Microplate Assays for Nucleic Acids

正確で効率的な核酸定量は、貴重なサンプルや希少なサンプル、または処理が困難なサンプルを扱ったり、正確な測定を必要とするアプリケーションを行う細胞・分子生物学ラボにとって非常に重要です。これらのアプリケーションとして、次世代シーケンシング、トランスフェクション、リアルタイムPCR、マイクロアレイ実験用のRNA調製収量の測定、逆転写PCR(RT-PCR)、ディファレンシャルディスプレイPCR、ノーザンブロット分析、S1ヌクレアーゼアッセイ、RNase保護アッセイ、cDNAライブラリ調製などがあります。

dsDNAアッセイ

PicoGreen試薬アッセイは、dsDNAの正確な定量を実現する、迅速かつシンプルな蛍光ベースの手法を提供します。このアッセイは従来のUV吸光度法よりも何倍も感度が高く、さまざまな濃度範囲に合わせて最適化できます。PicoGreen試薬アッセイは、アリル特異的PCRによるジェノタイピング、PCR増幅前後のdsDNAサンプルの定量、シーケンシング前のPCR増幅収量の測定に日常的に使用されます。

ssDNAアッセイ

OliGreen試薬アッセイは、ssDNAの正確な定量を実現する、迅速かつシンプルな蛍光ベースの手法を提供します。このアッセイは従来のUV吸光度法よりも何倍も感度が高く、遊離ヌクレオチドや最大6塩基の短いオリゴヌクレオチドはOliGreen ssDNA定量アッセイを妨げることはありません。OliGreen試薬アッセイは、アンチセンスオリゴヌクレオチド、アプタマー、変性条件下で分離されたゲノムDNA、PCRプライマー、シーケンシングプライマー、および一本鎖ファージDNAに日常的に使用されます。

RNAアッセイ

RiboGreen試薬アッセイは、RNAの正確な定量を実現する、迅速かつシンプルな蛍光ベースの手法を提供します。RiboGreen試薬は、遊離ヌクレオチドによる著しいサンプルコンタミネーションを検出しないため、分解された可能性のあるサンプル中の正常なRNAの量をより正確に測定します。RiboGreen試薬は、cDNA生成前のRNAの迅速で正確な測定、ノーザンブロット解析、S1ヌクレアーゼアッセイ、RNase保護アッセイ、逆転写PCR、およびディファレンシャルディスプレイPCRに最適です。

