするためのベクターは準備されていますか?YesYesNo
ライゲーション試薬は含まれていますか?YesYesNo
コンピテントセルを別に準備または購入する必要がありますか?No、同梱されています。購入:0時間
準備:最大6時間
購入:0時間
準備:最大6時間
ライゲーション時間5分1時間2~23時間
組換え効率95%まで60~80%~60%
クローニングに必要な時間5分1~12時間2~23時間

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.