Microscopic image of cells labeled with green mitochondria fusion protein, red talin cytoskeletal fusion protein, and blue nucleus stain

CellLight蛍光タンパク質を使用すると、生細胞中の特定の構造を容易に標識化できます。すぐに使用できるコンストラクトを細胞に添加し、一晩インキュベートするだけで、翌朝にはイメージングの準備が整います。これらのコンストラクトは、特定の細胞内構造をターゲットとする蛍光融合タンパク質を発現します。蛍光タンパク質は、BacMam技術を用いた簡単なトランスフェクションステップにより導入され、分子生物学的技術を必要としないため、細胞染色液のように機能します。

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CellLight蛍光タンパク質による標識化の利点

  • 実験ニーズを満たすのに理想的な特異性の高い細胞内ターゲット
  • どの細胞構造にも、添加-インキュベーション-イメージングという簡単なプロトコルを使用可能
  • 他のCellLightタンパク質、抗体、または有機色素を用いたマルチプレックス解析が可能

CellLight蛍光タンパク質選択ガイド

 GFPRFPCFP
励起波長領域488-510555-584435-485
サイズ1 mL1 mL1 mL
アクチンC10582C10583
細胞質B10383
小胞体C10590C10591
初期エンドソームC10586C10587
後期エンドソームC10588C10589
ゴルジC10592C10593
ヒストン(ヒストン2B)C10594C10595
リソソームC10596C10597
ミトコンドリアC10600C10601
C10602C10603
ペルオキシソームC10604
細胞膜C10607C10608C10606
タリンC10611
チューブリンC10613C10614
BacMam 2.0形質導入コントロールB10383
コンジュゲートなし
Null virus (control)C10615

※日本国内において上記CellLight製品はいずれも、カルタヘナ法該当製品として販売しております。

CellLightワークフロー

Schematic of adding CellLight fluorescent proteins to your cells

BacMam 2.0ベースのCellLight蛍光融合タンパク質を使用して遺伝子を発現するのは、簡単かつ効率的です。

  1. 完全培地の細胞にウイルスを添加します。
  2. 一晩インキュベートします。
  3. 画像化や、将来の使用用に冷凍します。

プレートに細胞を入れる直前にCellLight蛍光融合タンパク質と混合することで、形質を導入できます。あるいは、すでにディッシュまたはプレート上にある細胞にウイルスを添加することで接着細胞に形質を導入することもできます。一般的に、70%コンフルエンスでBacMam粒子と細胞の比率を20:1にすると、形質導入が一番うまくいきます。

BacMamデリバリー技術

BacMam技術を用いると、アッセイに応じた細胞モデルを作成し実行するために、効率的な形質導入システムを構築できます。BacMam技術により、ターゲット蛍光タンパク質で小器官を標識化したり、イオンチャネルや受容体などの薬剤ターゲットを発現したり、蛍光タンパク質インジケーターで細胞プロセスをモニタリングしたりできます。Invitrogen ViraPower BacMam発現システムを使用して、ユーザー独自のカスタム構造体を作成することもできます。

CellLight蛍光融合タンパク質の使用に関するガイドライン

CellLight蛍光融合タンパク質の使用を推奨:

  • 毒性や化学的破壊を最小限に抑えながら、生細胞中の小器官または細胞内構造をターゲットとする場合
  • より高い解像度を必要とする機能を識別する場合
  • 個々の細胞の挙動をトラッキングするため、他のCellLight蛍光タンパク質や有機色素を用いたマルチプレックス解析で、生細胞や固定細胞を解析する場合
  • 膜の電位に関係なくミトコンドリアを標識化する場合や、pHに関係なくリソソームを標識化する場合

CellLight蛍光融合タンパク質の使用を非推奨:

  • 細胞集団研究または自動イメージング/カウントを行う場合。CellLight蛍光融合タンパク質が100%のトランスフェクション率をもたらすことはめったにないため。(トランスフェクション率と条件は細胞タイプによって異なることがあり、使用に関する膨大な参照リストを支給)

CellLight画像ギャラリー

  • Mitochondria and cytoskeleton staining in live HeLa cells
  • Cytoskeleton staining in live HEKn cells
  • Oxidative stress detection in human osteosarcoma (U2OS) cells
  • Peroxisome and golgi staining in live HEKn cells
  • Cytoskeleton staining and autophagy detection in live U2OS cells
  • Monitoring autophagy, tubulin, and mitochondria in live U2OS cells
  • Cytoskeleton staining in live HEKn cells
  • Nucleus and mitochondria staining in live HeLa cells
  • Cytoskeleton staining in live HEKn cells

CellLight試薬のビデオ

ニューロン成長円錐ダイナミクスのリアルタイムの可視化


U2OS細胞分裂のタイムラプス動画

Stylesheet for Classic Wide Template adjustments

For Research Use Only. Not for use in diagnostic procedures.