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감도가 높고 특이적인 핵산, 엔도톡신, 및 단백질 정량 분석
Invitrogen Qubit 어세이는 DNA, RNA 또는 단백질 타겟에 결합될 때만 형광을 방출하는 타겟-선택적 염료를 사용합니다. 염, 용매, 계면활성제, 단백질 및 자유 뉴클레오티드와 같은 오염물질로 인해 시료 농도가 과대 평가될 수 있는 기존의 UV 흡광법보다 정확합니다. 또한 형광 측정은 UV 흡광법보다 훨씬 감도가 높습니다. Qubit 형광측정기는 노이즈를 크게 줄이면서 희석 시료를 정확하게 측정할 수 있습니다.
도움말: 고효율 정량 분석을 위해 형광 기능이 있는 마이크로플레이트 리더 사용을 고려해 보십시오. Thermo Scientific Varioskan ALF 및 Varioskan LUX 멀티모드 마이크로플레이트 리더는 Quant-iT 어세이 와 호환되어 Qubit 형광측정기 및 어세이와 동일한 분석물을 정량합니다. 이에 대한 비교 정보는 RNA/DNA 정량 분석 페이지를 참조하십시오.
특징
Qubit 어세이들은 측정하는 분석물질은 다르지만, Qubit 4 또는 Flex 형광측정기와 함께 사용할 수 있고, 선택성이 있으며, 감도가 높고, 사용하기 쉬운 특징을 공유합니다.
염료는 DNA, RNA 또는 단백질에 선택적으로 결합합니다.
UV 흡광법 및 기존의 Bradford 단백질 어세이보다 감도가 더 높습니다.
염료는 타겟에 결합될 때만 형광을 방출합니다.
손상된 DNA 또는 RNA, 오염물질의 영향을 최소화합니다
간편한 실행
간단한 혼합-판독 형식
짧은 인큐베이션 시간
DNA 및 RNA 어세이는 2분, 단백질 어세이는 10–15분 정도만 소요됩니다.
Qubit 형광측정기용으로 설계되었습니다.
Qubit 4 및 Qubit Flex 형광측정기와 함께 사용할 수 있도록 최적화되었습니다.
어세이 정량 범위 비교
Qubit 어세이는 이중 및 단일 가닥 DNA(dsDNA 및 ssDNA), RNA, microRNA, 단백질에 사용할 수 있습니다. Qubit DNA 및 RNA 어세이는 다른 정량 분석 범위에서 사용할 수 있습니다. HS(high sensitivity) 분석은 가장 낮은 농도의 분석물을 정량하며, BR(broad range) 분석은 광범위한 범위에서 정량 분석을 수행하며, RNA XR(extended range) 분석은 다량으로 존재하는 시료에 이상적입니다. 이러한 다양한 검출 범위를 통해 광범위한 농도를 정확하게 측정할 수 있습니다. 그래프에서 보이듯이, Qubit HS 및 BR 분석은 모두 낮은 농도의 분석물질을 UV 흡광법보다 더 잘 검출합니다.
Qubit 어세이 및 UV 흡광법의 시료 농도 범위
Qubit 시스템을 사용한 형광 기반 정량은 매우 감도가 높고, 소량의 시료도 정량할 수 있으며, 시료에 DNA 및 RNA가 모두 포함된 경우에도 의도된 타겟만 측정할 수 있습니다. 표준 UV 흡광도 판독은 낮은 농도의 분석물질을 검출하기에는 감도가 충분하지 않으며, 시료 중에 존재하는 RNA와 DNA를 구별하지 않습니다.
또한, Qubit 시스템을 사용한 형광 기반 정량은 동일한 시료에서 RNA와 DNA를 구별할 수 있지만 UV 흡광도 판독은 일반적으로 불가능합니다. Qubit 플랫폼이 제공하는 종합적인 솔루션을 통해 탁월한 성능을 제공하도록 어세이, 소모품, 기기가 함께 최적화되어 있으므로 결과에 자신감을 가질 수 있습니다.
DNA 정량 어세이
Qubit dsDNA 어세이는 두 가지 정량 범위(HS 및 BR) 및 두 가지 형태(표준 및 1X)로 제공되며, 모두 다운스트림 응용 및 프로세싱을 위한 중요한 고려 사항입니다. ssDNA와 올리고뉴클레오티드를 정량하는 어세이도 이용할 수 있습니다.
