干扰素IFN细胞因子概述

干扰素 (IFN) 受体蛋白是宿主细胞分泌的一类细胞因子，可调节免疫应答。作为被发现的第一类细胞因子，它被命名为“干扰素”，因为这种蛋白质能够干扰病毒的复制。当存在病原体时，通常由宿主细胞释放干扰素，周围未感染的细胞感知后激活适当的细胞防御机制，以便消除病原体。IFN细胞因子根据其结合的不同干扰素受体分为三种类型（I型、II型和III型）（表1）；每种IFN细胞因子诱导一种特定的免疫反应。此外，IFN细胞因子介导信号会促进主要组织相容性I类和II类分子（MHC I，MHC II）的上调，并活化许多下游信号级联，从而生成抗病毒防御机制。此后，IFN ELISA被用于治疗病毒性感染，如丙型肝炎和乙型肝炎病毒；然而，一些病毒已经进化到能够抵抗IFN [1]。

I、II、III型

I型IFN能与特定细胞表面受体IFN-α/β （IFNAR1，IFNAR2）结合，是未感染细胞的预警系统。在人体中，I型IFN是最大的IFN家族，包括IFN-α、IFN-β、 IFN-ε、IFN-κ和IFN-ω；它们由多种类型的细胞分泌，包括浆细胞样树突状细胞和成纤维细胞。I型IFN的一个主要功能是使真核转化起始因子2a（eIF-2a）失活，从而抑制病毒蛋白的合成（图1）。此外，I型IFN可活化RNase L，它能切割细胞质中的任何ssRNA，进一步抑制病毒复制[2，3]。IFN-α已被用于治疗毛细胞白血病，而IFN-β则被用于减缓多发性硬化症的进展。

II型IFN（人体的IFN-γ）与IFN-γ受体复合物（IFNGR1，IFNGR2）结合，参与免疫和炎症反应；它们由活化的T细胞和自然杀伤（NK）细胞分泌。当1型辅助性T细胞（Th1细胞）释放II型IFN时，白细胞被浸润到感染部位，最终炎症反应增大。由于它们在免疫反应中的作用，不受控制的II型IFN能引起自身免疫性疾病。

III型IFN包括IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ3和IFN-λ4，并与I型IFN相似，都参与抑制病毒感染。IFN-λ1、IFN-λ2、IFN-λ3最初分别命名为IL-29、IL-28a、IL-28b；IFN-λ4是最新发现的III型IFN[4]。III型IFN与受体IFRL1和IL-10R2结合，这两种受体不同于I型受体。虽然不像I型和II型那样为人所知，但我们查明III型IFN与JAK-STAT通路有关，并且是在宿主识别到病原体相关分子模式（PAMP）时合成的，类似于I型IFN[4，5]。

表 1.IFN干扰素细胞因子类型及其受体。

鉴于IFN细胞因子的抗病毒功能，病毒RNA可能是IFN表达的诱导剂。然而，果蝇中Toll-Dorsal通路的发现引发了对人体Toll样受体（TLR）同源物的研究。TLR是一类模式识别受体（PRR）,其可以识别病原体相关分子模式（PAMP）[6]。这些跨膜受体存在于细胞表面和核内体中。一旦与PAMP结合，TLR就会启动信号级联，促进IFN基因活化，以及随后表达和分泌。RIG-I样受体（RLR）是另一类PRR，是病毒RNA检测的胞质传感器[6]。RLR的活化会导致IFN调节因子-3 （IRF-3）、IRF-7和NF-κB的上调，它们是诱导I型IFN和炎性细胞因子的转录因子[7,8]。

病毒已经发展出许多逃逸或规避检测的策略。流感等一些RNA病毒只是在细胞核内复制，以避开细胞质DNA/RNA传感器。其他病毒则通过阻止细胞传感器识别病毒产物或抑制下游IFN反应等。例如，卡波西肉瘤相关疱疹病毒上的ORF52蛋白直接抑制cGAS的酶活性，从而抑制STING复合物，该复合物是一种已知的IFNβ生成的启动子[9]。RNA病毒表达能结合并抑制RLR的病毒蛋白，从而逃逸胞质检测，许多病毒也进化出了干扰干扰素诱导的宿主转录和翻译的策略。西尼罗河病毒已被证明可将胆固醇重新分布到病毒复制膜上，导致IFN抑制JAK-STAT活化[10]。尽管有许多机制和通路旨在终止或限制病毒的增殖，但这些只是病毒如何进化以图存活于宿主细胞中的几个例子。 这些只是病毒如何进化到在宿主细胞中生存的几个例子，尽管有许多机制和途径旨在终止或限制它们的增殖。

IFN-γ表达的染色

IFN-γ是感染期间炎症和免疫系统参与的关键标志。流式细胞术是检测IFN-γ的最常用方法之一。在存在蛋白运输抑制剂布雷菲德菌素A的情况下，体外刺激脾细胞或PBMC，需要找到IFN-γ的可检测水平。首先对细胞进行细胞外标志物染色，然后用IC固定和渗透缓冲装置。此后，准备对细胞进行细胞内标志物染色，包括IFN-γ。为了轻松检测IFN-γ，我们建议使用更亮的荧光染料，包括PE。OMIP和流式细胞术相关方法和论文有助于panel设计[11，12，13]。