• 快速 - 在细胞铺板时转染细胞，可节省一天时间
  • 高效 - 递送效率较高，因此可使用较低 siRNA 浓度
  • 可重现 - 一致的批间、板间和孔间结果
  • 通用 - 适用于多种细胞系
  • 强效 - 在存在或不存在血清的情况下均具有低细胞毒性


进行和优化基因沉默实验可能非常耗时，部分原因是需要在转染前一天对细胞进行预铺板。然而，siPORT™ NeoFX™ 转染试剂为简化 siRNA 转染实验流程而开发。在传代培养贴壁细胞时，脂质体制剂可高效转染贴壁细胞，而不增加细胞毒性。使用 siPORT NeoFX 转染试剂可在不到 24 小时内成功完成基因沉默实验。该方案可适应多种细胞系（图 1）和实验设计，包括高通量应用。

在铺板过程中转染细胞，可节省一天时间

尽管 siPORT NeoFX 转染试剂与标准转染方法兼容，但也可用于在传代培养期间转染细胞。只需将这种转染试剂与 siRNA 混合，孵育以形成转染复合物，添加到培养物孔中，并覆盖细胞。相较于传统的铺板转染程序，该方案可节省一天时间。此外，在转染后无需去除或更换培养基，因为即使在存在血清的情况下，转染复合物仍具有活性和稳定性。

递送效率较高，因此可使用较低 siRNA 浓度

siRNA 浓度 ≥ 100 nM 可导致培养的哺乳动物细胞中基因表达的非特异性变化（脱靶效应）。将用于转染的 siRNA 的量减少至 1-20 nM 可尽可能减少此类非特异性效应，同时仍可实现高效的靶基因沉默。已对 siPORT NeoFX 转染试剂进行优化，甚至可递送皮摩尔量的 siRNA（图 2）。

获得一致的结果

siPORT NeoFX 转染试剂在多种温度下都非常稳定，因此在不同日期和不同实验之间都能够实现可重现的 siRNA 递送。所有这些有利的特性使该转染试剂成为用于 RNAi 筛选实验的高效试剂。


图 1. siPORT™ NeoFX™ 转染试剂将 siRNA 高效递送至多种细胞类型中。使用 siPORT NeoFX 转染试剂将 Silencer GAPDH siRNA 或阴性对照 #1 siRNA (10 nM) 转染至指定细胞类型中。所示数据为相对于阴性对照 siRNA 转染细胞的剩余 mRNA 水平（转染后 48 小时通过实时荧光定量 PCR 测定）。


图 2.使用低浓度 siRNA 实现高效转染。对 HeLa 细胞进行胰蛋白酶化处理并以 4 x 10 4 个细胞/mL 的浓度将其重悬于生长培养基中。使用化学合成的 GAPDH siRNA（0.03 nM 至 10 nM，参见上图）或阴性对照 siRNA 和 2 µL siPORT™ NeoFX™ 转染试剂制备转染复合物。转染后 48 小时，收获细胞并通过实时 RT-PCR 分析 GAPDH mRNA 和 18S rRNA 水平。使用 18S rRNA 作为内部对照，显示了相对于阴性对照 siRNA 转染细胞的剩余 GAPDH mRNA。