   
PicoGreen dsDNA Quantitation Reagent
PicoGreen dsDNA Quantitation Reagentを使用した、25 pg/mL~1,000 ng/mLの仔ウシ胸腺DNAの直線的定量。サンプルを480 nmで励起し、蛍光強度を520 nmで測定してDNA濃度に対してプロットしました。挿入図は、0~750 pg/mLのDNA濃度で得られた結果を示しています。
選択ガイド
 Quant-IT dsDNA Assay Kit, high sensitivityQuant-iT dsDNA Assay Kit, broad rangeQuant-iT 1X dsDNA high sensitivity
ターゲットdsDNAdsDNAdsDNA
測定範囲0.2~100 ng2~1,000 ng0.1~100 ng
励起/蛍光(nm)502/523510/527502/523
コンポーネントdsDNA HS fluorescent reagent、希釈バッファー、スタンダードdsDNA BR fluorescent reagent、希釈バッファー、スタンダード1x working solutionおよびスタンダード
フォーマット1,000アッセイ1,000アッセイ1,000アッセイ
プロトコルの概要
  • 蛍光試薬をバッファーで希釈して、working solutionを調製
  • working solutionをウェルに添加
  • 未知のDNAサンプルを添加
  • 蛍光を測定
  • 標準曲線と比較してdsDNAを定量
  • 1X working solutionをウェルに添加
  • 未知のDNAサンプルを添加
  • 蛍光を測定
  • 標準曲線と比較してdsDNAを定量
カタログ番号Q33120Q33130Q33232
 Quant-iT OliGreen ssDNA ReagentQuant-iT OliGreen ssDNA Assay Kit
ターゲットssDNAssDNA
励起/蛍光(nm)500/525500/525
サンプル溶液中のオリゴヌクレオチドおよび一本鎖DNA(ssDNA)を定量溶液中のオリゴヌクレオチドおよび一本鎖DNA(ssDNA)を定量
定量範囲200 µLの反応量で200 pg~2 µgのssDNAを検出200 µLの反応量で200 pg~2 µgのssDNAを検出
コンポーネントバルク試薬バッファーおよびDNAスタンダードを含む
アッセイフォーマット200 µLの反応量で2,000アッセイ分200 µLの反応量で2,000アッセイ分
プロトコルの概要
  1. サンプルをマイクロプレートウェルで希釈
  2. OliGreen reagentのworking solutionを添加
  3. 室温で2~5分間インキュベート
  4. 蛍光を測定
  5. 標準曲線と比較してssDNAを定量
カタログ番号O7582O11492
 Quant-iT RiboGreen RNA Assay KitQuant-iT RNA Assay KitQuant-iT RNA Assay Kit, broad rangeQuant-iT microRNA Assay KitQuant-iT RNA HS Reagent
ターゲットRNARNARNASmall RNARNA
測定範囲1~200 ng5~100 ng20~1,000 ng1~100 ng5~100 ng
励起/蛍光(nm)500/525644/673644/673500/525644/673
コンポーネントFluorescent RiboGreen RNA reagent、RNaseフリーバッファー、rRNAスタンダードFluorescent RNA reagent、RNaseフリーバッファー、rRNAスタンダードFluorescent RNA BR reagent、RNaseフリーBRバッファー、rRNAスタンダードFluorescent microRNA reagent、RNaseフリーmicroRNAバッファー、microRNAスタンダードFluorescent RNA HS reagent
プロトコルの概要
  1. サンプルをマイクロプレートウェルで希釈
  2. RNA reagent working solutionを添加
  3. 室温で2~5分間インキュベート
  4. 蛍光を測定
  5. 標準曲線と比較してRNAを定量
カタログ番号R11490Q33140Q10213Q32882Q32884
 Quant-IT dsDNA Assay Kit, high sensitivityQuant-iT dsDNA Assay Kit, broad rangeQuant-iT 1X dsDNA high sensitivity
ターゲットdsDNAdsDNAdsDNA
測定範囲0.2~100 ng2~1,000 ng0.1~100 ng
励起/蛍光(nm)502/523510/527502/523
コンポーネントdsDNA HS fluorescent reagent、希釈バッファー、スタンダードdsDNA BR fluorescent reagent、希釈バッファー、スタンダード1x working solutionおよびスタンダード
フォーマット1,000アッセイ1,000アッセイ1,000アッセイ
プロトコルの概要
  • 蛍光試薬をバッファーで希釈して、working solutionを調製
  • working solutionをウェルに添加
  • 未知のDNAサンプルを添加
  • 蛍光を測定
  • 標準曲線と比較してdsDNAを定量
  • 1X working solutionをウェルに添加
  • 未知のDNAサンプルを添加
  • 蛍光を測定
  • 標準曲線と比較してdsDNAを定量
カタログ番号Q33120Q33130Q33232
 Quant-iT OliGreen ssDNA ReagentQuant-iT OliGreen ssDNA Assay Kit
ターゲットssDNAssDNA
励起/蛍光(nm)500/525500/525
サンプル溶液中のオリゴヌクレオチドおよび一本鎖DNA(ssDNA)を定量溶液中のオリゴヌクレオチドおよび一本鎖DNA(ssDNA)を定量
定量範囲200 µLの反応量で200 pg~2 µgのssDNAを検出200 µLの反応量で200 pg~2 µgのssDNAを検出
コンポーネントバルク試薬バッファーおよびDNAスタンダードを含む
アッセイフォーマット200 µLの反応量で2,000アッセイ分200 µLの反応量で2,000アッセイ分
プロトコルの概要
  1. サンプルをマイクロプレートウェルで希釈
  2. OliGreen reagentのworking solutionを添加
  3. 室温で2~5分間インキュベート
  4. 蛍光を測定
  5. 標準曲線と比較してssDNAを定量
カタログ番号O7582O11492
 Quant-iT RiboGreen RNA Assay KitQuant-iT RNA Assay KitQuant-iT RNA Assay Kit, broad rangeQuant-iT microRNA Assay KitQuant-iT RNA HS Reagent
ターゲットRNARNARNASmall RNARNA
測定範囲1~200 ng5~100 ng20~1,000 ng1~100 ng5~100 ng
励起/蛍光(nm)500/525644/673644/673500/525644/673
コンポーネントFluorescent RiboGreen RNA reagent、RNaseフリーバッファー、rRNAスタンダードFluorescent RNA reagent、RNaseフリーバッファー、rRNAスタンダードFluorescent RNA BR reagent、RNaseフリーBRバッファー、rRNAスタンダードFluorescent microRNA reagent、RNaseフリーmicroRNAバッファー、microRNAスタンダードFluorescent RNA HS reagent
プロトコルの概要
  1. サンプルをマイクロプレートウェルで希釈
  2. RNA reagent working solutionを添加
  3. 室温で2~5分間インキュベート
  4. 蛍光を測定
  5. 標準曲線と比較してRNAを定量
カタログ番号R11490Q33140Q10213Q32882Q32884
Thermo Scientific plate readers

Thermo Scientificプレートリーダーを用いた蛍光の検出

Varioskan LUXマルチモードマイクロプレートリーダーと、最適な検出を実現するInvitrogen試薬を使用することで、96~1,536サンプルを高感度に蛍光検出できます。個々のウェルごとに最適なゲイン設定をもたらす自動ダイナミックレンジ選択および、スループットをよりいっそう向上させる各種の自動化機能をご活用いただけます。

リーダーの比較

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.