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Silencer siRNA 标记试剂盒
- 可兼容化学和酶促合成 siRNA
- 可标记多达 12 个 siRNA（单链或双链）
- 有 Cy™3 和荧光素标记试剂盒可供选择
Silencer siRNA 标记试剂盒是
Silencer siRNA 构建试剂盒的出色补充，但也可用于标记化学合成 siRNA。有两种标记试剂盒可供选择：Cy3 和 FAM。各试剂盒均可提供标记 65 µg siRNA 所需的所有试剂。标记反应是可扩展的，但通常每个试剂盒可标记十二份 5 µg siRNA 等份试液。标记 siRNA 可用于分析 siRNA 亚细胞定位、稳定性和转染效率，并用于鉴别转染细胞进行进一步分析。荧光标记的 siRNA 尤其适用于在双标记实验（含有标记抗体）中追踪转染过程中获得 siRNA 的细胞并将转染与靶蛋白的下调相关联。
图 1 显示了利用 Cy3 标记 GAPDH siRNA 和使用 Silencer Cy3 siRNA 标记试剂盒制备的相应 Cy3 标记加扰 siRNA 序列进行的沉默实验。将标记的 siRNA 分别转染到 HeLa S3 细胞中，然后通过荧光显微镜检查进行成像。使用抗 GAPDH 抗体监测 GAPDH 表达沉默。与使用加扰 siRNA 序列的图 B 相比，图 A 中缺乏 GAPDH 蛋白表达（绿色），表明靶向 GAPDH 的 siRNA 具有较强的沉默效应。各 Silencer siRNA 标记试剂盒均配有标记 65 µg siRNA 的试剂、用于标记的 GAPDH 对照以及详细的说明书。
图 1. siRNA 沉默 GAPDH 基因表达。使用 Ambion 的 Silencer siRNA 标记试剂盒使用 Cy3 对靶向人 GAPDH 的 siRNA 和加扰对照进行荧光标记，转染到 HeLa S3 细胞中，并通过荧光显微镜检查使用抗 GAPDH 抗体进行分析。红色：Cy3 标记 siRNA；蓝色：DAPI 染色细胞核；绿色：抗 GAPDH 的荧光素标记抗体。A. GAPDH 在采用 GAPDH siRNA 转染的细胞中无法检测到。B. GAPDH 在采用加扰对照 GAPDH siRNA 转染的细胞中可轻松检测到。
Cy3 是 Amersham BioSciences 的商标。
Silencer siRNA 标记试剂盒含有 MIRUS 为 Ambion 生产的试剂。
图 1 显示了利用 Cy3 标记 GAPDH siRNA 和使用 Silencer Cy3 siRNA 标记试剂盒制备的相应 Cy3 标记加扰 siRNA 序列进行的沉默实验。将标记的 siRNA 分别转染到 HeLa S3 细胞中，然后通过荧光显微镜检查进行成像。使用抗 GAPDH 抗体监测 GAPDH 表达沉默。与使用加扰 siRNA 序列的图 B 相比，图 A 中缺乏 GAPDH 蛋白表达（绿色），表明靶向 GAPDH 的 siRNA 具有较强的沉默效应。各 Silencer siRNA 标记试剂盒均配有标记 65 µg siRNA 的试剂、用于标记的 GAPDH 对照以及详细的说明书。
图 1. siRNA 沉默 GAPDH 基因表达。使用 Ambion 的 Silencer siRNA 标记试剂盒使用 Cy3 对靶向人 GAPDH 的 siRNA 和加扰对照进行荧光标记，转染到 HeLa S3 细胞中，并通过荧光显微镜检查使用抗 GAPDH 抗体进行分析。红色：Cy3 标记 siRNA；蓝色：DAPI 染色细胞核；绿色：抗 GAPDH 的荧光素标记抗体。A. GAPDH 在采用 GAPDH siRNA 转染的细胞中无法检测到。B. GAPDH 在采用加扰对照 GAPDH siRNA 转染的细胞中可轻松检测到。
Cy3 是 Amersham BioSciences 的商标。
Silencer siRNA 标记试剂盒含有 MIRUS 为 Ambion 生产的试剂。