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標準的なピペッティングにはフォワード法を使用:
この方法は、バッファー、薄い酸、またはアルカリなどの水溶液に推奨され、一般的にサンプルや試薬を他の液体に分注して混合する際に使用します。
粘性の高い溶液や泡立ちやすい溶液にはリバース法を使用:
このテクニックは一般的に空気置換ピペットで使用し、正確な微量分注に推奨されます。リバース法は、サンプルの飛び散り、気泡、泡立ちなどのリスクを防止します。
プラスチック製ラボウェアはさまざまな選択肢がありますが、多くの場合、作業の質は高品質のプラスチック製ラボウェアの使用に左右されます。すべてのラボウェア製品は同じように見えるかもしれませんが、これらすべてが同じように作られているわけではありません。低コストの代替品には親切な価格が付いていますが、「安かろう悪かろう」という古いことわざを覚えておいてください。
規制基準:
高品質のプラスチック製ラボウェアは、一般に認められているASTMおよびISOの精度基準を満たしている必要があります。また、不純物が試薬やサンプルに漏出しないラボグレードのプラスチック材料で製造されている必要があります。容器は漏出防止性能を保証し、ユーザを曝露から保護したり、作業を安全に封じ込める必要があります。
当社製品の製造にはラボグレードのプラスチック樹脂材料を使用しています。Nalgene製品は常に完璧に機能することにおいてお客様から信用されています。また、当社は重要なラボ作業のために満足できる製品を提供している点においても信頼されています。
正確なピペッティングのために、分注前に少なくとも3回、分注量でサンプルを吸排します。プレウェットを怠ると、チップ内のエアギャップ内の蒸発が増加し、排出量が顕著に低下します。プレウェットはチップ内の湿度を高め、蒸発を防ぎます。
液体を排出する前に、チップを容器のふちに軽く触れてチップの外側の余分な液滴を慎重に取り除きます。また、チップの毛細管現象を防ぐために、チップ開口部には何もないようにします。液体の排出後やプッシュボタンを放す前に、チップを容器のふちに触れてチップ内の残液を排出してください。チップの外側についた液体を除くには、表面張力を利用すると容易にできます。
プッシュボタンを1段目まで押し下げ、チップを液体に浸し、プッシュボタンを放してサンプルを吸引します。ピペットを液体から引き上げ、プッシュボタンを2段目まで押して分注します。このフォワード法は、リバース法よりも正確度と精密度のどちらも高く、粘性の高い溶液や揮発性物質を除いてほぼすべての溶液に適しています。リバース法は分注量が多くなることがよく発生します。そのため、その影響を検証し、必要に応じて調製することが推奨されます。
液体を吸引後、1秒待ってからチップを液体から引き上げてください。この一呼吸は、できるだけ一定して行ってください。プッシュボタンが上がった後も少しの間、液体はチップ内に流入します。同様に、チップ内では蒸発が起こり始めています。一呼吸を一定に保つことで、この2つの影響を保ち、正確に吸引できるようになります。
液体を吸引する時はピペットを垂直に保ち、ピペットを容器の中央から真っすぐ引き上げます。この技術は、少量(50 µL以下)の分注で特に重要です。ピペットを傾けたまま液体から引き上げると、吸引量に誤差が生じます。
ピペットはフィンガーレストを使用して軽く握ります。ピペットを使用しない時は、スタンドにかけるようにします。チップやリザーバーは素手で触らないようにしてください。手の熱が温度平衡を崩し、分注量の誤差につながります。
ピペットには高品質のチップを選択します。純正チップはピペットとの適合を考えて設計されています。チップとピペットの適合が悪い場合、正確度や精密度、またはその両方に影響を与えます。高品質の純正チップは確実に密閉し、高品質の材料で一体成型技術により製造されています。また純正チップはリキッドハンドリングの信頼性を確保します。
プッシュボタンを1段目に届くまで軽い力で一定にゆっくり押します。チップを液体に入れたら、一定の速さでプッシュボタンを放します。同じ動作の繰り返しがデータの再現性向上につながります。