細胞溶解および分画

弊社では、サンプルの種類に応じて最適化された組織溶解、細胞溶解、および細胞分画用の製品を数多くご用意しています。弊社製品を使用して得られる溶解物や分画は、広範囲にわたるダウンストリームアプリケーションに対応しています。製品の特徴：

• 細胞や組織からの高収量のタンパク質を抽出できます
• タンパク質活性を保持できる組成となっており多くのダウンストリームアッセイに対応できます
• タンパク質アッセイ、免疫沈降、免疫測定法、ウェスタンブロッティング、EMSA、および酵素アッセイに直接使用できます
• いくつかの組織および細胞株において有効性を確認しています
• 機器を使用する物理的な細胞破砕を使用する必要がありません

細胞溶解、タンパク質可溶化のアプリケーションや、ELISAおよび他のタンパク質研究法用の洗浄バッファーとして用いることができる高純度な界面活性剤溶液および固体フォーマットの界面活性剤。

粗分画または一般的な密度の分画から迅速に高純度のオルガネラと特異的タンパク質の単離が可能です。時間と労力のかかる密度勾配遠心分離に代わる方法となります。

E. coliおよび他の細菌、哺乳動物培養細胞および組織、昆虫細胞、酵母培養物、顕花植物より高効率でタンパク質を抽出および可溶化を行えます。

異なる細胞分画からのタンパク質の段階的分離、濃縮、および抽出するために最適化された試薬キットです。単離された細胞質、膜、核、クロマチン結合、および細胞骨格タンパク質はダウンストリーム分析にてご使用いただけます。

ダウンス型ホモジナイザーや密度勾配分離による細胞内タンパク質の分画や核、ミトコンドリア、ペルオキシソーム、およびリソソームなどの細胞小器官の単離が行えます。

すぐに使用できるインヒビターカクテル溶液やタブレットのみならず、個々に精製されたプロテアーゼインヒビターやホスファターゼインヒビターがあります。これらの試薬が細胞溶解と抽出の際の酵素による分解からタンパク質を保護します。

一般的細胞株より2つの抽出キットを使用して、膜タンパク質を抽出しました。膜タンパク質の単離は、Thermo Scientific Mem-PER Plus Membrane Protein Extraction KitとEMD Millipore ProteoExtract™ Native Membrane Protein Extraction Kit (品番444810)を用い、それぞれのプロトコールに従って行いました。膜タンパク質収量の測定は、BSAスタンダード(品番23209)およびBCA Protein Assay (品番23225) によって行った。

4つの異なるDNAタンパク質複合体の化学発光EMSAを行いました。DNA結合反応は、20 fmolのビオチン標識DNA二重鎖（１鎖あたり１ビオチン）とHeLa細胞から調製したNE-PER核抽出物2 µL (総タンパク質6.8 µg) を用いて行いました。特異的競合DNAを含む反応には、モル比で200倍の過剰量の未標識の特異的二重鎖を用いました。