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应根据各个研究者的需求和经验来决定是否使用抗生素防止污染。下表是在细胞培养基中使用 Gibco 抗生素的一般指南。给定的浓度适用于含血清的细胞培养基;无无血清培养基通常需要更低浓度。您还可以选择使用一种或多种抗生素结合一种抗真菌剂的溶液。对于所有培养基类型,应根据经验确定最适当的抗生素和抗真菌剂浓度。
抗生素 | 建议浓度 | 抗生谱 | 在 37°C 培养基中的稳定性 |
---|---|---|---|
抗 PPLO 试剂泰乐菌素 | 10 – 100 μg/ml | 支原体和革兰氏阳性菌 | 3天 |
FUNGIZONE®(两性霉素 B) | 0.25 – 2.5 μg/ml | 真菌和酵母菌 | 3天 |
硫酸庆大霉素 | 5 – 50 μg/ml | 革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和支原体 | 5天 |
硫酸卡那霉素 | 100 μg/ml | 革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和支原体 | 5天 |
硫酸新霉素 | 50 μg/ml | 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 | 5天 |
制霉菌素 | 100 U/ml | 真菌和酵母菌 | 3天 |
青霉素 G | 50 – 100 U/ml | 革兰氏阳性菌 | 3天 |
硫酸多粘菌素 B | 100 U/ml | 革兰氏阴性菌 | 5天 |
硫酸链霉素 | 50 – 100 μg/ml | 革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌 | 3天 |
当一种不可替代的培养物受到污染时,研究人员可能会尝试消除或控制污染。
首先,确定污染物是否为细菌、真菌、支原体或酵母菌。将被污染的培养物与其他细胞系分离开来。 使用实验室消毒剂清洁培养箱和层流通风罩,并检查 HEPA 过滤器。 高浓度抗生素和抗真菌剂可能对某些细胞系具有毒性;因此应执行剂量效应测试以确定抗生素或抗真菌剂的毒性水平。 当使用抗真菌剂(如 FUNGIZONE)或抗生素(如泰乐菌素、环丙沙星或 M-Plasmocin)时,这一点尤为重要。
以下是建议用于确定毒性水平和净化培养物的程序。