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β-D-ガラクトシダーゼをコードする大腸菌lacZ遺伝子は、組換え融合遺伝子発現の検出や哺乳類、酵母および細菌細胞のトランスフェクション効率のモニタリングのためのレポーター遺伝子として、広範囲に用いられています。哺乳動物細胞にはβ-ガラクトシダーゼが含まれるにもかかわらず、哺乳動物細胞は一般にリソソーム酵素の最適pHが低いので、中性pHでは低い活性を示します。このことと、大腸菌由来β-D-ガラクトシダーゼが高い回転置換率を有するという事実とを組み合わせることで、この酵素を非常に低い濃度で検出でき、感度の高い遺伝子発現レポーターとすることができます。
蛍光発生基質CUGは実質的に水溶性であり、広範囲にわたる濃度範囲にわたってβ-D-ガラクトシダーゼ活性の高感度検出に用いられます。この基質は、一般的に用いられる発色性基質よりも桁違いに高い感度を有します。
これらの代替蛍光発生基質は、励起と発光波長を選ぶことで、β-D-ガラクトシダーゼ活性の高感度検出を可能にします。
フルオレセインジ-β-D-グルコピラノシド は、グルコシダーゼに対して最も感度の高い基質の1つです。非蛍光基質は、β-グルコシダーゼによって最初にフルオレセインモノグルコシドに対して、次に高蛍光フルオレセインに対して、経時的に加水分解されます。
FluoReporter® lacZ/Galactosidase Quantitation Kit | |
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ターゲット | β-ガラクトシダーゼ |
レポーター | CUG |
励起/蛍光 (nm) | 386/448 |
生細胞 | 不可 |
ライセート | 可 |
酵素調製 | 可 |
使用方法 | 検出限界:0.5 pgのβ-gal |
構成品 | 基質とスタンダードをインキュベート。 |
フォーマット | 96ウェルフォーマットで1,000アッセイ |
プロトコルの概要 |
|
カタログ 番号 | F2905 |
4-Methylumbelliferyl β-D-Galactopyranoside (MUG) | Fluorescein Di-β-D-Galactopyranoside (FDG) | Resorufin β-D-Galactopyranoside | 9H-(1,3-Dichloro-9,9-Dimethylacridin-2-One-7-yl) β-D-Galactopyranoside (DDAO galactoside) | |
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ターゲット | β-ガラクトシダーゼ | β-ガラクトシダーゼ | β-ガラクトシダーゼ | β-ガラクトシダーゼ |
レポーター | MUG | FDG | Resorufin β-D-Galactopyranoside | DDAO galactoside |
励起/蛍光 (nm) | 360/449 | 490/514 | 571/585 | 645/660 |
生細胞 | 不可 | 可 | 不可 | 不可 |
ライセート | 可 | 可 | 可 | 可 |
酵素調製 | 可 | 可 | 可 | 可 |
使用方法 | 細胞抽出物のβ-ガラクトシド活性の検出 | β-ガラクトシド検出用の高感度な緑色蛍光発生基質 | β-ガラクトシド検出用の赤色蛍光発生基質 | β-ガラクトシド検出用の遠赤色蛍光発生基質 |
構成品 | 酵素基質 | 酵素基質 | 酵素基質 | 酵素基質 |
フォーマット | 1 g | 5 mg | 25 mg | 5 mg |
プロトコルの概要 |
|
|
|
|
カタログ 番号 | M1489MP | F1179 | R1159 | D6488 |
Fluorescein Di-β-D-Glucopyranoside (FDGlu) | |
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ターゲット | グルコシダーゼ |
レポーター | FDGlu |
励起/蛍光 (nm) | 490/514 |
生細胞 | 可 |
ライセート | 可 |
酵素調製 | 可 |
使用方法 | グルコシダーゼ検出用の高感度緑色蛍光発生基質 |
構成品 | 酵素基質 |
フォーマット | 5 mg |
プロトコルの概要 |
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カタログ 番号 | F2881 |
FluoReporter® lacZ/Galactosidase Quantitation Kit | |
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ターゲット | β-ガラクトシダーゼ |
レポーター | CUG |
励起/蛍光 (nm) | 386/448 |
生細胞 | 不可 |
ライセート | 可 |
酵素調製 | 可 |
使用方法 | 検出限界:0.5 pgのβ-gal |
構成品 | 基質とスタンダードをインキュベート。 |
フォーマット | 96ウェルフォーマットで1,000アッセイ |
プロトコルの概要 |
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カタログ 番号 | F2905 |
4-Methylumbelliferyl β-D-Galactopyranoside (MUG) | Fluorescein Di-β-D-Galactopyranoside (FDG) | Resorufin β-D-Galactopyranoside | 9H-(1,3-Dichloro-9,9-Dimethylacridin-2-One-7-yl) β-D-Galactopyranoside (DDAO galactoside) | |
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ターゲット | β-ガラクトシダーゼ | β-ガラクトシダーゼ | β-ガラクトシダーゼ | β-ガラクトシダーゼ |
レポーター | MUG | FDG | Resorufin β-D-Galactopyranoside | DDAO galactoside |
励起/蛍光 (nm) | 360/449 | 490/514 | 571/585 | 645/660 |
生細胞 | 不可 | 可 | 不可 | 不可 |
ライセート | 可 | 可 | 可 | 可 |
酵素調製 | 可 | 可 | 可 | 可 |
使用方法 | 細胞抽出物のβ-ガラクトシド活性の検出 | β-ガラクトシド検出用の高感度な緑色蛍光発生基質 | β-ガラクトシド検出用の赤色蛍光発生基質 | β-ガラクトシド検出用の遠赤色蛍光発生基質 |
構成品 | 酵素基質 | 酵素基質 | 酵素基質 | 酵素基質 |
フォーマット | 1 g | 5 mg | 25 mg | 5 mg |
プロトコルの概要 |
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カタログ 番号 | M1489MP | F1179 | R1159 | D6488 |
Fluorescein Di-β-D-Glucopyranoside (FDGlu) | |
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ターゲット | グルコシダーゼ |
レポーター | FDGlu |
励起/蛍光 (nm) | 490/514 |
生細胞 | 可 |
ライセート | 可 |
酵素調製 | 可 |
使用方法 | グルコシダーゼ検出用の高感度緑色蛍光発生基質 |
構成品 | 酵素基質 |
フォーマット | 5 mg |
プロトコルの概要 |
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カタログ 番号 | F2881 |
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.