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リソソームは膜結合小器官で、生体分子の分解、アポトーシス、細胞シグナル伝達、代謝、および細胞膜修復などのいくつかの細胞プロセスに関与しています。リソソームマーカーはリソソームの同定および追跡に効果的なツールです。LysoTrackerマーカーは酸性の内容物を標的とし、リソソーム内に局在します。一方、CellLight蛍光融合タンパク質はリソソーム膜を標的としており、リソソームの位置を特定したり追跡します。
リソソームは膜結合小器官で、糖質、脂質、核酸、およびペプチドなどの生体分子を分解する酵素を含有しています[1–3]。細胞内分子はオートファジーと呼ばれるプロセスによって消化され、エンドサイトーシスによって取り込まれた細胞外物質は食作用と呼ばれるプロセスによって消化されます[1, 2]。 リソソームはまた、食作用によるウイルス粒子や細菌の消化にも関与しています。リソソームは、細胞内外の物質の輸送、増殖および成長を調節するシグナル伝達、細胞代謝などの他の細胞プロセスに関与していることが示されています[3]。
ターゲット | 酸性のオルガネラが標的 | |||
リードアウト | 蛍光イメージングによるリソソームの局在 | |||
一般的なフィルターセット | DAPI | FITC | TRITC | Cy5 |
標識 | LysoTracker Blue | LysoTracker Green | LysoTracker Red | LysoTracker Deep Red |
励起/発光(nm) | 373/422 | 504/511 | 577/590 | 647/668 |
シグナル対ノイズ比 | ||||
光安定性 | ||||
マルチプレックス解析 | 可 | 可 | 可 | 可 |
生細胞 | 可 | 可 | 可 | 可 |
固定細胞 | 不可 | 不可 | 不可 | 不可 |
固定可能 | 不可 | 不可 | 可 | 不可 |
フォーマット | 20 x 50 uL | 20 x 50 uL | 20 x 50 uL | 5 x 50 uL |
カタログ番号 | L7525 | L7526 | L7528 | L12492 |
ターゲット | 酸性のオルガネラが標的 | |||
リードアウト | 蛍光イメージングによるリソソームの局在 | |||
一般的なフィルターセット | DAPI | FITC | TRITC | Cy5 |
標識 | LysoTracker Blue | LysoTracker Green | LysoTracker Red | LysoTracker Deep Red |
励起/発光(nm) | 373/422 | 504/511 | 577/590 | 647/668 |
シグナル対ノイズ比 | ||||
光安定性 | ||||
マルチプレックス解析 | 可 | 可 | 可 | 可 |
生細胞 | 可 | 可 | 可 | 可 |
固定細胞 | 不可 | 不可 | 不可 | 不可 |
固定可能 | 不可 | 不可 | 可 | 不可 |
フォーマット | 20 x 50 uL | 20 x 50 uL | 20 x 50 uL | 5 x 50 uL |
カタログ番号 | L7525 | L7526 | L7528 | L12492 |
LysoTrackersは細胞透過性リソソームマーカーで、生細胞中の酸性オルガネラを標的にし、追跡します。LysoTrackerマーカーは、弱塩基性アミンに結合したフルオロフォアで構成されています。LysoTracker保持のメカニズムは比較的不明ですが、オルガネラの膜に保持された状態でプロトン化するためと考えられます。これらのリソソームマーカーは、pHが低く、中性pHでは部分的にしかプロトン化されていないオルガネラに蓄積します。LysoTrackerリソソームマーカーは、他の蛍光マーカーとのマルチプレックス化を可能にするよう、さまざまな色で提供されています(図1および2)。
CellLight蛍光融合タンパク質はリソソーム膜コンストラクトで、生細胞内のリソソームを標識して細胞内挙動のダイナミクスを追跡します。CellLight蛍光タンパク質は、emGFP(図3)またはTagRFP(図4)に融合したLamp1(リソソーム関連膜タンパク質1)コンストラクトを使用します。 CellLightリソソーム膜マーカーは緑色または赤色の蛍光融合タンパク質で提供されており、他の蛍光色素やタンパク質とのマルチプレックスが可能です。さらに、蛍光染色は固定および透過処理後も維持されます。
リソソーム膜マーカーは、オートリソソームの分解前にオートファゴソームとの融合を追跡するためのツールとしても機能します。
図4.CellLight蛍光融合タンパク質による生細胞イメージング。Cascade Biologics社のヒト大動脈平滑筋細胞(HASMC)をCellLight Lysosomes-RFP、CellLight MAP4-GFP、およびHoechst 33342で形質導入しました。生細胞をDeltaVision Core顕微鏡と標準的なDAPI/FITC/TRITCフィルターセットを使用してイメージングしました。
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