Thf滤泡辅助性T细胞概述

滤泡辅助T细胞（Tfh）是参与体液应答的CD4阳性辅助性T细胞的一个亚群[1]。Tfh细胞存在于次级淋巴组织中，包括扁桃体、脾脏和淋巴结。Tfh细胞的作用是触发生化中心（GC）B细胞分化成分泌抗体的浆细胞和记忆性B细胞[2、3]。因此，Tfh细胞是增强免疫应答的关键，了解Tfh细胞的功能有助于对疫苗的开发。

生发中心（GC）是次级淋巴器官感染或免疫后形成的显微解剖结构。GC是B细胞增殖、多样化和增加抗原亲和力的场所。GC分为两个部分——暗区（DZ）和明区（LZ），它们有不同的功能和细胞类型（表1），影响着GC B细胞的功能[4]。DZ充满了高度增殖的B细胞，这些B细胞发生高频突变以生成多种抗体。LZ更具有多样性，有滤泡树突状细胞（FDC）、Tfh滤泡辅助性T细胞、巨噬细胞以及naive和GC B细胞。LZ细胞之间协同工作，例如，记忆性B细胞或浆细胞被巨噬细胞能清除，或被引导回DZ再次经历高频突变[5]。

表 1.目前在生发中心发现的细胞列表。

Tfh细胞是cd4阳性细胞，其可表达高水平的趋化因子受体5蛋白和转录因子B细胞淋巴瘤6（BCL6）[6]。其他重要标志物包括趋化因子受体3、PD1和ICOS。Tfh细胞生成IL-21，以促进B细胞分化和亲和力成熟。GC Tfh细胞的标志物在人和小鼠中是保守的（表2）[1]。

表 2.目前人和小鼠Tfh细胞标志物列表。

作为GC Tfh细胞的替代品，循环Tfh (cTfh)细胞正在被研究，以便了解体外疫苗应答[7]。在体外可能无法真正鉴别GC Tfh，因此需要从次级淋巴组织中分离GC区域，从而研究T细胞 - B细胞的相互作用。已经观察到，将cTfh细胞与自体naiveB细胞共培养生成浆细胞[8、9]。cTfh细胞可以用以下标志物来识别：CD4、CXCR5与PD1、CCR7、CXCR3、CCR6和ICOS [8、9、10]；cTfh细胞不表达BCL6。

辅助性T细胞亚群的分化依赖于分化的CD4⁺ T细胞和特定细胞因子。1型和2型Th（Th1和Th2）细胞、Th17细胞和效应性T（Treg）细胞的强分化途径已得到确认。Tfh细胞分化需要多种因素共同促成，而非单一事件的结果[1]。人们普遍认为，Tfh的分化需要在IL-6和IL-21同时存在的情况下，用MHC II特异性多肽刺激naive CD4⁺ T细胞TCR[11、12、13]。
 

细胞因子在Tfh细胞分化中起着重要作用，尽管有报道称小鼠和人在关键作用的细胞因子存在差异。例如，IL-6与共刺激分子ICOSL共同构成小鼠Tfh细胞分化的有效诱导剂，而IL-6在人Tfh分化中的作用还未明确。相比之下，使用IL-12与转化生长因子-β或激活素A在体外分化得到人Tfh细胞，但这些条件能使小鼠Tfh细胞分化。在所有抑制性细胞因子中，IL-2是Tfh分化最有效的抑制剂。

Tfh细胞分泌的主要细胞因子包括IL-21和IL-4，它们与共刺激分子CD40L共同提供B细胞增殖和分化所需的信号。IL-21的分泌在IL-4之前，只有生化中心的Tfh细胞完全分化完成时才能分泌IL-4。除了这些细胞因子，人Tfh细胞还分泌趋化因子CXCL13，它负责招募CXCR5⁺B细胞迁移至滤泡。

表3：参与Tfh细胞分化和分泌的关键细胞因子。

可以使用酶联免疫吸附测定试剂盒（ELISA）或Invitrogen ProcartaPlex assays多因子检测试剂盒分析分化的细胞因子和趋化因子谱或Tfh细胞分泌的细胞因子和趋化因子。