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Nucleus/Nucleolus Structure
細胞の核は、核膜、核小体、および核ラミナを含む膜結合オルガネラであり、遺伝子発現の部位でもあります。原子核構造は、核タンパク質を染色するか、直接核酸を染色することによって、選択的に視覚化することができます。細胞透過性の核酸染色試薬は、最小限の処理で生細胞または組織を染めることが可能であり、組織内での細胞の位置が自然な状態でわかります。また、細胞プロセス全体を通じて核変化を追うための手段を提供します。
ReadyProbes®試薬
ReadyProbes®試薬は、核酸用の最も容易な蛍光染色法を提供します。ReadyProbes®試薬はドロッパーボトルに入って提供されるので、室温保管可能で使いやすいです。バッファー1ミリリットルあたりわずか2滴を加えて細胞を染色します。マルチプレックス化および共局在化用の一連の波長に合わせて生細胞または固定細胞用のReadyProbes ®核染色試薬の選択が可能です。
核タンパク質用のCellLight®試薬
核標識用のCellLight®試薬を選ぶことで、ヒストン2B配列（13.7 kDa）を用いてヒストンタンパク質を標識し、染色体のダイナミックな動きを追うことや、SV40 核局在化配列（1.0 kDa）を用いた蛍光タンパク質の局在化が可能になります。CellLight®タンパク質は、生細胞あるいは固定処理済の細胞で共局在を確認するために他の蛍光プローブと複合的に使用することができます。これらのすぐに使えるコンストラクトは、簡単なトランスフェクションステップの後、蛍光融合タンパク質を発現し、最小限の毒性または化学的破壊で細胞染色試薬のように機能します。
核染色試薬
理想的な核染色色素はDNAとRNAの両方に親和性を示し、結合の際に蛍光増強を示します。生細胞染色では、真核生物および原核生物膜に浸透性で、細胞への最小限の毒性を示すものが理想的です。固定細胞染色では、安定かつ選択的なものであるべきです。固定細胞の染色に使用される、高親和性のDNA染色色素のいくつかは、死細胞染色でも使用されます。真核生物や原核生物の細胞膜に不透過性であるためです。
弊社では、生細胞や固細胞で多重染色・共局在観察ができるよう、多様な波長のMolecular Probes®核酸染色試薬を提供しています。
- 核染色試薬 の選択
核小体の染色
核小体は核内に見られる非膜結合体であり、リボソームRNAが転写される場所です。SYTO® RNASelect™Green Fluorescent Cell Stainは、RNAに選択的な細胞透過性の染色試薬です。SYTO® RNASelect™は、核酸がない場合にほとんど蛍光を発しませんが、RNAに結合すると明るい緑色蛍光を示し、DNAに結合すると弱い蛍光シグナルのみを示します。SYTO® RNASelect™染色試薬は核小体の検出に用いることができます。細胞は DAPIなどの核染色試薬で対比染色することが可能です。
- 核小体染色試薬 の選択
High-content screening (HCS)
多用途のHCS NuclearMask™ stainシリーズは、ハイコンテントイメージングおよび解析（HCS）プラットフォームにおいて、生細胞およびホルムアルデヒド固定細胞のDNA含有量を測定したり、細胞の境界線を示すのに使用できます。HCS NuclearMask™ stainシリーズは、様々な蛍光色が選択できるため、複雑な生物学的疑問を解明するための他の機能性および構造プローブとのマルチプレックス解析が可能です。
- HCS対応染色試薬 の選択
| Readout |
Fluorescent staining of nucleic acids
| ||
| Target |
Membrane-permeable dyes targeting RNA and DNA
|
Membrane impermeable dye targeting RNA and DNA
| |
| Common filter set | DAPI | Cy®5 | DAPI |
| Labels | Hoechst 33342 | NucRed® Live | DAPI |
| Ex/Em (nm) | 360/460 | 638/686 | 360/460 |
| Signal-to-noise ratio |  |  | |
| Photostability | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
No
|
| Fixed cells |
No
|
No
|
Yes
|
| Fixable |
Yes
|
No
|
No
|
| Platform |
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
| Protocol | Microscopy protocol | Microscopy protocol | Microscopy protocol |
| Format |
6 x dropper bottles
|
6 x dropper bottles
|
6 x dropper bottles
|
| Cat. No. | |||
| Readout |
Expression of fluorescent fusion protein
|
Expression of fluorescent fusion protein
| |||
| Target |
Labels histone proteins within the chromosome
|
Localizes flruorescent protein in the nucleus
| |||
| Common filter set | FITC | TRITC | DAPI | FITC | TRITC |
| Labels | GFP | RFP | CFP | GFP | RFP |
| Ex/Em (nm) | 488/520 | 555/584 | 435/485 | 488/520 | 555/584 |
| Signal-to-noise ratio |  | | | | |
| Photostability | | | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Fixed cells |
No
|
No
|
No
|
No
|
No
|
| Fixable |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Platform |
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
| Format |
1 mL
|
1 mL
|
1 mL
|
1 mL
|
1 mL
|
| Cat. No. | |||||
| SYTOX® Green Nucleic Acid Stain | TO-PRO®-3 Iodide | |||
|---|---|---|---|---|
| Readout |
Fluorescent staining of nucleic acids
| |||
| Target |
Membrane-permeable dyes targeting RNA and DNA
| |||
| Common filter set | FITC | TRITC | FITC | Cy®5 |
| Labels | SYTO® 9 | SYTO® 82 | SYTOX® Green | TO-PRO®-3 |
| Ex/Em (nm) | 483/503 | 541/560 | 483/503 | 642/661 |
| Signal-to-noise ratio | |  | | |
| Photostability | | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
No
|
No
|
| Fixed cells |
No
|
No
|
Yes
|
Yes
|
| Fixable |
Yes
|
Yes
|
No
|
No
|
| Platform |
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
| Protocol | Imaging protocol | Imaging protocol | Imaging protocol | |
| Format |
100 μL
|
250 μL
|
250 μL
|
1 mL
|
| Cat. No. | ||||
| Readout |
Fluorescent staining
|
| Target |
Selective for RNA
|
| Common filter set | FITC |
| Labels | SYTO® RNASelect™ |
| Ex/Em (nm) | 490/530 |
