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タンパク質を電気泳動でバンドに分離した後、さまざまなゲル内タンパク質検出法で可視化できます。各染色法には、全体的な利便性、検出限界、ダウンストリームでの解析および検出機器との適合性などに関してそれぞれ利点と欠点があります。
以下の図に、個々の解析に適したタンパク質染色試薬選択の一般的ガイドを示します。このガイドは検出法、感度、質量分析との適合性に基づいています。
製品の一部については、他の試薬をユーザーが用意する必要があります。ステップ数には複数回のゲル洗浄、溶液交換、脱染などが含まれます。染色時間にはゲル洗浄ステップが含まれ、ミニゲルの感度を最適にするには全ステップを実施する必要があります。必要な感度が比較的低い場合には、使用するプロトコルによっては染色および脱染時間を短縮できます。
製品 | 構成要素 (ステップ数) | 必要な時間 | 検出 法 | 検出限界 | 質量分析 適合性 |
---|---|---|---|---|---|
クリプトン蛍光タンパク質染色試薬 | 1 (7) | 2時間40分 | 蛍光 | 0.25 ng | 適合 |
SYPRO® Ruby | 1 (3) | マイクロ波法で90分 標準法で18時間 | 蛍光性 | 0.25 ng | 適合 |
SYPRO® Orange | 1 (5) | 約1時間 | 蛍光性 | 4~8 ng | |
SYPRO® Red | 1 (5) | 約1時間 | 蛍光性 | 4~8 ng | |
SYPRO® Tangerine | 1 (4) | 約1時間 | 蛍光性 | 4 ng | 適合 |
Coomassie™ Fluor Orange | 1 (4) | 約1時間 | 蛍光性 | 8 ng | |
GelCode Blue Safeタンパク質染色試薬 | 2 (5) | 2 時間15分 | 比色 | 9 ng | 適合 |
GelCode Blue染色試薬 | 1 (5) | 2 時間15分 | 比色 | 8 ng | 適合 |
Imperialタンパク質染色試薬 | 1 (5) | 2 時間15分 | 比色 | 3 ng | 適合 |
Simply Blue™ Safe染色試薬 | 1 (5) | マイクロ波法で12分 標準法で3時間 | 比色 | >7 ng | 適合 |
PageBlueタンパク質染色試薬 | 1 (5) | マイクロ波法で30分 標準法で90分 | 比色 | 5 ng | 適合 |
Pierce質量分析用銀染色試薬 | 6 (17) | 1時間13分 | 比色 | 0.25 ng | 適合 |
Pierce 銀染色キット | 4 (15) | 2時間25分 | 比色 | 0.25 ng | 適合 |
Pierce Color 銀染色キット | 4 (9) | 4時間5分 | 比色 | 0.1 ng | 適合 |
Pierce亜鉛可逆染色キット | 3 (4) | 14分 | 比色 | 0.25 ng | 適合 |
SilverXpress® 銀染色キット | 5 (13) | 2時間 | 比色 | 0.86 ng | 適合 |
Thermo Scientificの総タンパク質検出用ゲル染色試薬製品の一部については、他の試薬をユーザーが用意する必要があります。ステップ数には複数回のゲル洗浄、溶液交換、脱染などが含まれます。染色時間にはゲル洗浄ステップが含まれ、ミニゲルの感度を最適にするには全ステップを実施する必要があります。必要な感度が比較的低い場合には、使用するプロトコルによっては染色および脱染時間を短縮できます。
製品 | 構成要素 (ステップ数) | 必要な時間 | 検出 法 | 検出限界 | 質量分析 適合性 |
---|---|---|---|---|---|
InVision™ His-タグIn-gel染色液 | 2 (4) | <3 時間 | UV | 6X His-タグ融合タンパク質約0.5ピコモル | 未試験 |
Lumio™グリーン検出キット | 3 (8) | 即時 | UV | Lumio™ 融合タンパク質1ピコモル | 未試験 |
6x Hisタンパク質タグ染色キット | 4 (9) | 2時間20分 | 蛍光性 | 35 kDa Hisタグ付きタンパク質200 ng | 未試験 |
Pro-Q® Emerald 488糖タンパク質ゲル・ブロット染色キット | 2 (13) | 約6時間 | 蛍光性 | 糖タンパク質4 ng/バンド | 適合 |
Pro-Q® Emerald 300糖タンパク質ゲル・ブロット染色キット | 2 (10) | 約5時間 | 蛍光性 | 糖タンパク質0.5 ng/バンド | 適合 |
Pro-Q® Diamond リンタンパク質ゲル染色試薬 | 1 (5) | 約4~5時間 | 蛍光性 | リンタンパク質1~16 ng /バンド | 未試験 |
Multiplexed Proteomics™ Phosphoprotein ゲル染色キット | 条件によって異なる | 約4~5時間 | 蛍光性 | リンタンパク質1~16 ng /バンド | |
Pierce糖タンパク質染色試薬 | 5 (11) | 2時間40分 | 比色 | 160 ng | 未試験 |
リンタンパク質染色キット | 9 (12) | 3 時間45分 +オーバーナイト 脱染 | 比色 | ホスビチン80 ng 、 β-カゼイン160 ng | 未試験 |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.