Serum and Plasma Preparation

如何从血液中分离血清和血浆

血清是全血的液体组分,在血液凝结后可进行收集。通过离心去除凝块,并用巴斯德吸管小心去除得到的上清液以及指定的血清。当全血收集在通过抗凝剂处理的试管中时,会产生血浆。血液在血浆管中不会凝结。通过离心去除细胞。使用巴斯德吸管小心地从细胞团中去除上清液,指定的血浆。
 

血清制备

将全血采集到带盖试管中。如果使用市面上销售的管,研究人员应使用红色顶部管。此类产品可从 Becton Dickinson (BD) 获取。BD 的输血管商名是 Vacutainer。 收集全血后,让血液在室温下静置,从而使其凝结。这通常需要 15-30 分钟。在冷冻离心机中以 1,000–2,000 x g 离心 10 分钟,去除凝块。

所得的上清液为指定的血清。离心后,重要的是立即使用巴斯德吸管将液体组分 (血清) 转移到干净的聚丙烯管中。处理时,样品应保持在 2-8°C。如果血清未立即分析,应将血清分成 0.5 ml 等份试液,储存并在 -20°C 或更低温度下运输。避免冻融循环非常重要,因为这会对许多血清组分造成损害。溶血,黄疸或脂血症的样品可能对某些测试无效。

血浆制备

将全血采集到市售的抗凝剂处理试管中,例如经 EDTA 处理 (淡紫盖) 或经柠檬酸盐处理 (浅蓝色顶部)。肝素化管 (绿色顶部) 用于某些应用;然而,肝素通常会被内毒素污染,从而刺激白色血细胞释放细胞因子。使用冷冻离心机在 1,000 – 2,000 x g 条件下离心 10 分钟,可从血浆中去除细胞。在 2,000 x g 下离心 15 分钟可去除血浆样品中的血小板。

所得的上清液被指定为血浆。离心后,务必立即使用巴斯德吸管将液体组分 (血浆) 转移到干净的聚丙烯管中。处理时,样品应保持在 2–8°C 温度范围。如果不立即使用血浆,血浆应分成 0.5 ml 等份试液,进行储存,然后在 -20°C 或更低温度下运输。应避免反复冻融。溶血,黄疸或有脂血症的样品可能对某些测试无效。还有其他市售管用于血样采集。Invitrogen 未对其中一些管与我们的 ELISA 试剂盒兼容进行评估。

血清和血浆管

市面上销售的血清管如下:
红色
无抗凝剂。
红色与黑色
用凝胶处理,有助于分离凝块 (未评估)。
市售血浆管如下: 
浅紫色
用 EDTA 处理。
蓝色
用柠檬酸盐处理。
绿色
用肝素处理。
灰色
用草酸钾 / 氟化钠处理 (未评估)。
黄色
用草酸钾/氟化钠处理(未评估)。

参考文献