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ゲノム編集細胞構築
CRISPR/Cas9 システムもしくは TALs システムを用いてターゲット遺伝子をノックアウト、ノックインしたゲノム編集細胞株を構築します。
価格および納期
| サービス内容 | 価格 | 納期 |
| ノックアウト細胞構築 | 2,992,000円～ | 16週間～ |
| ノックイン細胞構築（数塩基置換・挿入・欠失） | ||
| ノックイン細胞構築（遺伝子挿入・N末/C末 タグ） | お問い合わせ | お問い合わせ |
* 上記は参考価格と納期となります。細胞種や作業内容によって価格と納期は異なる場合があります。
* 納期につきましては輸出入に関わる2週間程度が別途加算となります。
- ゲノム編集ツールをCRISPR、TALs からお選びいただけます。
- ご希望のゲノム編集に合わせたCRISPR gRNA、TALs mRNA、ドナーDNA を経験豊富なスタッフがデザインします。
- Neon™ Transfection System を用いて、ご提供いただいた細胞における最適なトランスフェクション条件を検討します。
- 次世代シーケンサ―によりゲノムDNAのターゲット領域の配列解析を実施します。オプションでオフターゲット領域も解析します（CRISPR/Cas9 のみ）。
基本作業・期間
（ノックアウト、ノックイン（数塩基置換・挿入・欠失））
| トランスフェクション 条件最適化 | ご提供いただいた細胞で CRISPR もしくは TALs 導入のための最適なトランスフェクション条件を検討します。 | 3週間～ |
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| CRISPR gRNA 構築 TALs mRNA 構築 | ターゲット遺伝子に対する CRISPR gRNA もしくは TALs mRNA を構築します。 | 上記に含む |
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| 一本鎖オリゴDNA 合成 | 数塩基の変異配列を持つ一本鎖オリゴDNAを合成します。 ノックアウトの場合にはストップコドンを含むオリゴDNAを合成します。 | 上記に含む |
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| 安定細胞プール作製 | 検討した中で最適なトランスフェクション条件を用いて CRISPR gRNAもしくは TALs mRNA と一本鎖オリゴDNA を導入し、安定細胞プールを作製します。ゲノムのターゲット領域を次世代シーケンサーにより配列解析します。 | 3週間～ |
| オフターゲット領域配列解析 （オプション： CRISPRのみ） | オフターゲット候補領域を次世代シーケンサーにより80ヶ所まで配列解析します。 | （上記に含む） |
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| 安定細胞株単離 | 安定細胞プールをシングルセルクローニングし、得られた細胞株のゲノムのターゲット領域を次世代シーケンサーにより配列解析します。 | 8週間～ |
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| 細胞凍結ストック作製 | ご選択いただいた細胞株1株を拡張し、ターゲット領域の配列確認、マイコプラズマチェックを実施後、細胞凍結ストックを作製します。 | 2週間～ |
| 細胞株追加納品 （オプション） | 追加でご選択いただいた複数の細胞株を拡張し、ターゲット領域の配列確認、マイコプラズマチェックを実施後、細胞凍結ストックを作製します。 | （2週間～） |
ご提供いただくもの
- お問い合わせシート
- ターゲット遺伝子配列情報及びノックイン、ノックアウトのデザインを明記したゲノムDNAファイル
- ゲノム編集をご希望の細胞凍結ストック3本、細胞培養プロトコール
納品物
- ゲノム編集済み細胞株（1株のみ、細胞凍結ストック3本）
- 試験報告書
お問い合わせフォーム
こちらのフォーム（word）にご記入の上、メールにてjpcustom@thermofisher.com までお送りください。