質量分析コアエッセンシャルズ | Thermo Fisher Scientific

再現性のある正確な質量分析結果を得るためには適切なサンプル調製が極めて重要です。質量分析コアラボは信頼性のある一貫したデータをユーザーに提供しようと努めています。弊社では、タンパク質消化からペプチド濃縮、クリーンアップ、定量まで最適な成果が得られるように試験した試薬と便利なキットを提供しています。

包括性—タンパク質消化前後を含めて、サンプル調製ワークフローの各段階の試薬とキットをご用意しています
汎用性—完全なキットと単独の試薬の両方で利用可能な製品、バルク包装とカスタム包装もご利用頂けます
互換性—すべてのキットが質量分析に互換性があるように設計されており、調製サンプルは Thermo Scientific の質量分析計を用いて十分に試験、分析されています

適切な質量分析サンプル調製製品をお選びください

ワークフローの段階	製品
迅速なサンプル調製	EasyPep Mini MS Sample Prep Kit	さらに製品を見る
アバンダントタンパク質除去	High-Select HSA/ Immunoglobulin Depletion Resin（A36368） High-Select Top 14 Abundant Protein Depletion Resin（A36372）	さらに製品を見る
タンパク質濃縮	免疫沈降法（タンパク質 A／G）免疫沈降法（ストレプトアビジン）	さらに製品を見る
タンパク質消化	Pierce Trypsin Protease, MS Grade（90057） Lys-C Protease, MS Grade（90051） Trypsin/Lys-C Protease Mix, MS-Grade（A41007）	さらに製品を見る
ペプチド濃縮と分画	High Select Fe-NTA Phosphopeptide Enrichment Kit（A3299） High Selected TiO₂ Phosphopeptide EnrichmentKit（A32993） Pierce High pH Reversed-Phase Fractionation Kit（84868）	さらに製品を見る
ペプチド脱塩	Pierce Peptide Desalting columns（89852） Pierce C18 Tips, 100 µL bed（87784）	さらに製品を見る
界面活性剤除去	Pierce Detergent Removal Spin Columns（87777）	さらに製品を見る
ペプチド定量	Colorimetric Peptide Quantitation Assay（23275） Fluorometric Peptide Quantitation Assay（23290）	さらに製品を見る
QC 標準	Pierce Peptide Retention Time Calibration Mixture（88321） Pierce BSA Protein Digest Standard（88341） Pierce 6 Protein Digest（88342） Hela Digest Standard（88329） Pierce TMT11plex Yeast Digest Standard（A40939）	さらに製品を見る
LC-MS 溶剤	Pierce Trifluoroacetic Acid（TFA）（28904） Piece Formic Acid, LC-MS Grade（28905） Pierce Acetonitrile, LC-MS grade（51101） Pierce Water, LC-MS Grade（51140）	さらに製品を見る

タンパク質定量アプリケーションに関しては、tandem mass tags、SILAC 代謝標識システム、SureQuant targeted Mass Spec Assays または HeavyPeptide AQUA カスタム合成サービスの詳細をご確認ください。

製品データ

迅速なサンプル調製

図 1.従来のプロトコルおよび他の市販キットとの比較におけるEasyPep Mini MS Sample Prep Kit。EasyPep Mini MS Sample Prep Kit は高ペプチド収率と、細胞ライセート中の同等のペプチドおよびタンパク質同定を良好な再現性で提供します。

アバンダントタンパク質除去

図 2.アバンダントタンパク質除去によって固有のタンパク質の同定精度が改善します。除去されなかった（a）、HSA／免疫グロブリン（b）、Top14（c）除去樹脂を用いて除去された正常ヒト血漿サンプルに関するタンパク質群同定プロファイルを示します。すべてのサンプルは還元／アルキル化とトリプシン消化処理しました。1 回あたり 750 ng のサンプルをインジェクションし、60 分のグラジエントにて Orbitrap Fusion Tribrid 質量分析計により LC-MS 分析しました（3 回実施）。Thermo Scientific Proteome Discoverer 1.4 ソフトウェアを用いて、ヒトタンパク質データベース検索を行いました。各サンプルの種類に関して重複を除いたタンパク質群同定数が報告されます。

タンパク質消化

図 3：MS グレードトリプシン製品の開裂選択性の比較。5 種類のタンパク質混合サンプル（10 μg）は、Pierce Trypsin Protease または Promega Trypsin Gold によって 3 時間かけて消化され、Velos Pro Mass Spectrometer を用いて LC-MS 分析されました。「酵素なし」消化設定で Mascot 検索エンジンを用いてデータ解析を行いました。Pierce Trypsin Protease では、リジンとアルギニン（K/R）に対して 95％以上の開裂選択性が確認されました。

ペプチド脱塩

図 4.Pierce ペプチド脱塩スピンカラムを用いたさまざまな負荷量での天然ペプチドのペプチド回収。消化した HeL a抽出物（5 ～ 5,000 μg）を Pierce Peptide Desalting Spin Columns で処理しました。Pierce Quantitative Colorimetric Peptide Assay を用いて、回収した脱塩ペプチド総数を推定しました。

ペプチド定量分析

図 5.Pierce Quantitative Colorimetric Peptide Assay の感度。（A）BSA 消化を用いた Pierce Micro BCA Assay と比較した Pierce Quantitative Colorimetric Peptide Assay の感度。（B）12 種類の培養哺乳類細胞溶解物を用いた Pierce Quantitative Peptide Assays 間の定量比較。

EasyPep Mini MS Sample Prep Kit 使用方法のビデオ

この迅速な質量分析サンプル調製キットを使用して、タンパク質の抽出、消化、およびペプチドクリーンアップを 2 ～ 4 時間で行えます。

Resources

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.