DNA 정량 어세이
제품 | 초기 시료 농도 | 정량 범위 | 어세이 수 | 카탈로그 번호 |
High Sensitivity dsDNA Assay | ||||
Qubit 1X dsDNA HS Assay Kit | 0.005–120 ng/µL | 0.1–120 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit dsDNA HS Assay Kit | 0.005–120 ng/µL | 0.1–120 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit 1X dsDNA HS Assay Lambda Standard | — | — | 500 | |
Broad Range dsDNA Assay | ||||
Qubit 1X dsDNA BR Assay Kit | 0.2–4,000 ng/µL | 4–4,000 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit dsDNA BR Assay Kit | 0.2–2,000 ng/µL | 4–2,000 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit 1X dsDNA BR Assay Lambda Standard | — | — | 500 | |
ssDNA Assay | ||||
Qubit ssDNA Assay Kit | 0.01–240 ng/µL | 0.2–240 ng | 100 | |
dsDNA 정량 어세이
Qubit dsDNA high-sensitivity(HS) 및 broad-range(BR) 어세이는 RNA 및 ssDNA에 비해 dsDNA에 매우 선택적입니다. 고감도(high-sensitivity) 어세이는 낮은 농도의 dsDNA 시료를 위해 설계되어, 귀중한 시료를 보존하는 데 도움이 됩니다. 염, 자유 뉴클레오티드, RNA, 용매, 계면활성제, 또는 단백질과 같은 일반적인 오염물질도 dsDNA HS 및 BR 어세이에서 허용됩니다.
Qubit dsDNA HS 어세이 결과
Qubit 4(그림) 또는 Qubit Flex 형광측정기에서 결과를 수치로 표시하거나 그래픽으로 표시할 수 있습니다. 이 이미지는 낮은 DNA 농도를 가진 시료를 위해 설계된 high-sensitivity(HS) dsDNA 어세이를 보여줍니다.
이 검사에서 Qubit dsDNA HS 및 BR 어세이를 사용하여 Qubit 4 및 Flex 형광측정기, 경쟁사 기기에서 정확도와 정밀도를 평가하였습니다. Qubit 4 및 Flex 기기는 경쟁사 기기보다 낮은 편차 비율과 CV를 나타냈으며, 더 높은 정확도와 정밀도를 보여주었습니다.
Qubit 1X 어세이 형식으로 시간을 절약하고 환경을 보호할 수 있습니다.
Qubit 1X dsDNA 어세이는 Qubit 작업 용액 준비 단계가 필요 없는 편리한 사전 혼합 형식으로 제공됩니다. 사전 혼합된 용액에 시료 또는 표준물질을 추가하고 인큐베이션한 후 결과를 판독하기만 하면 됩니다. 이 형식은 키트의 튜브 개수(사용되는 플라스틱의 양)를 줄이면서 간단하고 빠른 워크플로우를 제공합니다.
Qubit 1X dsDNA HS 어세이는 표준 dsDNA HS 어세이와 동일한 동적 범위 및 검출 한계를 제공하며, Qubit 1X dsDNA BR 어세이는 표준 dsDNA BR 어세이보다 동적 범위가 더 높으며, 확장된 범위에서 4,000ng/µL을 달성합니다.
주요 범위에서 Qubit 1X dsDNA HS(왼쪽) 및 BR(오른쪽) 어세이 테스트에서 dsDNA의 측정 양은 동일한 양의 RNA가 있는 경우에도 예상 값에서 10% 미만의 차이만 있습니다.
A) Qubit 1X dsDNA HS 어세이
B) Qubit 1X dsDNA BR 어세이
Qubit 1X dsDNA HS (A) 및 BR(B) 어세이의 선택성
플롯은 알려진 양의 DNA 및 RNA가 시드(seed) 된 시료의 정량 결과와 예상 값을 비교하여 나타냅니다. 원은 10μL의 DNA와 190μL의 작업 용액을 사용한 다양한 농도의 시료를 나타냅니다. 사각형은 RNA 10μL, DNA 10μL, 작업 용액 180μL를 사용한 다양한 농도의 시료를 나타냅니다. 원과 사각형이 근사하므로 (어떤 경우에는 거의 구별 불가) 이들 두 dsDNA 어세이가 RNA의 존재에 의해 최소의 영향을 받음을 보여줍니다.
ssDNA 정량 어세이
Qubit ssDNA 어세이 키트는 긴 ssDNA 또는 올리고뉴클레오티드를 정량하도록 설계되었습니다. dsDNA 및 RNA도 검출할 수 있으므로, 어세이를 수행하기 전에 ssDNA를 정제하십시오. 그러나 어세이 결과는 염, 짧은 올리고뉴클레오티드(≤ 6 염기), 자유 뉴클레오티드, 용매, 계면활성제 또는 단백질과 같은 일반적인 오염물의 영향을 받지 않습니다.
