定义培养细胞中 siRNA 递送的出色条件

Silencer siRNA 入门试剂盒是推荐刚开始进行 siRNA 实验的研究人员使用的试剂盒，因为它具有便利的对照 siRNA、siRNA 转染试剂以及下游检测试剂包。所含的 siPORT™ NeoFX™ 转染试剂可以有效地将 siRNA 递送至多种细胞系，并支持反向和正向（“预铺板”）转染方案。试剂盒还包括一个已充分表征的 Silencer GAPDH siRNA，其显示可强效下调人、小鼠和大鼠细胞中的 GAPDH 基因（参见边栏，为什么使用 GAPDH 对照 siRNA？）以及一个非靶向阴性对照 siRNA（称为 Silencer 阴性对照 #1 siRNA）。最后，该试剂盒包含三种不同的系统，用于监测 GAPDH siRNA 诱导的敲低。提供 抗 GAPDH 抗体以通过 Western 印迹或免疫荧光评估 GAPDH 蛋白水平。还提供 Ambion KDalert™ GAPDH 检测试剂盒以快速测定 GAPDH 酶活性。该检测试剂盒的另一个益处是可通过该产品来评估细胞活力。最后，包括 RT-PCR 引物，用于 GAPDH mRNA 的实时定量 RT-PCR 检测。

Silencer siRNA 转染 II 试剂盒是优化任何规模平板中 siRNA 转染条件的理想选择。该试剂盒包括 siPORT 胺和 siPORT NeoFX 转染试剂，可实现广泛的细胞系兼容性。这两种转染试剂均支持传统的“预铺板”转染方案以及反向转染程序，在传代培养期间转染细胞。使用 Silencer GAPDH siRNA 和非靶向 Silencer 阴性对照 #1 siRNA 监测转染效率。由于 Ambion Silencer siRNA 转染 II 试剂盒包含两种转染试剂，其可轻松识别适合您细胞类型的 siRNA 递送试剂和条件。

Silencer CellReady™ siRNA 转染优化试剂盒专门开发用于加速 96 孔板中 siRNA 转染的优化。该试剂盒配备了三块 96 孔板，含有靶向人、小鼠以及大鼠 GAPDH 的预铺板阳性对照 siRNA 以及非靶向阴性对照 siRNA。它还包括 siPORT NeoFX 转染试剂。可通过每块平板上 siRNA 的便利排列来评估多达 24 种重复转染条件的有效性。

所有三种 siRNA 转染试剂盒所附的详细说明均有助于新用户检测重要变量，例如转染试剂的选择、转染试剂体积、细胞数量、潜在转染后洗涤的时间以及转染后检测的时间。

通过测定使用 GAPDH siRNA 转染的细胞（相对于使用阴性对照 siRNA 转染的细胞）中 GAPDH mRNA 和/或蛋白水平的下降，频繁监测 siRNA 递送效率。

KDalert™ GAPDH 检测试剂盒为研究人员提供了测定培养的人、小鼠或大鼠细胞中 GAPDH 酶活性的可靠方法，从而简化了这一步骤。利用该简单直接的检测试剂盒（可以在 30 分钟内完成），研究人员可使用微孔板荧光计进行定量测定（也可以使用光吸收酶标仪）。除了可用于快速监测 GAPDH siRNA 诱导的敲低外，该检测试剂盒还可用于在同一实验中监测转染试剂诱导的毒性（图 2）。针对此分析，将阴性对照 siRNA 转染细胞的 GAPDH 活性与未处理细胞的 GAPDH 活性进行比较。KDalert GAPDH 检测试剂盒可与本文章中所列所有 Ambion 转染优化产品无缝集成。