CRISPRトランスフェクション

トランスフェクションとは、CRISPRリボ核タンパク質（RNP）、DNA、RNA分子を細胞内の導入するプロセスのことです。CRISPR-Cas9ワークフローでの課題となるステップの1つがトランスフェクションのステップであり、選択した細胞株にCRISPR-Cas9コンポーネントをいかに効果的に導入するかが重要です。CRISPRの導入には多くの方法がありますが、最も適切な方法はアプリケーションによって異なります。

サーモフィッシャーサイエンティフィックからは、NeonエレクトロポレーションシステムからInvitrogen Lipofectamine試薬シリーズまで、CRISPRトランスフェクションのあらゆるニーズに対応する包括的ソリューションが提供されています。いずれの製品においても、導入の簡便性と高効率なトランスフェクションのために最適化されたプロトコルプロトコルが用意されています。お客様のゲノム編集ワークフローに最適な導入方法は、以下のガイドをご参照ください。

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CRISPRの導入方法には、脂質ナノ粒子を介したトランスフェクションや、エレクトロポレーションやマイクロインジェクションといった物理的方法など、いくつかの方法があります。

レンチウイルス形質導入では、レンチウイルスベクターを用いて核酸を細胞内に導入します。Cas9レンチウイルスが細胞に入ると、CRISPR-Cas9システムによって細胞DNAが改変されます。その後、このトランスジェニックホストが作用することで、遺伝子改変が発現し続けます。レンチウイルス形質導入は、目的のCRISPR修飾配列を継続的に発現する安定細胞株の作製によく使用されます。