粒细胞概述

粒细胞是一种异质性白细胞，其包括中性粒细胞、嗜酸性粒细胞、嗜碱性粒细胞和肥大细胞 [1]。它们是天然免疫细胞，一旦被活化，就会释放免疫刺激分子来抵抗病毒和寄生虫感染。粒细胞依靠炎症信号将其募集到损伤、感染或过敏反应的部位，从而将其活化并具有效应功能[1]。除了能对病毒和寄生虫感染反应之外，粒细胞还参与多种疾病，包括慢性炎症、哮喘、过敏、免疫调节、自身免疫和癌症。

粒细胞的特征胞浆中存在分泌性细胞毒性颗粒，并且为多形核。粒细胞中数量最多的是中性粒细胞（约占人体循环白细胞的60%，小鼠的20%），其次是嗜酸性粒细胞（循环白细胞的1%-3%，约占骨髓循环白细胞的6%），而嗜碱性粒细胞是最少的细胞（约占循环白细胞的<1%）。肥大细胞主要是组织驻留细胞。

粒细胞是从血液、骨髓或组织中分离出来的终末分化细胞。流式细胞分析仪可用于确定活化粒细胞的数量。用于分离细胞的方法会严重影响粒细胞的非特异性活化[1]。

中性粒细胞
通常通过密度梯度离心的方法将嗜中性粒细胞从全血中分离出来，而不是从骨髓中分离出来。

嗜酸性粒细胞
最容易获得人和小鼠体内嗜酸性粒细胞的来源是血液，而骨髓中的嗜酸性粒细胞数量最多。通过适当的蛋白酶消化组织，可从大多数组织中获得组织驻留的嗜酸性粒细胞。嗜酸性粒细胞的另一个来源是从过敏性哮喘模型小鼠中获得的支气管肺泡灌洗液。流式细胞分析仪和分选仪可用于分型和分离。

嗜碱性粒细胞
流式细胞分析仪和分选仪应用于嗜碱性粒细胞的分型和分离[7]。也可以在IL-3存在的情况下从骨髓细胞中培养得到小鼠嗜碱性粒细胞，尽管已观察到这样会导致产生的细胞的表型和功能有差异。

肥大细胞
从组织或腹膜腔中分离的肥大细胞活动度非常高，而且通常数量很少[11]。转化的肥大细胞系的发育已被用作模型。目前已经有从骨髓细胞分化成小鼠肥大细胞或从骨髓、脐血或胎儿肝细胞分化成人类肥大细胞的方案，通常都涉及IL-3、SCF或两者都需要培养较长的时间。然而，这些培养的细胞不能完全替代组织驻留的肥大细胞，因为很难在体外重现这些细胞分化所在的微环境。

在流式细胞仪中，基于FSC/SSC的形态学很容易分辨粒细胞（图1）。如果根据紫光散射特性对白细胞设门，则可将人血液中的三种主要白细胞群体（淋巴细胞、单核细胞和粒细胞）区分开来。

中性粒细胞：当受到IFNγ的正向调节或受到IL10的负向调节时，活化的中性粒细胞可以分泌多种细胞因子。由于人中性粒细胞的总RNA通常比其他白细胞的总RNA少几倍，所以每个中性粒细胞生成的细胞因子量明显低于其他白细胞。

嗜碱性粒细胞：细胞因子IL-3可作为一种有效的造血生长因子，参与骨髓祖细胞的分化和嗜碱性粒细胞的活化。嗜碱性粒细胞可分泌IL-4、TSLP、IL-13和IL-25，这些细胞因子可促进Th2功能，并有助于免疫球蛋白特别是IgE的合成。

嗜酸性粒细胞：IL-5是一种有效的造血生长因子，其可活化嗜酸性粒细胞，并与IL-3和GM-CSF协同作用，促进成熟嗜酸性粒细胞的发育。嗜酸性粒细胞趋化因子1、2和3是嗜酸性粒细胞向肺部和肠道等身体部位迁移的有效化学诱导剂。据报道，嗜酸性粒细胞能分泌超过30种细胞因子，其中一些是被预先合成并储存在嗜酸性粒细胞晶体颗粒中。

肥大细胞：小鼠和人肥大细胞已被确认能分泌许多的细胞因子、趋化因子和生长因子，参与介导过敏性疾病以及天然和适应性免疫反应。虽然大多数细胞因子也由许多其他细胞生成，但肥大细胞的分泌可能取决于肥大细胞的特定功能，如抵抗寄生虫感染、细菌感染、病毒感染、食物过敏和粘膜部位过敏。

多因子免疫试验提供了一种方便且经济的方法来分析与粒细胞功能相关的细胞因子、趋化因子和生长因子。全面的Immune Monitoring 65-Plex Human Panel是市面上最常用的多重免疫试验试panel，它是监测粒细胞分泌细胞因子的有效方法。