다양한 농도 범위의 대형 RNA를 정량하기위한 세 종류의 Qubit RNA 어세이가 있고, 소형 RNA 분자 (microRNA)를 정량하기 위한 한 종류의 어세이가 있습니다. RNA 시료의 무결성과 품질을 측정하는 추가 어세이는 RNA IQ 어세이상의 섹션을 참조하십시오.
대형 RNA 정량 어세이
제품 | 초기 시료 농도 | 정량 범위 | 어세이 수 | 카탈로그 번호 |
일반 RNA 어세이 | ||||
Qubit RNA HS Assay Kit | 0.2–200 ng/µL | 4-200 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit RNA BR Assay Kit | 0.5–1,200 ng/µL | 10–1,200 ng | 100 | |
500 | ||||
Qubit RNA XR Assay Kit | 5–20,000 ng/µL | 100–20,000 ng | 100 | |
500 | ||||
microRNA 어세이 | ||||
Qubit microRNA Assay Kit | 0.025–150 ng/µL | 0.5–150 ng | 100 | |
500 | ||||
RNA 정량 어세이
RNA 정량 어세이
RNA를 정량하기 위해 최소 250 pg/μL에서 10,000ng/μL 까지 초기 시료 농도가 겹치는 세 개의 Qubit RNA 어세이 키트 중에서 선택할 수 있습니다. 이 키트는 이중 가닥 DNA(dsDNA)에 비해 RNA에 대해 매우 선택적입니다. 다른 RNA 어세이와는 달리, 시료에 DNA가 있더라도 DNase 없이 정확한 측정이 가능합니다. 염, 자유 뉴클레오티드, 용매, 세제, 단백질 등의 일반적인 오염물질은 이 분석에서 허용됩니다.
이 감도 어세이에서, Qubit RNA 및 microRNA 어세이(적색 및 청색 막대)는 모두 타겟 RNA(적색 및 청색 선)의 실제 농도에 매우 근사한 측정을 보여주었습니다.
Qubit RNA 및 microRNA 어세이 감도
x축에 열거된 농도의 리보솜 RNA(rRNA)를 2μg/mL siRNA를 함유한 시료에 첨가했습니다. 그런 다음 Qubit microRNA 어세이, Qubit RNA 어세이, UV 흡광도를 사용하여 정량하는 NanoDrop A260 어세이를 사용하여 혼합물을 분석했습니다. 8개 반복 샘플 결과를 평균 내고 표준 편차를 표시했습니다. NanoDrop 기기(자색 막대)의 total RNA 농도 검출 한계는 1.5 μg/mL로 낮은 농도에서 정확도와 정밀도에 영향을 줍니다. Qubit RNA 어세이(적색 막대)는 광범위의 rRNA 농도를 정확하게 정량합니다. Qubit microRNA 어세이(청색 막대)는 2 μg/mL siRNA 농도를 정확하게 정량했으며, rRNA가 2-5배로 양이 증가함에 따라 정확도에 경미한 영향을 미쳤습니다. 청색 및 적색 추세선은 각각 시료에 있는 siRNA 및 rRNA의 실제 농도를 나타냅니다.
microRNA 정량 어세이
Invitrogen Qubit microRNA 어세이 키트는 염, 자유 뉴클레오티드, 용매, 계면활성제 및 단백질과 같은 일반적인 오염물질이 있는 경우에도 microRNA와 같은 소형 RNA(17–25 nt 또는 bp)를 간편하고 정확하게 정량할 수 있도록 설계되었습니다. 이 어세이는 rRNA 또는 대형 메신저 RNA(mRNA)(>1,000bp)에 비해 소형 RNA에 매우 선택적입니다.
