Lipofectamine CRISPRMAX 試薬を用いた細胞株特異的な CRISPR RNP トランスフェクション条件

Lipofectamine CRISPRMAX トランスフェクション試薬を使用して、TrueGuide Synthetic gRNA および TrueCut Cas9 Protein v2 を野生型細胞にトランスフェクションするための開始点として、以下に細胞株特異的な条件を示します。最良の結果を得るには、トランスフェクション条件のさらなる最適化が必要となる場合があります。

注：すべてのデータを見るには、表内で右にスクロールします。

細胞の種類	由来	培地	トランスフェクション 1 日前の細胞播種密度／ウェル（× 10³）			TrueCut Cas9 Protein v2/gRNA（ng/pmoles）			Lipofectamine Cas9 Plus試薬／ウェル（μL）			Lipofectamine CRISPRMAX試薬／ウェル（μL）
ウェルフォーマット	—	—	96-ウェル	24-ウェル	6-ウェル	96-ウェル	24-ウェル	6-ウェル	96-ウェル	24-ウェル	6-ウェル	96-ウェル	24-ウェル	6-ウェル
HEK293	ヒト胎児腎臓	DMEM	18	90	450	250/1.5	1250/7.5	6250/37.5	0.5	2.5	12.5	0.4	2	10
U2OS	ヒト骨肉腫	McCoy5A	10	50	250	250/1.5	1250/7.5	6250/37.5	0.5	2.5	12.5	0.3	1.5	7.5
A549	ヒト上皮肺癌	DMEM	10	50	250	250/1.5	1250/7.5	6250/37.5	0.5	2.5	12.5	0.3	1.5	7.5
THP1	ヒト末梢血単球白血病	RPMI	10	50	250	400/2.4	2000/12	10000/60	0.8	4	20	0.3	1.5	7.5
K562*	ヒト骨髄性白血病	RPMI	10	50	250	250/1.5	1250/7.5	6250/37.5	0.5	2.5	12.5	0.3	1.5	7.5
iPSC*	ヒト人工多能性幹細胞	Essential 8	8	40	200	300/2	1500/10	7500/50	0.6	3	15	0.3	1.5	7.5
HepG2	ヒト肝細胞癌	DMEM	10	50	250	250/1.5	1250/7.5	6250/37.5	0.5	2.5	12.5	0.3	1.5	7.5
MDA- MB231	ヒト上皮（乳）腺癌	DMEM	10	50	250	250/1.5	1250/7.5	6250/37.5	0.5	2.5	12.5	0.3	1.5	7.5
N2A	マウス脳神経芽細胞腫	DMEM	10	50	250	250/1.5	1250/7.5	6250/37.5	0.5	2.5	12.5	0.3	1.5	7.5
*より高い編集効率を得るためには Neon Transfection System をを使用してください。

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.