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ウェスタンブロッティングは、実験の手法によって異なりますが、数時間から 1 ～ 2日かかる複数のステップを行う必要があります。 タンパク質ゲル電気泳動によるタンパク質の分離からウェスタンブロッティング検出まで、一般的なステップ毎に詳しく解説したビデオをご覧ください。

分子量に基づいてタンパク質を分離します。

プレキャストゲルを使用してタンパク質を分離する手順

タンパク質をゲルからメンブレンに転写します。

Mini Blot Moduleを使用してウェット式転写を行う方法

Power Blotter と転写スタックを使用して高速ドライ式転写を行う方法

Power Blotter とプレカットメンブレンを使用してセミドライ式転写を行う方法

iBlot 2ドライブロッティングシステムを使用して高速ドライ式転写を行う方法

検出用抗体のメンブレンへの非特異的に吸着を防ぐために、メンブレン上の未反応部分をブロックし、一次抗体および二次抗体反応を行います。

プロービングの手順

iBind Western System を使用してウェスタンの抗体反応を自動化する方法

選択した検出方法に基づいて、ターゲットのタンパク質を検出します。

化学発光検出試薬を使用してタンパク質を検出する手順

蛍光検出試薬を使用してタンパク質を検出する手順

ウェスタンブロッティングの画像を撮影し、イメージング解析を行います。

iBright Imaging Systemsによる画像撮影

iBright Imaging Systems によるイメージング解析

画像のエクスポート

メンブレンを処理して検出試薬や抗体を除去し、別のタンパク質を検出するためにリプロービングを行います。

ストリッピングとリプロービングの手順

Step 1 : ゲル電気泳動

分子量に基づいてタンパク質を分離します。

プレキャストゲルを使用してタンパク質を分離する手順

Step 2 : メンブレン転写

タンパク質をゲルからメンブレンに転写します。

Mini Blot Moduleを使用してウェット式転写を行う方法

Power Blotter と転写スタックを使用して高速ドライ式転写を行う方法

Power Blotter とプレカットメンブレンを使用してセミドライ式転写を行う方法

iBlot 2ドライブロッティングシステムを使用して高速ドライ式転写を行う方法

Step 3 : プロービング

検出用抗体のメンブレンへの非特異的に吸着を防ぐために、メンブレン上の未反応部分をブロックし、一次抗体および二次抗体反応を行います。

プロービングの手順

iBind Western System を使用してウェスタンの抗体反応を自動化する方法

Step 4 : 検出

選択した検出方法に基づいて、ターゲットのタンパク質を検出します。

化学発光検出試薬を使用してタンパク質を検出する手順

蛍光検出試薬を使用してタンパク質を検出する手順

Step 5 : イメージングと解析

ウェスタンブロッティングの画像を撮影し、イメージング解析を行います。

iBright Imaging Systemsによる画像撮影

iBright Imaging Systems によるイメージング解析

画像のエクスポート

Step 6 : ストリッピング

メンブレンを処理して検出試薬や抗体を除去し、別のタンパク質を検出するためにリプロービングを行います。

ストリッピングとリプロービングの手順

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.