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Quantitative Fluorescence PCR (qf-pcr)
Relative fluorescent quantitation (or quantitative fluorescence PCR (QF-PCR) is a technique used in a variety of fragment analysis applications that requires accurate peak height comparisons across multiple samples. Applications that utilize this technique include screening for loss of heterozygosity (LOH) using microsatellites or SNPs, aneuploidy assays, and detecting large chromosomal deletions.
Figure 1. Click to enlarge
図 1: ヘテロ接合性欠失（LOH）の検出 正常なサンプル（上）とがん細胞サンプル（下）から抽出した DNA のマイクロサテライト マーカーのエレクトロフェログラム。ライフテクノロジーズ 3130 シリーズ ジェネティック アナライザで解析しました。 がん細胞サンプルではピークの高さが低く、LOH の可能性が示唆されました。
相対蛍光定量の手順
 DNA の抽出は、DNA シーケンシングとフラグメント解析の実験ワークフローにおける重要な第一ステップです。 DNA の配列解析における全体的な読み取りの品質と精度、長さは、サンプル自体の特性と核酸抽出法に大きく左右される可能性があります。 最適な抽出法は、サンプル源や組織の種類、サンプルの入手方法、抽出前の取り扱いもしくは保存方法によって異なります。 推奨製品: DNA単離法 |
 蛍光標識プライマーを使用した PCR による目的のマイクロサテライト ローカスの増幅 推奨製品: プライマーの設計と PCR の実行 |
 PCR 産物のサンプルをサイズ スタンダードと Hi-Di Formamide の混合液に加え、熱変性して電気泳動します。 推奨製品: 解析サンプルの調製サイズ情報サイジング実験に使用する GeneScan サイズ スタンダードの詳細については、次の表をご覧ください。
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相対蛍光定量の手順
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蛍光定量用推奨製品
Visistat reference component
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.