免疫沈降についての一般論 | Thermo Fisher Scientific

Sepharose®とアガロース媒体の時代の免疫沈降法（IP）は、その技術についてある一般論や定説が多く生まれました。以下を読むことで、Dynabeads®磁気ビーズを使用した免疫沈降法に対するこうした定説の真実が解明され、IPを行う研究者向けに信頼性のある方法論が提供されているかをご確認ください。

IPの4つの一般論

一般論	事実	動画
IPには高容量の方が適している	事実：高用量はいつも良いとは限りません。容量が重大だと言うときには、一般的に抗原結合容量を指しています。タンパク質分離の歴史およびラージスケールタンパク質精製から免疫沈降法への推移のため、この容量が重大だと思われています。が、実は容量はいつも大事なわけではないのです。事実は、容量、収量、特異性、コストのバランスを取らなければならないというものです。その理由については、ビデオをご覧ください。
バックグラウンドは避けられない	事実：ほとんど全てのバックグラウンドは Dynabeads®磁気ビーズで除去できます。バックグラウンドが避けられないというのは確立された事実のようにみえます。では、この迷信はなくすべきものなのでしょうか？ビデオをご覧になり、Dynabeads®磁気ビーズでどれくらいバックグラウンドが回避できるか学んでください。 IP方法の比較拡大
プレクリーニングは良い結果には不可欠	事実：Dynabeads®磁気ビーズによるプレクリーニングは必要ではありません。免疫沈降法の前にサンプルをプレクリーニングすることが本当に必要なのでしょうか？例えば、いくつかのタンパク質がいつも固相に非特異的結合をするという仮定をしたとします。これらのタンパク質を除去するために、サンプルをプレクリーニングしなければいけませんよね？ビデオをご覧になり、プレクリーニングなしでどれくらいバックグラウンドが回避できるかご確認ください。
Dynabeads®磁気ビーズは値段が高い	事実： Dynabeads®磁気ビーズを使ってコストを節約できます。 Dynabeads®磁気ビーズは高価で、スラリーは一般的に安い考えられています。しかし、サンプル当たりの価格を比較すれば、プレクリーニングのステップを含めるとそれと同等かまたはより低価格の場合もあります。免疫沈降法を行うコストを計算すると、普通は固相の固定容積の潜在的容量と相関関係のある固相のコストを考えます。ビデオをご覧になり、免疫沈降法の実際のコストの計算方法をご確認ください。