| Signal-to-noise ratio | |
| Photostability | |
| Multiplexing |
Yes
|
| Live cells |
No
|
| Fixed cells |
Yes
|
| Fixable |
Yes
|
| Platform |
Imaging
|
| Format |
100 μL
|
| Cat. No. |
| Readout |
Stains nucleus for demarcation
| ||
| Common filter set | DAPI | Texas Red® | Cy®5 |
| Ex/Em (nm) | 350⁄451 | 622⁄645 | 638⁄686 |
| Signal-to-noise ratio | | | |
| Photostability | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Fixed cells |
Yes
|
Yes
|
No
|
| Fixable |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Platform |
HCS
|
HCS
|
HCS
|
| Protocol | HCS protocol | HCS protocol | HCS protocol |
| Format |
65 µL
|
125 µL
|
400 µL
|
| Cat. No. | |||
| Readout |
Fluorescent staining of nucleic acids
| ||
| Target |
Membrane-permeable dyes targeting RNA and DNA
|
Membrane impermeable dye targeting RNA and DNA
| |
| Common filter set | DAPI | Cy®5 | DAPI |
| Labels | Hoechst 33342 | NucRed® Live | DAPI |
| Ex/Em (nm) | 360/460 | 638/686 | 360/460 |
| Signal-to-noise ratio | | | |
| Photostability | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
No
|
| Fixed cells |
No
|
No
|
Yes
|
| Fixable |
Yes
|
No
|
No
|
| Platform |
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
| Protocol | Microscopy protocol | Microscopy protocol | Microscopy protocol |
| Format |
6 x dropper bottles
|
6 x dropper bottles
|
6 x dropper bottles
|
| Cat. No. | |||
| Readout |
Expression of fluorescent fusion protein
|
Expression of fluorescent fusion protein
| |||
| Target |
Labels histone proteins within the chromosome
|
Localizes flruorescent protein in the nucleus
| |||
| Common filter set | FITC | TRITC | DAPI | FITC | TRITC |
| Labels | GFP | RFP | CFP | GFP | RFP |
| Ex/Em (nm) | 488/520 | 555/584 | 435/485 | 488/520 | 555/584 |
| Signal-to-noise ratio | | | | | |
| Photostability | | | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Fixed cells |
No
|
No
|
No
|
No
|
No
|
| Fixable |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Platform |
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
| Format |
1 mL
|
1 mL
|
1 mL
|
1 mL
|
1 mL
|
| Cat. No. | |||||
| SYTOX® Green Nucleic Acid Stain | TO-PRO®-3 Iodide | |||
|---|---|---|---|---|
| Readout |
Fluorescent staining of nucleic acids
| |||
| Target |
Membrane-permeable dyes targeting RNA and DNA
| |||
| Common filter set | FITC | TRITC | FITC | Cy®5 |
| Labels | SYTO® 9 | SYTO® 82 | SYTOX® Green | TO-PRO®-3 |
| Ex/Em (nm) | 483/503 | 541/560 | 483/503 | 642/661 |
| Signal-to-noise ratio | | | | |
| Photostability | | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
No
|
No
|
| Fixed cells |
No
|
No
|
Yes
|
Yes
|
| Fixable |
Yes
|
Yes
|
No
|
No
|
| Platform |
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
Imaging
|
| Protocol | Imaging protocol | Imaging protocol | Imaging protocol | |
| Format |
100 μL
|
250 μL
|
250 μL
|
1 mL
|
| Cat. No. | ||||
| Readout |
Fluorescent staining
|
| Target |
Selective for RNA
|
| Common filter set | FITC |
| Labels | SYTO® RNASelect™ |
| Ex/Em (nm) | 490/530 |
| Signal-to-noise ratio | |
| Photostability | |
| Multiplexing |
Yes
|
| Live cells |
No
|
| Fixed cells |
Yes
|
| Fixable |
Yes
|
| Platform |
Imaging
|
| Format |
100 μL
|
| Cat. No. |
| Readout |
Stains nucleus for demarcation
| ||
| Common filter set | DAPI | Texas Red® | Cy®5 |
| Ex/Em (nm) | 350⁄451 | 622⁄645 | 638⁄686 |
| Signal-to-noise ratio | | | |
| Photostability | | | |
| Multiplexing |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Live cells |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Fixed cells |
Yes
|
Yes
|
No
|
| Fixable |
Yes
|
Yes
|
Yes
|
| Platform |
HCS
|
HCS
|
HCS
|
| Protocol | HCS protocol | HCS protocol | HCS protocol |
| Format |
65 µL
|
125 µL
|
400 µL
|
| Cat. No. | |||
Resources
Research toolsMolecular Probes® Handbook | BioProbes® 70 Journal articleRelated instruments and applications |
Stylesheet for Classic Wide Template adjustments
For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.