순수한 시료에 포함된 소형 RNA는 분석 튜브에 최저 0.5ng의 낮은 수준으로 존재해도 재현성 있게 정량할 수 있습니다. 이 어세이는 microRNA 및 짧은 간섭 RNA(siRNA)를 비롯한 모든 유형의 소형 RNA, 단일 가닥, 이중 가닥 형태 모두를 검출합니다. 뉴클레오티드는 검출되지 않으므로, 작은 mRNA 미립자와 완전히 손상된 RNA를 구별할 수 있습니다.
RNA 무결성 및 품질(IQ) 어세이
Qubit RNA IQ 어세이는 RNA 시료의 무결성 및 품질(IQ)을 신속히 평가하기 위해 개발되었습니다. 여기에는 두 가지 염료가 사용되는데, 하나는 크고 변형되지 않았거나 구조화된 RNA에 결합하고, 다른 하나는 작고 손상된 RAN에 결합합니다. 특별한 취급, 지루한 시료 준비 또는 결과를 위해 오래 기다릴 필요가 없습니다.
RNA 품질 어세이
단백질 정량 어세이 ›
Qubit 단백질 어세이 키트는 단백질 정량을 쉽고 정확하게 할 수 있도록 설계되었습니다. 두 키트를 함께 사용할 경우, 중첩 농도 범위 문제가 해결되어 12.5 μg/mL-20mg/mL 사이의 초기 시료 농도에 대해 정확한 결과를 제공하며 낮은 단백질간 변동을 보입니다. Qubit 단백질 어세이는 쉽게 수행할 수 있으며 10-15분의 실온 인큐베이션만 필요하므로 긴 인큐베이션 기간이나 온도를 높일 필요가 없습니다.
단백질 정량 어세이 ›
엔도톡신(Endotoxin) 검출 어세이
Qubit Flex 형광측정기와 함께 사용할 수 있도록 설계된 Qubit Endotoxin Detection Assay는 단백질, 펩타이드, 항체 또는 핵산 시료 등의 다양한 시료 유형에서 엔도톡신(Endotoxin)을 정량하는 효율적인 형광 엔드포인트 분석을 제공합니다. 이 분석은 가변 시료 용량으로 실행할 수 있으며, 간소화된 워크플로우를 사용하여 0.01-10.0EU/mL의 동적 범위를 제공합니다. Qubit Endotoxin Detection Assay Kit의 주요 특징 및 이점에는 다음이 포함됩니다.
- 넓은 범위의 고감도—0.01EU/mL~10.0EU/mL 범위로 미량 검출 가능
- 광범위한 시료에 적합—단백질, 플라스미드 준비, DNA, RNA 등
- 사용 편의성—Qubit Flex 형광측정기와 함께 사용할 경우 계산이 자동으로 수행되어 오류 가능성 감소
시스템 검증 어세이
Invitrogen Qubit 시스템 검증 키트는 Qubit 4 및 Qubit Flex 형광측정기의 성능을 검사하는 빠르고 간편한 시약 기반 어세이입니다. 세 가지 구성 요소는 블랭크 시약 용액, 녹색 형광 시약, 근적외선 형광 시약입니다. 녹색 형광 시약은 형광측정기에서의 청색 excitation(470nm LED; 430-495nm excitation 필터) 및 녹색 형광 검출(510-580nm emission 필터)을 테스트 하도록 설계되었으며, 근적외선 형광 시약은 적색 excitation(635nm LED; 600-645nm excitation 필터) 및 근적외선 형광 검출(665-720nm emission 필터)을 테스트 하도록 설계되었습니다.
시스템 검증 어세이
MyQubit 맞춤화 및 사전 구성 분석
맞춤형 MyQubit 어세이를 통해 Qubit 형광측정기의 추가 어세이를 수 분 내에 생성할 수 있습니다. Qubit 하드웨어와 스펙트럼 호환되는 시약 또는 어세이는 Invitrogen Qubit 형광측정기와 함께 사용할 수 있도록 조정할 수 있습니다. 여러 가지 사전 구성된 MyQubit 어세이를 다운로드할 수도 있습니다.
새로운 MyQubit 어세이 생성
MyQubit 어세이는 실험실 연구 및 품질 관리부터 공정 모니터링 및 그 외 다른 작업까지 많은 정량 분석 요구를 위한 신뢰할 수 있는 플랫폼을 제공하여 사용자의 실험대에 맞춤형 형광 어세이를 제공할 수 있습니다. USB 드라이브를 사용하여 .qbt 파일을 간편하게 다운로드하고 전송하여 Qubit 3.0 및 4 형광측정기에 새 어세이를 추가할 수 있습니다.
MyQubit 어세이 설계 도구
MyQubit 어세이 설계 도구를 사용하면 Qubit 3.0 및 4 형광측정기에 업로드할 수 있는 맞춤형 MyQubit 어세이 .qbt 파일을 만들 수 있습니다.
사전 구성된 MyQubit 어세이 다운로드
생성할 수 있는 맞춤형 MyQubit 어세이의 예로, Amplex Red 시약을 사용하여 자주 정량하는 여러 분석물에 대한 새로운 MyQubit 어세이를 개발했습니다. USB 드라이버를 통해 .qbt 어세이 파일을 Qubit 형광측정기로 전송할 때, 공장에서 탑재된 Qubit 어세이와 함께 사용할 수 있으므로 Qubit 형광측정기의 기능이 확장됩니다.
사전 구성된 MyQubit 어세이 다운로드 가능
어세이 | Qubit 3.0 및 4용 다운로드 | Qubit 2.0*용 다운로드 | PDF 사용 설명서 |
Amplex Red Cholesterol Assay | |||
Amplex Red Galactose Assay | |||
Amplex Glucose Assay | |||
Amplex Red Glutamic Acid Assay | |||
Amplex Red Peroxide Assay | |||
Amplex Red Sucrose Assay |
* Qubit 2.0 형광측정기는 MyQubit 파일을 전송할 때 2GB 이하의 USB 플래시 드라이브(기기와 함께 제공됨)가 필요합니다.
.qbt 파일을 다운로드하려면 표에서 원하는 .qbt 파일 링크를 클릭합니다. 컴퓨터에 자동으로 다운로드됩니다. Qubit 모델에 맞는 링크를 클릭해야 합니다. .qbt 파일을 Qubit 형광측정기에 업로드하는 방법에 대해서는 해당 어세이의 PDF 사용 설명서를 참조하십시오.
Ion Sphere 정도 관리 키트
Ion Torrent 차세대 염기서열분석(NGS)에서 템플릿 준비 중 각 앰플리콘의 여러 사본이 Ion Sphere 입자(ISP)에 생성됩니다. DNA 또는 RNA를 시퀀싱하기 전에 템플릿 양성 ISP의 양을 아는 것이 중요합니다.
Ion Sphere 정도 관리 키트를 사용하면 Ion PGM(Personal Genome Machine) 또는 Ion GeneStudio 시스템에서 NGS를 실행하기 전에 Qubit 형광측정기에서 농축된 ISP를 빠르고 쉽게 평가할 수 있습니다. 모든 ISP는 상보적인 녹색 형광 Invitrogen Alexa Fluor 488 염료-라벨링된 올리고뉴클레오티드와 결합합니다. 반면, 템플릿 양성인 비드만 상보적인 적색 형광 Invitrogen Alexa Fluor 647 염료-라벨링된 올리고뉴클레오티드와 결합합니다.
Ion Sphere 어세이
제품 | 어세이 수 | 카탈로그 번호 |
Ion Sphere Quality Control Kit(Qubit 4만 해당) | 20 |
Qubit 형광측정기는 각 염료 콘주게이트에 대한 형광 방출을 측정하고, Excel 파일 템플릿을 사용하여 Alexa Fluor 488 염료 신호에 대한 Alexa Fluor 647 염료 신호의 비율로부터 템플릿 양성 ISP의 비율을 계산합니다. Qubit 형광측정기를 사용하는 이 품질 관리 단계는 성공적인 염기서열분석 실행의 가능성을 확인하는 데 도움이 되며, 결과적으로 후속 염기서열분석 중에 시간과 비용을 절약할 수 있습니다.
Ion Sphere 입자 분석 원리
B 핵산 서열은 ISP 프라이머와 템플릿 모두에 존재하며 비드에서 템플릿을 증폭하는데 사용되고, 반면 A 서열은 템플릿에만 존재합니다. Invitrogen Alexa Fluor 염료를 사용해서 Alexa Fluor 647(적색) 및 Alexa Fluor 488(녹색) 염료로 라벨링한 뉴클레오티드의 형광 신호 비율을 통해 템플릿-양성 입자의 상대적인 양을 측정합니다.
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.